Các loài cây thân thảo khi bảo tồn bằng đông lạnh có những kỹ thuật khá đặc thù như tạo dung dịch huyền phù của tế bào, tạo callus, hoặc thu thập vật liệu bảo tồn là mô phân sinh hay hạt phấn để đưa vào bảo tồn lạnh sâu.
Những loại này thường bảo tồn bằng phương pháp lạnh chậm truyền thống, để bảo tồn đa dạng di truyền những mô không tổ chức, không dài hạn, bảo tồn những đặc điểm đặc thù của các mô này có thể bị mất đi trong quá trình duy trì In vitro thông thường. Các nghiên cứu lặp lại cho rằng tiềm năng phát triển hình thái của các dòng callus không ảnh hưởng do bảo quản lạnh trong ni tơ lỏng. Hơn nữa, nghiên cứu chứng minh rằng không ảnh hưởng đến biểu hiện của gen ngoại lai trong chuyển gen vào tế bào, tạo các tế bào trần ở lúa, tái sinh tế bào ổn định của các cây chuyển gen
- Đông lạnh hạt phấn
Hạt phấn bảo quản hỗ trợ cho các chương trình tạo giống, phân phối và trao đổi nguồn gen cũng như các nghiên cứu sinh lý, sinh hóa và di truyền. Phương pháp này vẫn còn ứng dụng rất hạn chế ở một số trung tâm bảo tồn
- Bảo tồn đông lạnh mô phân sinh
Mô phân sinh đỉnh là phổ biến nhất trong bảo tồn đông lạnh với những loài cây sinh sản sinh dưỡng như cây ăn quả, cây lấy rễ và cây lấy củ. Trong bảo tồn mô đỉnh sinh trưởng cũng có một số lượng biến dị xô ma, nhưng nhỏ hơn so với mô không tổ chức như callus hoặc dung dịch tế bào huyền phù. Những báo cáo gần đây nhất đánh giá phương pháp này ngang bằng với phương pháp hạt nhân tạo/khử nước và đông lạnh kính. Những nghiên cứu gần đây cho là đánh giá quá khắt khe phương pháp khử nước và đông lạnh, phương pháp lạnh chậm truyền thống là hiệu quả để duy trì độ đúng nguyên bản của mỗi tế bào, nhưng kém hiệu quả duy trì nguyên bản của mô cần thiết cho sự sống sót của mô phân sinh.
+ Một số chất sử dụng trong bảo tồn đông lạnh
Dimethyl Sulfoxide (DMSO)
Dimethyl Sulfone (DMSO2)
.
Hydroxy-ethyl-starch (HES)
Polyvinyl Pyrrolidone (PVP)
Propylene Glycol
Ethylene Glycol
Glycerol - Bảo tồn đông lạnh hạt cây thân thảo
Hạt là vật liệu bảo tồn phổ biến với cây trồng nông nghiệp và cây làm vườn, vì hạt của những loài này có thể chịu đựng trong quá trình làm khô và ngâm trong ni tơ lỏng( Stanwood,1985). Bảo tồn đông lạnh hạt khô có thể thay thế phương pháp bảo tồn hạt khô truyền thống ở nhiệt độ -20oC. Đặc biệt một số loài hạt khô bảo tồn truyền thống chỉ được vài năm sử dụng kỹ thuật này có thể kéo dài hơn tuổi thọ hạt. Hầu hết các loài hạt làm khô đến độ ẩm 5 -10% là phù hợp cho bảo tồn ở nhiệt độ cực thấp. ví dụ hạt cần tây là loại hạt khô có thể bảo tồn bằng đông lạnh.