5. Bố cục luận án
2.3.5.4. Nghiên cứu ảnh hưởng của nhiệt độ đến khả năng chiết xuất AGIs từ đỗ đen lên
chiết xuất AGIs
Mỗi mẫu khảo sát xác định tỷ lệ dung môi ethanol với đỗ đen lên men đến khả năng chiết xuất AGIs có tỷ lệ dung môi 50% ethanol : lượng bột đỗ đen lên men (mục 2.1.3.5) với tỷ lệ 3; 4; 5; 6; 7; 8; 9 và 10 lít / kg. Chiết xuất cùng điều kiện ở nhiệt độ 600C, siêu âm cường độ 8W/cm2 ở tần số 20 kHz / bể siêu âm dung tích 20 lít, chiết xuất 6 phút. Lấy mẫu phân tích ở các thí nghiệm khảo sát với lượng mẫu tương ứng cùng lượng bột đỗ đen lên men là 100 g, mẫu đem lọc thu dịch chiết và xác định hoạt tính kìm hãm α-glucosidase (mục 2.2.2), chỉ khác các mẫu phân tích sau khi cô chân không thu cao khô, đều được hòa tan trong nước cất đạt cùng thể tích (600 ml).
Mỗi mẫu khảo sát xác định tỷ lệ dung môi ethanol với đỗ đen lên men đến khả năng chiết xuất AGIs có tỷ lệ dung môi 50% ethanol : lượng bột đỗ đen lên men (mục 2.1.3.5) với tỷ lệ 3; 4; 5; 6; 7; 8; 9 và 10 lít / kg. Chiết xuất cùng điều kiện ở nhiệt độ 600C, siêu âm cường độ 8W/cm2 ở tần số 20 kHz / bể siêu âm dung tích 20 lít, chiết xuất 6 phút. Lấy mẫu phân tích ở các thí nghiệm khảo sát với lượng mẫu tương ứng cùng lượng bột đỗ đen lên men là 100 g, mẫu đem lọc thu dịch chiết và xác định hoạt tính kìm hãm α-glucosidase (mục 2.2.2), chỉ khác các mẫu phân tích sau khi cô chân không thu cao khô, đều được hòa tan trong nước cất đạt cùng thể tích (600 ml).
Mỗi mẫu 2,857 kg bột đỗ đen lên men (mục 2.1.3.5), được khảo sát xác định chiết xuất ở các nhiệt độ, gồm: 30 ± 2; 50 ± 2; 60 ± 2; 70 ± 2; 80 ± 2 và 90 ± 20C. Chiết xuất cùng điều kiện: Dung môi 50% ethanol : bột đỗ đen lên men là 6 lít / kg, siêu âm cường độ 8W/cm2 ở tần số 20 kHz / bể siêu âm dung tích 20 lít, chiết xuất 6 phút. Dịch chiết thô được xác định hoạt tính kìm hãm α-glucosidase (mục 2.2.2.).
Mỗi mẫu 2,857 kg bột đỗ đen lên men (mục 2.1.3.5), được khảo sát xác định chiết xuất ở các nhiệt độ, gồm: 30 ± 2; 50 ± 2; 60 ± 2; 70 ± 2; 80 ± 2 và 90 ± 20C. Chiết xuất cùng điều kiện: Dung môi 50% ethanol : bột đỗ đen lên men là 6 lít / kg, siêu âm cường độ 8W/cm2 ở tần số 20 kHz / bể siêu âm dung tích 20 lít, chiết xuất 6 phút. Dịch chiết thô được xác định hoạt tính kìm hãm α-glucosidase (mục 2.2.2.).
Mỗi mẫu 2,857 kg bột đỗ đen lên men (mục 2.1.3.5), được khảo sát xác định chiết xuất ở các thời gian và cường độ siêu âm khác nhau: 0 (không siêu âm), 1, 2, 4, 6 và 8 W/cm2, thời gian siêu âm chiết xuất là 2, 4, 6, 8, 10, 12, 14, 16, 18 và 20 phút. Chiết xuất cùng điều kiện: Dung môi 50% ethanol : bột đỗ đen lên men là 6 lít / kg, tần số siêu âm 20kHz, bể siêu âm dung tích 20 lít. Dịch chiết thô được xác định hoạt tính kìm hãm α- glucosidase (%) (mục 2.2.2.2.) và hoạt lực kìm hãm α-glucosidase ( IC50 ) của chất hòa tan trong dịch chiết (mục 2.2.2.4).
2.3.6. Tinh sạch và định lượng AGIs từ đỗ đen lên men
2.3.6.1. Khảo sát dung môi cho tinh sạch sơ bộ AGIs
Mỗi mẫu 2,28 gam chế phẩm AGIs (chiết xuất từ 100 gam đỗ đen lên men bề mặt) hòa tan trong 100 ml nước cất, sau đó kết tủa từng mẫu trong 900 ml: (ethanol, methanol và isopropyl alcohol), để ở nhiệt độ 250C, sau 24 giờ đem ly tâm tách từng phần kết tủa và