- Kết quả đạt: Không có vi khuẩn Thƣơng hàn mọc.
c. Kiểm tra an toàn
- Kiểm tra an toàn vắc xin Thƣơng hàn Vi PS (Phụ lục 10).
2.2.5.3. Phƣơng pháp thu và tinh sạch kháng nguyên Vi PS [8,94]
a. Phƣơng pháp tách lọc canh khuẩn Thƣơng hàn (Hình 2.2 và 2.4)
* Nguyên tắc:
Thu kháng nguyên Vi PS thô trong canh khuẩn bằng cách tách pha rắn (xác tế bào) ra khỏi pha lỏng (nƣớc nổi có chứa kháng nguyên Vi PS).
53
*Tiến hành
Dùng hệ thống lọc tiếp tuyến (TFF) với màng lọc 0,45 m để tách xác tế bào ra khỏi canh khuẩn và thu nƣớc nổi có kháng nguyên Vi PS thô. Dòng canh khuẩn chảy qua các rãnh nhỏ của màng lọc nhờ lực tiếp tuyến tác dụng dọc theo bề mặt màng lọc. Áp suất lọc tác dụng lên bề mặt của màng và giảm dần theo chiều dài của màng lọc. Nƣớc nổi chứa kháng nguyên Vi PS thô có kích thƣớc nhỏ hơn lỗ màng lọc thì qua màng ra thùng chứa. Xác tế bào vi khuẩn Thƣơng hàn có kích thƣớc lớn hơn kích thuớc lỗ màng lọc nên sẽ trƣợt trên màng lọc và đi vào thùng chứa ban đầu rồi tiếp tục đƣợc bơm hồi lƣu trở lại màng lọc. Sự quay vòng đƣợc ngƣng lại khi dịch có xác tế bào vi khuẩn Thƣơng hàn đặc dần và đƣợc loại bỏ.
b. Thu kháng nguyên Vi PS thô (Hình 2.3 và 2.4)
* Nguyên tắc
Nƣớc nổi có kháng nguyên Vi PS thô đƣợc tủa với Cetavlon 0,4% theo cơ chế: Kháng nguyên Vi PS mang điện tích âm tại C6 (COO-) tủa với Cetavlon mang điện tích dƣơng qua liên kết ion (Hình 2.2):
Kháng nguyên Vi Cetavlon Tủa Vi thô - Cetavlon
Hình 2.3. Sơ đồ phản ứng tủa giữa Cetavlon và kháng nguyên Vi PS thô
* Tiến hành