- Hấp phụ ở nhiệt độ 36,5°C±0,5°C trong 1 giờ
2.2.3.1. Phương pháp kiểm tra an toàn chung: Áp dụng để kiểm tra an toàn chung cho vắcxin EV71 trên nuôi cấy tế bào Vero.
Dụng cụ và trang thiết bị:
- Máy trộn (Stuard) - Tuýp nhựa 50ml (Falcon)
- Hộp đựng đá (Việt nam) - Bơm kim tiêm 1ml, 5ml (Vinahankook)
Vật liệu và hóa chất:
- Vắcxin: 40 lọ
- Chuột Swiss trưởng thành 17-22 gam; 5 con/ mẫu thử - Chuột lang trưởng thành 250-350 gam; 2 con/ mẫu thử
Tiến hành
Chuẩn bị chuột trước khi tiêm:Chuột phải được theo dõi cách ly 2 ngày (đối với chuột nhắt) và 3 ngày (đối với chuột lang). Theo dõi hàng ngày về tình trạng sức khoẻ, trọng lượng và ghi vào sổ theo dõi.
Tiêm chuột
- Chuột lang: Đường tiêm phúc mạc; liều tiêm 5 ml văcxin/con; - Chuột Swiss: Đường tiêm phúc mạc; liều tiêm 0,5 ml văcxin/con
Theo dõi chuột: Thời gian theo dõi 7 ngày; hàng ngày theo dõi tình trạng sức khỏe và cân trọng lượng của từng chuột.
Kết quả
- Tính % trọng lượng tăng của từng chuột % tăng trọng = ( P7 / PO ) x 100% Trong đó: P7: trọng lượng ngày thứ 7. PO: trọng lượng ngày tiêm.
- Tính % trọng lượng tăng trung bình của từng nhóm chuột.
Tiêu chuẩn chấp thuận:
- Không có chuột nào bị chết trong thời gian theo dõi.
- 100% sống khỏe mạnh, tăng cân và không có dấu hiệu bệnh lý.
- Điều kiện phải nhắc lại: thử nghiệm được nhắc lại khi không đạt tiêu chuẩn chấp thuận
- Thử nghiệm nhắc lại lần 1: với số lượng mẫu và chuột như lần thử nghiệm thứ nhất. Tiêu chuẩn chấp thuận (mụcTiêu chuẩn chấp thuận).
- Thử nghiệm nhắc lại lần 2: nếu thử nghiệm nhắc lại lần 1 không đạt yêu cầu, tiến hành thử nghiệm nhắc lại lần 2 với số lượng chuột và mẫu gấp đôi lần thử nghiệm thứ nhất. Tiêu chuẩn chấp thuận (mụcTiêu chuẩn chấp thuận).
- Nếu thử nghiệm nhắc lại lần 2 không đạt tiêu chuẩn chấp thuận, loạt vắcxin đó bị huỷ bỏ vì không đạt yêu cầu về tiêu chuẩn an toàn chung.