- Vẽ đồ thị đƣờng hồi quy của phƣơng trình hồi quy theo phần mềm Microsoft Excel.
CHƢƠNG 3– KẾT QUẢ VÀ BÀN LUẬN
3.4.2. Kết quả khảo sát nhiệt độ nuôi cấy
Dựa trên cơ sở kết quả nghiên cứu nuôi cấy vi khuẩn Thƣơng hàn S. Typhi Ty2 ở nồi lên men 75 lít, nhiệt độ nhân giống là 37oC và nhiệt độ nuôi cấy ở nồi lên men là 32oC [10,12]. Ở nồi lên men 300 lít, khảo sát nhiệt độ nuôi cấy ở 32oC và
78
37oC. Ở mỗi nhiệt độ, quá trình nhân giống và lên men đều đƣợc thực hiện ở cùng nhiệt độ hoặc 32o
C hoặc 37oC.
Ở nhiệt độ 32oC thì giá trị OD trung bình đạt 14,63 ± 1,17 tƣơng ứng hàm lƣợng Vi PS thu đƣợc là 8,37 ± 0,75 mg/l, còn nuôi cấy ở nhiệt độ 37oC, giá trị OD trung bình đạt 19,98 ± 1,00 và hàm lƣợng Vi PS tƣơng ứng thu đƣợc là 12,97 ± 1,31. Sự khác biệt khi nuôi cấy ở 2 nhiệt độ khác nhau là có ý nghĩa thống kê (t = 3,29) với khoảng tin cậy 99,9% (P = 0,01) (Bảng 3.13).
Bảng 3.13. Kết quả khảo sát nhiệt độ nuôi cấy
Nhiệt độ
(oC) Loạt
OD560nm Hàm lƣợng Vi PS (mg/l)
Các loạt Trung bình Các loạt Trung bình
32 1 15,7 14,63 ± 1,17 8,62 8,37 ± 0,75 t = 3,29 2 14,9 9,01 3 13,4 7,56 37 1 19,0 19,98 ± 1,00 14,25 12,97 ± 1,31 2 21,0 13,17 3 20,0 12,64
Trong khi đó, độ hòa tan của oxy có mối liên quan với nhiệt độ nuôi cấy, khi nhiệt độ tăng thì độ hòa tan của oxy giảm. Khi tốc độ hòa tan của oxy giảm thì tốc độ sinh trƣởng của vi sinh vật cũng chậm lại và sinh khối của vi sinh vật hiếu khí trong môi trƣờng lỏng ở nhiệt độ thấp cao hơn sinh khối tạo ra ở nhiệt độ cao [9,21,23].
Kết quả nuôi cấy vi khuẩn Thƣơng hàn S. Typhi Ty2 của NIH (Mỹ) ở nhiệt độ 32oC có hàm lƣợng Vi PS thu đƣợc là 7,34 mg/l [ 42]. Tƣơng tự hàm lƣợng Vi PS thu đƣợc khi nuôi cấy ở nồi lên men 300 lít tại nhiệt độ 32oC là 8,37 ± 0,75 mg/l và đều thấp hơn hàm lƣợng Vi PS khi nuôi cấy ở nhiệt độ 37oC là 12,97 ± 1,31 mg/l.
79
khuẩn sinh polysaccharide đối với ảnh hƣởng của nhiệt độ là rất khác nhau và đôi khi không theo quy luật thông thƣờng. Có loại vi khuẩn thì oxy có thể ảnh hƣởng âm tính đối với việc sản sinh PS và ngƣợc lại có loại vi khuẩn việc cung cấp oxy làm tăng khả năng sản sinh PS. Mặc dù ở nhiệt độ thấp, độ hòa tan của oxy cao hơn ở nhiệt độ cao, nhƣng đối với vi khuẩn Thƣơng hàn nhiệt độ 37oC là nhiệt độ thích hợp cho sinh trƣởng và phát triển. Đặc điểm này cũng phù hợp với nhiệt độ nuôi cấy vi khuẩn S. Typhi Ty2 trong quy trình sản xuất vắc xin Thƣơng hàn Vi PS của Sanofi Aventis – Pháp [74]. Hơn nữa, nhiệt độ nuôi cấy vi khuẩn Thƣơng hàn S. TyphiTy2 ở giai đoạn nhân chủng và ở giai đoạn trong nồi lên men 300 lít đều là 37oC nên vi khuẩn không mất thời gian để làm quen với nhiệt độ và thời gian pha lag không bị kéo dài và tạo điều kiện thuận lợi cho quá trình lên men.
Nhƣ vậy, nhiệt độ 37o
C đƣợc chọn để nuôi cấy vi khuẩn S. Typhi Ty2 trong nồi lên men 300 lít.