Năm 1954, Maurice Landy và cộng sự nghiên cứu điều chế kháng nguyên Vi PS từ C. freundii 5396/38 trên môi trƣờng đặc và bất hoạt bằng acetone. Phần nƣớc nổi đƣợc tách phân đoạn bằng ethanol, hòa tan trong acid acetic 0,1 M và tủa. Sản
30
phẩm đƣợc hồi lƣu 24 giờ trong acid acetic 1 M ở 100oC để loại protein, acid nucleic và LPS. Sau khi đông khô, kiểm tra kích thƣớc phân tử bằng Gel Cepharose CL - 4B, cấu trúc phân tử đƣợc phân tích bằng cộng hƣởng từ hạt nhân, đồng vị carbon-13 (13C-NMR). Phƣơng pháp này làm kháng nguyên Vi PS bị biến tính trong quá trình tách chiết và tinh sạch. Mặc dù kháng nguyên Vi PS bền khi xử lý đối với acid hơn kiềm nhƣng sự xử lý quá mạnh đã làm biến đổi về hóa học của phân tử kháng nguyên Vi PS do nó bị mất nhóm O-acetyl, kích thƣớc phân tử bị giảm và giảm một nửa nhóm N-acetyl. Do vậy, khi vắc xin đƣợc sử dụng ở dạng tiêm trên ngƣời tình nguyện thì khả năng sinh miễn dịch bị giảm và không tạo đƣợc miễn dịch bảo vệ [49,50].
Năm 1954, theo Landy và cộng sự thì đáp ứng kháng thể liên quan đến liều kháng nguyên Vi PS, với 40 g kháng nguyên Vi PS thì tạo mức kháng thể tối đa sau 3 tuần gây miễn dịch, ở mức 4 g hoặc cao 4000 g cho đáp ứng tạo mức kháng thể thấp hơn. Khi tiêm vắc xin nhắc lại không tạo đáp ứng nhắc lại, mức đáp ứng kháng thể tối đa chỉ đối với 1 liều. Cá thể nhận vắc xin tế bào (hầu hết kháng thể Vi tồn tại trƣớc đó) có đáp ứng kháng thể Vi tƣơng tự nhƣ những ngƣời trƣớc đó không tiêm vắc xin Thƣơng hàn. Điều này cho thấy có mức kháng thể tối đa đƣợc tạo ra bởi kháng nguyên Vi PS bất chấp tình trạng miễn dịch của vật chủ. Kháng thể tạo ra kéo dài và mức kháng thể Vi sau khi tiêm vắc xin Thƣơng hàn Vi PS cao hơn kháng thể Vi tạo ra bởi vắc xin tế bào [78].