I 2+ 2OH 2 + H2O O
2.2.5.3 Định lượng vitami nA
• Caroten tḥc loại sắc tố màu đỏ, vàng trong các mẫu thực phẩm thực vật và động vật, bên cạnh các sắc tố hay vitamin A và được xem là tiền vitamin A. Hiện nay caroten có 2 đồng phân quan trọng là α và β.
• Đờng phân β. Khi phân hủy cho ra 2 phân tử vitamin A, còn đồng phân α chỉ cho 1 phân tử vitamin A. Muốn caroten chuyển thành vitamin A cần có sẵn một lượng vitamin A nhất định.
• Trong dinh dưỡng học 1 vitamin A tương đương 3 lần caroten.
• Các phương pháp xác định caroten chủ yếu dựa vào sắc tố của chúng . Phương pháp đơn giản (Theo Tzirel )
• Nguyên lý
Loại các sắc tố khác của mẫu thử bằng cách hấp thụ bởi Al2O3 , màu sắc của
caroten còn lại được so sánh với một dung dịch mẫu kalibicromat hoặc so sánh với thang màu ch̉n .
• Tiến hành thử
o Cân chính xác mợt lượng thực phẩm tương đương 0,16mg-16,6mg caroten trong 100g mẫu thử. Cắt nhỏ thành từng miếng 2-3mmm. Nếu là thực phẩm khô, nghiền với 8-10g cát sạch,thực phẩm ướt nghiền với 4-5g Na2SO4 khan. Sau đó cho khoảng 4-5g Al2O3 và nghiền đảo kỹ 2 phút.
o Chuyển tất cả vào ống đong 50ml có nút nhám, cho vào 40ml ether dầu hoả lắc 2-3 phút, để yên 5 phút. Vét thành ống đong để tất cả chất đặc có thể lắng xuống đáy và để một thời gian vừa đủ cho dịch chiết ở phía trên trong suốt .
o Lấy 10ml dịch chiết trong so sánh ở sắc kế Dubốt với 1ml dung dịch K2Cr2O7 0,0072% hay thang màu mẫu.
o Xây dựng thang mẫu: cho vào 20 ống nghiệm các dung dịch như sau :
Ống nghiệm
Dung dịch K2Cr2O7 0,0072mg [ml]
Nước cất [ml]
Hàm lượng caroten (mg/100g mẫu) nếu phân tích trên 1g mẫu chiết
với 40ml dung môi
1 10,0 0 16,6
2 9,4 0,6 15,6
3 8,8 1,2 14,6
5 7,6 2,4 12,6 6 7,0 3,0 11,6 7 6,4 3,6 10,6 8 5,8 4,2 9,6 9 5,2 4,8 8,6 10 4,6 5,4 7,6 11 4,0 6,0 6,6 12 3,4 6,6 5,6 13 2,8 7,2 4,6 14 2,2 7,8 3,6 15 1,6 8,4 2,6 16 1,0 9,.0 1,6 17 0,4 9,6 0,66 18 0,2 9,8 0,33 19 0,1 9,9 0,16 20 0 10,0 0
Trường hợp ống thử có màu quá sậm, pha loãng với nước cất và kết quả cuối cùng nhân với hệ số pha loãng
• Tính toán kết quả
1ml dung dịch K2Cr2O7 tương đương 0,00416 mg caroten . Nếu sử dụng sắc kế Dubốt
C1 . H1 = C2 . H2