- Nuôi cấy bề mặt (surface cultivation): Thường vi sinh vật phát triển trên bề mặt mơi trường Ví dụ, vi sinh vật phát triển trên bề mặt môi trường thạch trong hộp Petri hay phát
1. Bể hiếu khí khuấy trộn hồn tồn thơng thường.
4.3.3.1. Khử trùng môi trường lỏng để lên men chìm
Nguyên tắc khử trùng môi trường lên men xem mục 3.2.2.1, Chương 3. Trong lên men công nghiệp, khử trùng mơi trường lỏng có thể chọn một trong những phương pháp gián đoạn và liên tục như sau:
- Phương pháp gián đoạn thường sử dụng cho thanh trùng môi trường lên men khơng lớn bằng cách đun nóng mơi trường lên nhiệt độ và áp suất nhất định, kéo dài 30 đến 60 phút, sau đó được làm lạnh đến 27-30oC. Đối với mơi trường lên men sản xuất lớn thường thời gian giữ nhiệt giảm hơn (bảng 4.5).
Bảng 4.5: Thời gian thanh trùng ở nhiệt độ cao với thể tích mơi trường khác nhau Kích thước nồi
lên men (lit) Thời gian khử trùng(phút) Kích thước nồi lênmen (lit) Thời gian khử trùng(phút)
105oC 121oC 105oC 121oC
230 28,0 17,5 9800 41,3 11,3
980 33,7 12,5 98000 51,5 8,8
- Phương pháp liên tục sử dụng cho việc thanh trùng mơi trường có thể tích lớn bằng cách như sau: Mơi trường, sau khi chuẩn bị, chuyển vào thiết bị khử trùng dạng cột có hệ thống ống xoắn bằng máy bơm đặc biệt, cho hơi nước qua với áp suất khoảng 5 atm, nhiệt độ đạt 125-130oC kéo dài 5-10 phút. Sau đó được làm lạnh và chuyển vào nồi lên men. Phương pháp này có nhiều ưu điểm: Có thể tự động hố q trình, thời gian nhanh và đồng đều, đảm bảo độ vô trùng cao hơn. Như vậy, thiết bị khử trùng liên tục có ba bộ phận: (a) bộ phận khử khuẩn là cột được gia nhiệt bằng hơi khi môi trường lỏng chảy qua, (b) bộ phận tiếp theo là bình giữ dịch ở nhiệt độ xác định trong khoảng thời gian gần bằng thời gian để diệt tối đa số vi sinh vật, bộ phận này có thể là thùng hình trụ hoặc cột có các vách ngăn hoặc các tầng đĩa để phân tán nhiệt cho đồng đều cả khối môi trường hoặc ở dạng ống xoắn trao đổi nhiệt và (c) bộ phận thứ ba là bộ phận làm nguội môi trường có hệ trao đổi nhiệt với nước làm việc với áp suất dư 0,3 – 0,5 atm.