- Nuôi cấy bề mặt (surface cultivation): Thường vi sinh vật phát triển trên bề mặt môi trường Ví dụ, vi sinh vật phát triển trên bề mặt môi trường thạch trong hộp Petri hay phát
2.4.2.2. Giai đoan nhân giống (giai đoạ nở xưởng)
Giống được cấy chuyển một số lần từ mơi trường ít sang mơi trường nhiều (nhân giống cấp 1, 2, 3…) và kết quá trình nhân giống thì phải thu được tỷ lệ giống giao động từ 1-10% so với thể tích mơi trường lên men.
Kết thúc khâu nhân giống cần phải kiểm tra chất lượng, số lượng giống trước khi cấy vào nồi lên men.
Để đảm bảo chất lượng giống tốt cho q trình lên men thì giống phải có khả năng sinh trưởng phát triển tốt (cho sinh khối nhiều) và thời gian cấy giống vào bình lên men thì giống sinh trưởng, phát triển đang ở pha tăng tốc (pha log) là tốt nhất.
Cách làm: Giống đã được hoạt hóa trên máy lắc được cấy 1-5% sang bình nhân giống cấp 1 có mơi trường nhân giống đã được lựa chọn (thường tỷ lệ mơi trường bằng 2/3 thể tích bình) và ni cấy có sục khí và khuấy trộn ở nhiệt độ phù hợp cho đến khi giống phát triển tốt thì cấy truyền sang bình lên men với tỷ lệ 10% so với mơi trường lên men, nếu lên men trên bình lên men lớn hơn thì nhân giống cấp 2 trong bình lên men thường có dung tích gấp 10 lần bình nhân giống cấp 1, cịn lên men lớn hơn nữa thì cấy sang bình nhân giống cấp 3, thể tích bình gấp 10 lần bính nhân giống cấp 2 sao cho lượng giống cấy vào bình lên men đạt 10% thể tích mơi trường lên men trong bình lên men.
Cần chú ý: Thiết bị và quá trình thao tác đều phải đảm bảo vơ trùng. Với bình nhân giống nhỏ (nhân giống cấp 1) thì chuẩn bị mơi trường cho vào bình, sau đó đi khử trùng trong nồi áp suất, cịn bình nhân giống lớn (cấp 2 và cấp 3) thì khử trùng ngay trong bình lên men. Phải kiểm tra chất lượng giống (đặc biệt là nhiễm tạp) ở các công đoạn trước khi cấy sang bình nhân giống tiếp theo.