Phần 3 Vật liệu và phương pháp nghiên cứu
3.5 Phương pháp nghiên cứu
3.5.4 Phương pháp nghiên cứu đặc điểm bệnh học do giun dạ dày gây ra ở lợn
lợn tại ba tỉnh nghiên cứu
3.5.4.1. Phương pháp xác địnhbệnh tích đại thể
Tiến hành mổ khám 20 lợn nhiễm giun dạ dày ở cường độ từ 500-800 trứng/gam phân, bằng phương pháp mổ khám toàn diện đường tiêu hóa của Skrjabin (1928) (Phạm Văn Khuê và Phan Lục, 1996). Quan sát những biến đổi về bệnh tích đại thể ở các cơ quan như: gan, phổi, thực quản, dạ dày, nơi ấu trùng di hành và vị trí ký sinh của giun trưởng thành. Ghi chép các thơng tin về bệnh tích, chụp ảnh và mơ tả.
3.5.4.2. Phương pháp xác định bệnh tích vi thể
Chọn 9 lợn mổ khám để nghiên cứu tổn thương vi thể, là những lợn chỉ bị nhiễm riêng loài giun dạ dày ở cường độ từ 500-800 trứng/gam phân, không bị bệnh Truyền nhiễm và các bệnh khác. Mổ khám những lợn này, thu thập những vùng bệnh tích điển hình (vùng niêm mạc dạ dày tổn thương có giun ký sinh). Cố
định bệnh phẩm bằng dung dịch formon 10%. Tiêu bản vi thể được làm theo quy trình tẩm đúc Parafin, nhuộm tiêu bản bằng Hematoxilin – Eosin (HE) tại Bộ môn Bênh lý, Khoa Thú y, Học viện Nông nghiệp Việt Nam. Mỗi mẫu bệnh phẩm của một lợn được nghiên cứu 4 block. Đọc kết quả dưới kính hiển vi quang học độ phóng đại tối đa 400 lần, chụp ảnh và mô tả.
3.5.4.3. Phương pháp xét nghiệm máu xác định một số chỉ tiêu huyết học của lợn bị nhiễm giun dạ dày
Chúng tôi tiến hành xét nghiệm máu của 18 lợn từ 6 đến 8 tháng tuổi. Thí nghiệm được chia thành 2 lô, lợn ở 2 lô phải đồng đều về giống, tuổi, khối lượng. - Lơ thí nghiệm: chọn 9 lợn chỉ bị nhiễm giun dạ dày qua xét nghiệm phân có cường độ từ 500-800 trứng/gram phân, khơng mắc bệnh Truyền nhiễm và các bệnh khác.
- Lô đối chứng: chọn 9 lợn được xác định không bị nhiễm giun, sán,
không bị mắc bệnh Truyền nhiễm và các bệnh khác.
* Phương pháp lấy máu làm xét nghiệm
Mẫu máu dùng cho xét nghiệm các chỉ tiêu huyết học phải được lấy vào buổi sáng trước khi cho lợn ăn. Cố định lợn bằng phương pháp tròng mõm, lấy 5 ml máu từ tĩnh mạch cổ bằng xy lanh vơ trùng rồi cho vào ống nghiệm có chứa chất chống đơng citrat natri 3,8%, đậy nắp, ghi nhãn, bảo quản lạnh, vận chuyển đến phịng thí nghiệm và mẫu máu được xét nghiệm ngay trong ngày.
* Xác định một số chỉ tiêu huyết học: một số chỉ tiêu huyết học máu lợn
được xác định bằng máy đo huyết học tự động CD - 3700. Các chỉ tiêu theo dõi:
+ Số lượng hồng cầu (RBC, triệu/mm3). + Hàm lượng huyết sắc tố HGB, g%). + Số lượng bạch cầu (WBC, nghìn/mm3). + Công thức bạch cầu (%).