- Tính ổn định di truyền Nhận dạng
3.2.1.1. Môi trường nuôi cấy tế bào.
Môi trường nuôi cấy tế bào Vero sử dụng môi trường MEM có bổ sung huyết thanh động vật. Huyết thanh được sử dụng là huyết thanh bào thai bê (FBS). Các huyết thanh này đạt yêu cầu chất lượng sử dụng trong các chế phẩm sinh học cho người [49]
- Tế bào Vero kín đẹp 1 lớp - Tách tế bào và đếm tế bào
- Pha MEM với các nồng độ FBS 5%, 10% - Nuôi tế bào với số lượng ban đầu 1x104
tế bào/cm2 trong môi trường MEM có tỉ lệ huyết thanh tương ứng trên.
- Quan sát tế bào trên kính hiển vi đảo pha vào thời điểm 1, 2, 3, 4 ngày sau nuôi cấy và theo dõi sự phát triển của tế bào.
Bảng 3.15. Kết quả nuôi cấy tế bào Vero trong môi trường MEM với các nồng độ huyết thanh bào thai bê (FBS)
Thời gian nuôi cấy
tế bào
Chỉ số Môi trường nuôi cấy
MEM 5% FBS MEM 10% FBS 1 ngày Số lượng tế bào/cm2 1,3024 x 104 1,488 x 104 Hình ảnh tế bào 2 ngày Số lượng tế bào/cm2 3,12 x 104 3,245 x 104 Hình ảnh tế bào 3 ngày Số lượng tế bào/cm2 5,2 x 104 5,58 x 104 Hình ảnh tế bào 4 ngày Số lượng tế bào/cm2 10,86 x 104 10,68 x 104 Hình ảnh tế bào
Kết quả bảng 3.15 cho thấy tế bào Vero phát triển tốt ở cả hai nồng độ FBS, từ ngày thứ hai sau nuôi cấy tế bào nằm trong pha lũy thừa (hình 3.7), ngày thứ 4 hình ảnh tế bào kín đẹp một lớp và số lượng đạt khoảng 105 tế bào/cm2.
Hình 3.7. Đồ thị tăng trưởng của tế bào nuôi cấy trong môi trường MEM 5% FBS và MEM 10% FBS
Nuôi cấy tế bào Vero sử dụng môi trường MEM 5% FBS cho kết quả tương đương như nuôi tế bào với môi trường MEM 10% FBS, như vậy lựa chọn môi trường nuôi cấy tế bào MEM 5% FBS nhằm tiết kiệm chi phí nhưng vẫn đảm bảo chất lượng tế bào.