- Khảo sát mối quan hệ giữa giá trị OD và thời gian nuôi cấy bằng xử lý hồi quy thực nghiệm
i. Thuốc nhuộm Gram
* Thuốc nhuộm tím Gentian
C2H5OH 95% 10 ml C6H5OH 5 g Nƣớc cất 100 ml
*Thuốc nhuộm Fucshin kiềm
C2H5OH 95% 10 ml C20H20ClN3 0,3 g C6H5OH 5 g Nƣớc cất 95 ml * Dung dịch Lugol I2 1 g KI 2 g Nƣớc cất vừa đủ 200 ml
9.2. Kiểm tra chủng giống
9.2.1. Kiểm tra đặc tính nuôi cấy và đặc điểm hình thái 9.2.1.1. Kiểm tra đặc tính nuôi cấy: 9.2.1.1. Kiểm tra đặc tính nuôi cấy:
- Mở ống chủng S. Typhi Ty2 đông khô, dùng pipette Pasteur hút 0,5 ml canh thang TSB cho vào ống chủng đông khô, hòa tan đều. Sau đó, hút huyền dịch cấy vào canh thang TSB, lắc đều. Dùng pipette Pasteur nhúng nhẹ vào huyền dịch vi khuẩn, cấy rời vào 1 đĩa thạch TSB và 2 đĩa thạch TSB – kháng huyết thanh Vi. Ủ ở nhiệt độ 37o
C trong 24 giờ.
- Trích khuẩn lạc có halo cấy vào ống canh thang TSB, ủ ở nhiệt độ 37oC. Quan sát nuôi cấy vi khuẩn trong môi trƣờng canh thang TSB sau 6, 12, 24 giờ.
9.2.1.2 Kiểm tra hình thái khuẩn lạc:
Khuẩn lạc điển hình: Tròn, bờ đều, nhẵn bóng, lồi, trắng đục, đồng đều. Đo đƣờng kính khuẩn lạc.
9.2.1.3 Kiểm tra halo:
Lấy đĩa thạch để ra nhiệt độ phòng khoảng 30 phút. Kiểm tra halo bằng cách để đĩa thạch ngang tầm mắt theo hƣớng ánh sáng chiếu ngƣợc với mắt và thấy quầng sáng bao quanh khuẩn lạc nhƣ hình vành khăn. Đo đƣờng kính halo.
9.2.1.4. Kiểm tra tính di động
Cấy chủng vi khuẩn sâu vào giữa môi trƣờng thạch mềm, ủ 37oC trong khoảng 18 – 24 giờ.
Kết quả: Dƣơng tính: Vi khuẩn phát triển và di động lan từ đƣờng cấy lan ra môi trƣờng và làm đục môi trƣờng.
Âm tính : Vi khuẩn không di động và phát triển quanh đƣờng cấy, môi trƣờng không bị đục.
9.2.1.5. Kiểm tra hình thái vi khuẩn (nhuộm Gram)
Làm tiêu bản, nhuộm Gram, soi kính kiển vi kiểm tra hình thái vi khuẩn.