5. Bố cục luận án
3.4.2. Ảnh hưởng của nồng độ ethanol đến khả năng chiết xuất AGIs từ đỗ đen lên men
Kết quả (Hình 3.19) cho thấy, khả năng chiết xuất AGIs từ đỗ đen lên men tăng tương ứng với các dung môi nước cất, isopropyl alcohol 96%, ethanol 96% và methanol 96% cho hoạt tính kìm hãm α-glucosidase lần lượt là 57,06 ± 1,12; 61,40 ± 0,71; 61,87 ±
1,31 và 63,20 ± 1,42%, khả năng chiết xuất AGIs của methanol và ethanol là lớn nhất. Điều này cũng phù hợp với nghiên cứu của Fujita Hiroyukia và cộng sự năm 2001[70] và nghiên cứu của Kawabata và cộng sự năm 2000 [84] chiết xuất AGIs từ đỗ tương lên men bằng nước, methanol, hoặc hổn hợp ethanol cho hoạt tính kìm hãm α-glucosidase cao. Khả năng chiết xuất AGIs của dung môi methanol lớn hơn so với ethanol không nhiều, trong khi hoạt lực kìm hãm α-glucosidase của chất hòa tan trong dung môi chiết xuất là ethanol mạnh nhất (IC50 là 427,32 ± 12,36 µg/ml), mạnh hơn cả hoạt lực kìm hãm α-glucosidase của chất hòa tan trong dung môi chiết xuất là methanol (IC50 là 480,43 ± 14,57 µg/ml), thấp nhất là hoạt lực kìm hãm α-glucosidase của chất hòa tan trong dung môi chiết xuất là nước (IC50 là 563,21 ± 11,61µg/ml), điều này có thể do methanol có khả năng hòa tan các tạp chất không có hoạt tính kìm hãm α-glucosidase nhiều hơn so với ethanol. Nước và ethanol là những dung môi dễ kiếm, thân thiện với môi trường, các dung môi này không độc, rẻ hơn so với methanol và isopropyl alcohol. Mặt khác, trong chế biến thực phẩm, dung môi sử dụng không chỉ có khả năng chiết xuất tốt, mà điều quan trọng là đảm bảo được tính an toàn cho sản phẩm.
Kết hợp các yếu tố trên, ethanol là dung môi thường được sử dụng để chiết xuất các hợp chất cho thực phẩm vì nó an toàn cho sức khỏe và được lựa chọn làm dung môi chiết xuất AGIs, cho hoạt tính kìm hãm α-glucosidase đạt 61,87 ± 1,31%, IC50 là 427,32 ± 12,36 µg/ml sau 6 phút chiết xuất bằng ethanol 96%, tỷ lệ dung môi : bột đỗ đen là 6 lít / kg, ở nhiệt độ 600C, siêu âm cường độ 8W/cm2 ở tần số 20 kHz.
3.4.2. Ảnh hưởng của nồng độ ethanol đến khả năng chiết xuất AGIs từ đỗ đen lên men lên men
Nghiên cứu xác định hoạt tính kìm hãm α-glucosidase theo nồng độ dung môi ethanol chiết xuất AGIs từ đỗ đen lên men, gồm: 96, 80, 70, 60, 50, 40, 30 và 20% ethanol bằng phương pháp đã được trình bày (mục 2.3.5.2). Hoạt tính kìm hãm α-glucosidase và
IC50 trong dung dịch chiết tương ứng với từng thí nghiệm được xác định được, từ đó xác định được nồng độ ethanol phù hợp chiết xuất AGIs cao từ đỗ đen lên men.
Hình 3.20 cho thấy nồng độ ethanol chiết xuất ảnh hưởng đến khả năng chiết xuất AGIs. Khi chiết xuất AGIs với các nồng độ ethanol khảo sát từ 20, 30, 40 và 50 % ethanol, hoạt tính kìm hãm α-glucosidase của dịch chiết tăng tương ứng là 63,50 ± 0,95; 66,20 ±
1,58; 72,26 ± 3,06 và 84,63 ± 2,17%, hoạt lực kìm hãm α-glucosidase của chất khô hòa tan trong dung môi tăng, có IC50 tương ứng lần lượt là 478,21 ± 8,78; 412,37 ± 13,36; 291,53 ±
19,12 và 235,41 ± 13,26 µg/ml. Trong khi đó, hoạt tính kìm hãm α-glucosidase của dịch chiết ở các nồng độ từ 60, 70, 80 và 96% ethanol cho hoạt tính kìm hãm α-glucosidase của dịch chiết giảm dần tương ứng là 77,07 ± 2,68; 72,53 ± 2,02; 69,50 ± 2,32 và 61,87 ±
2,14%, hoạt lực kìm hãm α-glucosidase của chất khô hòa tan trong dung môi chiết xuất giảm, IC50 tương ứng lần lượt là 274,36 ± 14,78; 362,53 ± 15,36; 401,18 ± 18,72 và 427,32
± 16,21 µg/ml.
Hình 3.20 Ảnh hưởng của nồng độ dung môi ethanol đến hoạt tính kìm hãm α-glucosidase (%) và IC50 của dịch chiết đỗ đen lên men
Kết quả cho thấy nồng độ dung môi ethanol ảnh hưởng tới khả năng chiết xuất AGIs từ đỗ đen lên men, đều này có thể giải thích, ở mỗi nồng độ dung môi nhất định, ngoài khả
năng hòa tan AGIs còn có khả năng hòa tan các tạp chất không có hoạt tính kìm hãm α- glucosidase, làm giảm khả năng hòa tan AGIs vào dung môi.