- cDNA mới tạo ra này cú những đoạn tự lặp lại với kớch thước khỏc nhau được gọi là đoạn cuối dài tự lặp lại (long terminal repeat), nhờ vậy
1.10.1.Phỏt hiện trực tiếp sự cú mặt của H
b. Lớp vỏ trong (vỏ capsid)
1.10.1.Phỏt hiện trực tiếp sự cú mặt của H
Cỏc phương phỏp phỏt hiện trực tiếp sự cú mặt của HIV cú thể là phỏt hiện bản thõn virus ở dạng hoàn chỉnh, RNA/cDNA virus hoặc phỏt hiện những KN đặc trưng của virus [6].
* Phõn lập virus hoàn chỉnh
Bệnh phẩm cú thể là: mỏu, dịch nóo tuỷ, dịch sinh dục, sữa mẹ, mảnh cắt tổ chức nhưng phổ biến nhất là sử dụng bạch cầu đơn nhõn trong mỏu
ngoại vi.
Sau khi phõn lập, bạch cầu đơn nhõn của người bệnh được nuụi cấy
trong mụi trường nhõn tạo cú thờm những bạch cầu của người lành (cú CD4)
để virus thõm nhiễm, nhõn lờn đạt đủ mật độ để phỏt hiện ra bằng cỏc kỹ thuật
32
Đõy là một kỹ thuật cú giỏ trị nhưng cho kết quả chậm sau khoảng 15
ngày nuụi cấy, trang bị hiện đại tốn kộm nờn chỉ sử dụng trong nghiờn cứu, xỏc định chủng virus được phõn lập, đỏnh giỏ tớnh khỏng lại thuốc chống
Retrovirus của HIV, chẩn đoỏn HIV ở trẻ sơ sinh và ở những bệnh nhõn cú biểu hiện lõm sàng bất thường. Độ nhạy của xột nghiệm chẩn đoỏn HIV ở trẻ sơ sinh khi mới sinh khoảng 43% và khi trẻ trờn 3 thỏng cú thể đạt 90-95%
[18].
* Phỏt hiện virus bằng kớnh hiển vi điện tử kết hợp với phương phỏp miễn dịch
Kỹ thuật:
- Bệnh phẩm cần phỏt hiện virus (KN) được ủ với KT đặc hiệu khỏng HIV (IgG anti-HIV).
- Sau đú, ủ tiếp với KT đơn dũng của chuột chống IgG người cú gắn
vàng Au (ký hiệu là α-IgG-Au).
Kết quả: Nếu phản ứng dương tớnh, ta cú phức hợp KN-IgG-α-IgG-Au và khi quan sỏt dưới kớnh hiển vi điện tử sẽ nhỡn rừ cỏc hạt vàng và nơi HIV khư trỳ.
Giỏ trị: Phỏt hiện được vị trớ khư trỳ của HIV nhưng đũi hỏi trang thiết bị hiện đại đắt tiền.