b. Đông lạnh cực nhanh (ultra rapid freezing)
3.3. Trạng thái của nhân tế bào trứng trâu đầm lầy tại các thời gian nuô
vitro khác nhau
Kết quả của nghiên cứu này được thể hiện ở bảng 5. Nguồn gốc chủ yếu của tế bào trứng sử dụng cho thủy tinh hóa là từ buồng trứng lò mổ. Kết quả nghiên cứu của luận án này cho thấy khi nhuộm nhân các tế bào trứng trâu loại A, B ngay sau khi thu từ buồng trứng lò mổ (tương ứng với thời gian nuôi in vitro 0 giờ) để kiểm tra, tất cả các tế bào trứng đều có nhân ở giai đoạn túi mầm (GV) (100%). Điều này là phù hợp với nhận định của Parnpai và cs. (2014), theo họ tế bào trứng được thu từ những nang trứng đều có nhân ở giai đoạn túi mầm (GV).
Theo kết quả thu được trong nghiên cứu này thì tại thời điểm nuôi thành thục 12 giờ và 18 giờ, nhân tế bào trứng trâu chủ yếu tồn tại tương ứng ở kỳ giữa I (95,43%; Hình 3) và kỳ cuối I (64,57%; Hình 4). Đến thời điểm nuôi thành thục 24 giờ: 74,88% tế bào trứng có nhân đạt tới trạng thái thành thục và thể cực thứ nhất đã hình thành xong (Hình 5). Tỷ lệ này là cao hơn so với Barakat và cs. (2012), các tác giả này báo cáo rằng chỉ có 45,7% tế bào trứng có nhân thành
thục ở thời điểm nuôi thành thục 24 giờ. Sự khác nhau này có thể là do môi trường nuôi thành thục, chất lượng tế bào trứng của mỗi nghiên cứu.
Bảng 5: Trạng thái nhân tế bào trứng trâu ở các thời điểm nuôi khác nhau
Thời gian nuôi in vitro Số tế bào trứng nuôi in vitro
Số tế bào trứng trâu ở các giai đoạn phát triển nhân tại các thời điểm nuôi khác nhau (%; M ± S E)
Túi mầm
Tiền kỳ giữa I
Kỳ giữa I Kỳ sau I Kỳ cuối I Thành thục Thoái hóa 0 giờ 221 221 100 ± 0 6 giờ 218 216 1 1 99,08 ± 0,79 12 giờ 219 1 5 209 1 3 95,43 ± 1,13 18 giờ 223 1 6 11 59 144 2 26,46 ± 1,12 64,57 ± 1,41 24 giờ 219 1 6 9 18 17 164 4 8,22 ± 0,48 7,76 ± 0,55 74,88 ± 1,4
Sau 6 giờ nuôi thành thục in vitro tỷ lệ tế bào trứng có nhân ở giai đoạn GV vẫn rất cao (99,08%; Hình 2). Theo Barakat và cs. (2012) sau 8 giờ nuôi thành thục in vitro vẫn còn 52,7% tế bào trứng có nhân ở giai đoạn GV. Điều này
cho thấy đối với tế bào trứng trâu thời gian tồn tại của nhân ở giai đoạn túi mầm là khá dài.
Nhân
Hình 2: Tế bào trứng trâu có nhân ở giai đoạn túi mầm (GV)
Nhân
Nhân Thể cực thứ nhất đang hình thành
Hình 4: Tế bào trứng trâu có nhân ở giai đoạn kỳ cuối I
Nhân Thể cực
Kết quả ở bảng 5 cho thấy tại mỗi thời điểm nuôi thành thục in vitro khác