1.6.1. Yêu cầu chất lượng của tế bào sử dụng sản xuất vắcxin
Tế bào là một trong những nguyên liệu nguồn quan trọng sử dụng trong sản xuất vắcxin và các chế phẩm sinh học, Tiêu chí để lựa chọn dòng tế bào cho sản xuất vắcxin là phải đảm bảo được tính an toàn cho người sử dụng sán phẩm. Tế bào lựa chọn để sản xuất vắcxin phải được kiểm tra, đánh giá về các mặt: nguồn gốc của tế bào; các đặc tính của tế bào; chất lượng của tế bào và hệ thống ngân hàng tế bào giống gốc và giống sản xuất.
Yêu cầu chất lượng của tế bào
- Không nhiễm các yếu tố nhiễm trùng tiềm ẩn bao gồm vi khuẩn, nấm, mycoplasma…
- Không nhiễm virút ngoại lai và các tác nhân nhiễm trùng tiềm ẩn khác. Thử nghiệm về virút hấp phụ hồng cầu để kiểm tra các virút ngoại lai có kháng nguyên hấp phụ hồng cầu. Kiểm tra các virút ngoại lai trên tế bào để phát hiện các virút gây hủy hoại tế bào, các virút gây hấp phụ hồng cầu. Các dòng tế bào thường được chọn để làm thử nghiệm kiểm tra các tác nhân ngoại lai bao gồm:
+ Dòng tế bào cùng loài với tế bào sử dụng cho sản xuất chủng hay vắcxin.
+ Dòng tế bào lưỡng bội của người để phát hiện virút gây bệnh cho khỉ SCMV (simian cytomegalovirus) và một số nhóm virút gây bệnh cho người như virút adeno, virút alpha, virút corona, virút đường ruột (gồm polio, echo và coxsackie B), virút flavi, virút viêm gan A, virút herpes (gồm herpes simplex, varicella zoster, cytomegalo), virút orthomyxo, virút paramyxo, virút dại, virút reo, một số virút rhino và virút rubella.
+ Dòng tế bào thận khỉ phát hiện virút herpes B ở khỉ và các virút gây bệnh cho người gồm: một số chủng của virút adeno, virút alpha, virút arena, virút bunya (gồm phlebo và nairo), các virút đường ruột (gồm polio, echo, coxsackie B), virút filo, virút flavi, virút herpes simplex, virút orthomyxo, virút paramyxo, virút polyoma, virút pox, virút dại, virút cúm, virút reo, virút rhino, virút rota, virút rubella và virút vesiculo.
+ Dòng tế bào thận thỏ phát hiện virút pseudorabies, rabbitpox, myxomatose, vaccinia và EAV ( equine arteritis virus).
- Các đặc tính nuôi cấy, cấy truyền và di truyền phải ổn định qua các đời cấy truyền từ tế bào giống gốc đến tế bào sản xuất ở giai đoạn cuối.
- Dòng tế bào phải nhạy cảm với chủng virút dùng để sản xuất vắcxin [17].
Hệ thống ngân hàng tế bào giống gốc và giống sản xuất
Thông thường, hệ thống ngân hàng tế bào được thiết kế 2 tầng bao gồm ngân hàng tế bào gốc (Master cell bank - MCB) và ngân hàng tế bào sản xuất (Working cell bank - WCB). Đôi khi, ngân hàng tế bào có 3 tầng bao gồm cả tế bào giống cha mẹ (Parent cell bank) chứa các typ tế bào nguồn gốc.
WCB có thể được nhân giống từ một hay một vài ống MCB bằng cách cấy truyền một vài lần liên tiếp. Các tế bào này được hộn lại sau đó chia vào các ống để tạo WCB đồng nhất. Một hoặc một vài ống WCB được sử dụng để nhân giống tạo tế bào sản xuất vắcxin. Nếu sử dụng nhiều ống WCB để nhân giống làm tế bào sản xuất vắcxin thì hỗn dịch tế bào từ các ống tế bào phải được đông tan cùng một lúc, sau đó hộn lại rồi mới nuôi cấy và cấy truyền các đời tiếp theo để đảm bảo tế bào sản xuất vắcxin luôn đồng nhất.