III. KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN
3.1. Ảnh hưởng của catecholamines lên các yếu tố độc lực của Vibrios in vitro
124 TẠP CHÍ NGHỀ CÁ SƠNG CỬU LONG - 3 - THÁNG 6/2014
3.1.1 Ảnh hưởng của catecholamines lên khả năng di động
Khả năng di đợng là mợt yếu tố quan trọng trong quá trình gây bệnh của Vibrio vì nĩ giúp vi khuẩn nhanh chĩng bám vào bề mặt của sinh vật chủ (Butler và Camilli, 2005; Watnick và ctv., 2001). Sử dụng mơi trường thạch mềm LB, chúng tơi khảo sát ảnh hưởng của catechol-
amine stress hormone lên yếu tố đợc lực này. Kết quả cho thấy, việc bổ sung 100 μM Dopa- mine hoặc Norepinephrine làm tăng mạnh khả năng di đợng của tất cả các chủng Vibro được thử nghiệm với sự khác biệt được ghi nhận chỉ sau 16h. Đặc biệt, ở cùng nồng đợ, Norepineph- rine cĩ tác dụng mạnh hơn khi so sánh với Do- pamine (Bảng 1, 2).
Bảng 1. Đường kính vùng di đợng các chủng vi khuẩn gây bệnh Vibrio (mm) sau 16 giờ với sự bổ sung Dopamine 100 μM.
Vi khuẩn Đối chứng Dopamine 100 µM
BB120 11,7 ± 0,6a 46,0 ± 1,0b
LMG21363 26,0 ± 1,0a 45,0 ± 2,6b
HI610 22,3 ± 1,2a 42,0 ± 1,0b
NB10 29,7 ± 0,6a 51,0 ± 1,0b
Số liệu biểu thị giá trị trung bình của 5 lần lặp lại và đợ lệch chuẩn (SD). Số liệu cĩ kí hiệu chữ cái khác nhau biểu thị sự khác biệt cĩ ý nghĩa (p <0,05).
Bảng 2. Đường kính vùng di đợng các chủng vi khuẩn gây bệnh Vibrio (mm) sau 16 giờ với sự bổ sung Norepinephrine 100 μM.
Vi khuẩn Đối chứng Norepinephrine 100 µM
BB120 12,0 ± 1,0a 55,0 ± 1,0b
LMG21363 27,0 ± 1,2a 69,0 ± 1,0b
HI610 25,0 ± 1,0a 67,0 ± 1,0b
NB10 28,7 ± 1,5a 74,7 ± 0,6b
Số liệu biểu thị giá trị trung bình của 5 lần lặp lại và đợ lệch chuẩn (SD). Số liệu cĩ kí hiệu chữ cái khác nhau biểu thị sự khác biệt cĩ ý nghĩa (p <0,05).
Bảng 3. Tỉ số giữa đường kính vùng trong suốt xung quanh khuẩn lạc do enzyme hemolysin làm dung huyết tế bào máu và đường kính khuẩn lạc cĩ/khơng sự bổ sung của stress hormone. Vi khuẩn
Tỉ số (đường kính vùng bị dung
huyết/đường kính khuẩn lạc) Tỉ số (đường kính vùng bị dung huyết/đường kính khuẩn lạc)
Đối chứng Dopamine Đối chứng Norepinephrine
BB120 1,4 ± 0,1A 1,5 ± 0,1A 1,5 ± 0,2A 1,6 ± 0,1A
LMG21363 1,9 ± 0,2A 1,8 ± 0,1A 2,0 ± 0,3A 2,0 ± 0,1A
HI610 0,0 ± 0,0A 0,0 ± 0,0A 0,0 ± 0,0A 0,0 ± 0,0A
125
TẠP CHÍ NGHỀ CÁ SƠNG CỬU LONG - 3 - THÁNG 6/2014
Số liệu biểu thị giá trị trung bình của 5 lần lặp lại và đợ lệch chuẩn (SD). Số liệu cĩ kí hiệu chữ cái khác nhau biểu thị sự khác biệt cĩ ý nghĩa (p <0,05).
3.1.2. Ảnh hưởng của catecholamines lên khả năng dung huyết, thủy phân casein và thủy phân chitin
Rất nhiều loại enzyme được tiết ra bởi vi khuẩn nhằm mục đích phá hủy các tế bào
của sinh vật chủ, thuận tiện cho quá trình gây bệnh. Các enzyme ngoại bào quan trọng nhất hiện diện ở Vibrio spp. bao gồm: hemolysin,
protease và chitinase (Defoirdt, 2013). Từ kết quả thu nhận được, chúng tơi nhận thấy cả 2 loại catecholamine stress hormone Dopamine và Norepinephrine ở nồng đợ 100 μM đều khơng làm gia tăng hoạt đợng của các enzyme ngoại bào nĩi trên sau 48h (Bảng 3, 4, 5).
Bảng 4. Tỉ số giữa đường kính vùng trong suốt xung quanh khuẩn lạc do enzyme caseinase làm thủy phân casein và đường kính khuẩn lạc cĩ/khơng sự bổ sung của stress hormone. Vi khuẩn
Tỉ số (đường kính vùng bị thủy
phân/đường kính khuẩn lạc) Tỉ số (đường kính vùng bị thủy phân/đường kính khuẩn lạc)
Đối chứng Dopamine Đối chứng Norepinephrine
BB120 1,6 ± 0,1A 1,6 ± 0,0A 2,0 ± 0,1A 1,9 ± 0,1A
LMG21363 1,7 ± 0,0A 1,7 ± 0,0A 1,8 ± 0,0A 1,7 ± 0,1A
HI610 1,7 ± 0,1A 1,7 ± 0,1A 1,7 ± 0,1A 1,6 ± 0,1A
NB10 2,0 ± 0,1A 1,9 ± 0,1A 2,4 ± 0,1A 2,4 ± 0,1A
Số liệu biểu thị giá trị trung bình của 5 lần lặp lại và đợ lệch chuẩn (SD). Số liệu cĩ ký hiệu chữ cái khác nhau biểu thị sự khác biệt cĩ ý nghĩa (p <0,05).
Bảng 5. Tỉ số giữa đường kính vùng trong suốt xung quanh khuẩn lạc do enzyme chitinase làm thủy phân chitin và đường kính khuẩn lạc cĩ/khơng sự bổ sung của stress hormone. Vi khuẩn
Tỉ số (đường kính vùng bị thủy
phân/đường kính khuẩn lạc) Tỉ số (đường kính vùng bị thủy phân/đường kính khuẩn lạc)
Đối chứng Dopamine Đối chứng Norepinephrine
BB120 1,2 ± 0,1A 1,1 ± 0,0A 1,2 ± 0,1A 1,2 ± 0,0A
LMG21363 1,3 ± 0,1A 1,3 ± 0,1A 5,3 ± 0,3A 1,2 ± 0,0A
HI610 1,6 ± 0,0A 1,6 ± 0,1A 1,6 ± 0,1A 1,5 ± 0,1A
NB10 1,6 ± 0,0A 1,6 ± 0,1A 1,5 ± 0,1A 1,7 ± 0,1A
Số liệu biểu thị giá trị trung bình của 5 lần lặp lại và đợ lệch chuẩn (SD). Số liệu cĩ kí hiệu chữ cái khác nhau biểu thị sự khác biệt cĩ ý nghĩa (p <0,05).