máu đối với trẻ em.
Mỗi đối tƣợng đƣợc lấy máu 3 lần: Trƣớc khi tiêm vắc xin, sau 6 tuần và 6 tháng tiêm vắc xin.
Mẫu máu đƣợc thu thập vào ống nghiệm thủy tinh = 14 mm, ly tâm 300 vòng/phút, tách huyết thanh trong điều kiện vô trùng. Bất hoạt huyết thanh ở 56oC/30 phút. Bảo quản huyết thanh ở - 20oC cho đến khi tiến hành thí nghiệm. - Định lƣợng kháng thể Vi bằng phƣơng pháp ELISA [Phụ lục 10].
* Đánh giá phản ứng phụ
- Các phản ứng phụ của vắc xin đƣợc theo dõi trong vòng 3 giờ đầu sau khi tiêm, sau 6 giờ, 24 giờ và 48 giờ tiêm vắc xin.
47 + Quầng đỏ chỗ tiêm: 2,5 cm + Sƣng tại chỗ tiêm: 2 cm. + Sốt 40o
C trong vòng 48 giờ
- Vắc xin đƣợc coi là có phản ứng phụ trung bình có biểu hiện sau khi tiêm nhƣ sau: + Quầng đỏ chỗ tiêm: 1 – 2,5 cm
+ Sƣng tại chỗ tiêm: 1 – 2 cm
+ Sốt 38,5 – 39oC trong vòng 48 giờ
2.2.4.2. Đánh giá kết quả
- Tính an toàn: Vắc xin đƣợc coi là an toàn khi không có quá 5% đối tƣợng có phản ứng phụ mạnh, không có quá 15% đối tƣợng có phản ứng phụ trung bình.
- Khả năng sinh miễn dịch: Đối tƣợng đƣợc xem là có đáp ứng kháng thể Vi khi có nồng độ kháng thể lớn hơn kháng thể nền 4 lần (theo đơn vị ELISA).
- So sánh tính an toàn và khả năng sinh miễn dịch của vắc xin Thƣơng hàn Vi PS (DAVAC – Việt Nam) với vắc xin Thƣơng hàn Vi PS (Sanofi Aventis – Pháp).
2.2.5. Phƣơng pháp xây dựng quy trình sản xuất vắc xin ở quy mô nồi lên men 300 lít 300 lít
2.2.5.1. Khảo sát các thông số nuôi cấy vi khuẩn Thƣơng hàn S. Typhi Ty2 ở nồi lên men 300 lít nồi lên men 300 lít
Dựa vào kết quả nghiên cứu nuôi cấy vi khuẩn Thƣơng hàn S. Typhi Ty2 ở nồi lên men 75 lít thiết lập các điều kiện nuôi cấy phù hợp cho quá trình lên men ở quy mô nồi lên men 300 lít.
* Nhân giống [94]