Kết quả
- Ghi chép kết quả quan sát được.
Tiêu chuẩn chấp thuận: Sau khi lắc, vắcxin có màu trắng hơi đục. Để lắng sau 1 giờ, vắcxin phải tách làm hai lớp, trong đó lớp nhôm phải tủa bông mịn, không vón cục.
CHƯƠNG 3
KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU
3.1. XÂY DỰNG HỆ THỐNG CHỦNG GIỐNG EV71 CHO SẢN XUẤT VẮCXIN VẮCXIN
Chủng virút đường ruột typ 71 (EV71) sử dụng trong sản xuất vắcxin phòng bệnh tay chân miệng EV71, được xác định hồ sơ lí lịch chủng bao gồm nguồn gốc của chủng và các thử nghiệm đã được tiến hành để xác định các đặc tính của chủng.
Chủng EV71 được sử dụng trong sản xuất vắcxin phòng bệnh tay chân miệng EV71 được sản xuất và bảo quản trên cùng một quy trình ổn định. Hệ thống chủng giống bao gồm lô chủng EV71 giống gốc (Master seed lot) và lô chủng EV71 giống sản xuất (Working seed lot). Chủng giống gốc được sử dụng là nguồn nguyên liệu đầu để sản xuất chủng giống sản xuất. Loạt chủng giống sản xuất được thiết lập là nguồn nguyên liệu cơ bản sử dụng để sản xuất mỗi loạt vắcxin, các loạt chủng giống sản xuất phải có chung đặc tính với các loạt chủng giống sản xuất.
Trong nghiên cứu xây dựng hệ chủng giống sử dụng cho nghiên cứu sản xuất vắcxin phòng bệnh tay chân miệng EV71, VABIOTECH sử dụng chủng EV71 phân lập từ bệnh nhi mắc tay chân miệng được sàng lọc từ 30 chủng EV71 lưu hành tại Việt Nam. Với các ưu điểm là chủng có hiệu giá cao, có tính gây đáp ứng miễn dịch cao và có khả năng bảo vệ chéo rộng với các chủng EV71 thuộc các phân nhóm gen khác.
3.1.1. Nguồn gốc chủng EV71
Chủng EV71 được phân lập từ mẫu phân của bệnh nhi mắc tay chân miệng tại Ninh Bình, Việt Nam. Chủng được phân lập và cấy truyền tại phòng thí nghiệm Virút đường ruột, Viện Vệ sinh dịch tễ Trung ương (VVSDT). Mã số được đánh theo quy định lưu giữ chủng của phòng thí nghiệm Virút đường ruột VVSDT (Chủng này sau đây được gọi là chủng 0822). Chủng được chuyển cho nhóm nghiên cứu của VABIOTECH theo bản thỏa thuận chuyển giao vật liệu nghiên cứu (Phần phụ lục). Đặc điểm của chủng 0822 được trình bày trong bảng 3.1.
Bảng 3.1: Đặc điểm chủng 0822 phân lập từ bệnh nhân Việt Nam sử dụng trong nghiên cứu sản xuất vắcxin phòng bệnh tay chân miệng EV71
Tên chủng Chủng 0822
Tuổi Bệnh nhi 24 tháng
Chẩn đoán bệnh Tay chân miệng
Mã số 200822
Thời gian phân lập và cấy truyền 26/5/2008 đến 13/6/2008
Số lần cấy truyền 03 lần
Tế bào cấy truyền RD
Môi trường giữ chủng Môi trường MEM 2% FBS
Bảo quản - 800C tại Phòng Thí nghiệm virút đường
3.1.2. Tế bào sử dụng sản xuất hệ chủng giống EV71
- Tế bào giống gốc của TCYTTG CCL 81 đời 134 đã được kiểm tra đầy đủ các thử nghiệm đối với dòng tế bào thường trực. Tế bào Vero được