- Khảo sát mối quan hệ giữa giá trị OD và thời gian nuôi cấy bằng xử lý hồi quy thực nghiệm
CHƢƠNG 4 KẾT LUẬN VÀ ĐỀ NGHỊ
107
4.1. Kết luận
1. Xác định đƣợc những thông số thích hợp cho nuôi cấy vi khuẩn Thƣơng hàn S.
Typhi Ty2 trong nồi lên men 300 lít nhằm thu kháng nguyên Vi PS:
160 lít môi trƣờng với 3 thành phần cơ bản là Tryptic Soy Broth, glucose và MgSO4.7H2O; Nhiệt độ nuôi cấy 37oC; Tỷ lệ giống 4 – 5%; Tốc độ khuấy: 300 – 500 vòng/phút; Áp lực bề mặt: 0,1 – 0,2 bar; Tốc độ sục khí 0,55 – 0,90 lít/lít/phút; Oxy hòa tan 20%; Thời gian nuôi cấy: 6 – 6,5 giờ.
2. Xác định đƣợc các thông số bất hoạt thích hợp cho vi khuẩn Thƣơng hàn
S. TyphiTy2 là 0,9 – 1% formalin 37% trong 9 – 10 giờ ở nhiệt độ 25 – 26 oC. 3. Sản xuất vắc xin Thƣơng hàn Vi PS ở quy mô nồi lên men 300 lít theo thông số kỹ thuật đã chọn và xây dựng đƣợc quy trình sản xuất vắc xin Thƣơng hàn Vi PS trên quy mô nồi lên men 300 lít:
- OD/đậm độ vi khuẩn lúc gặt: 20,63 ± 1,42/85,117 ± 5,846 (109 tế bào/ml).
- Hàm lƣợng Vi PS thô đạt: 2,43 ± 0,19 (g/lít) và hàm lƣợng kháng nguyên Vi PS đạt: 14,39 ± 1,92 (mg/lít).
- Chất lƣợng kháng nguyên Vi PS: Hàm lƣợng O-acetyl 2,44 ± 0,33 (mmol/g), kích thƣớc Vi PS 73,56 ± 5,38%, hàm lƣợng protein 3,30 ± 1,99 (mg/g), hàm lƣợngacid nucleic 17,00 ± 2,03 (mg/g)
- Sản lƣợng vắc xin Thƣơng hàn Vi PS 70.997 liều vắc xin/mẻ. - Chất lƣợng vắc xin Thƣơng hàn Vi PS:
Hàm lƣợng O-acetyl 0,078 0,006 (mol/liều), Hàm lƣợng Vi PS 29,76 2,25 (g/liều); Hàm lƣợng phenol 0,936 0,056 (mg/liều), pH = 6,93 0,06; Kiểm tra vật lý, vô trùng, an toàn và nhận dạng đều đạt theo tiêu chuẩn của Dƣợc điển châu Âu và quy định của Tổ chức Y tế thế giới.
4.2. Đề nghị
1. Tiếp tục theo dõi tính ổn định của vắc xin Thƣơng hàn Vi PS.
2. Tối ƣu hóa các điều kiện nuôi cấy vi khuẩn Thƣơng hàn ở nồi lên men 300 lít để nâng cao hiệu quả sản xuất.
108
3. Nghiên cứu sản xuất kháng nguyên mẫu chuẩn địa phƣơng phục vụ cho kiểm định vắc xin Thƣơng hàn Vi PS.
NHỮNG ĐIỂM MỚI CỦA LUẬN ÁN