... cứu xây dựng quy trình < /b> phát < /b> gen < /b> độc < /b> tố < /b> Bcereus thực phẩm kỹthuậtmultiplexPCR MỤC TIÊU NGHIÊN CỨU Nghiên cứu xây dựng quy trình < /b> phát < /b> gen < /b> độc < /b> tố < /b> Bcereuskỹthuật Multiplex- PCR quy mô phòng ... B. cereus : B. cereus gây b nh sinh độc < /b> tố,< /b> B. cereus gây ngộ độc < /b> thức ăn sinh loại độc < /b> tố < /b> bao gồm [18].: 10 • Độctố < /b> ly giải hồng cầu (Hbl), có khoảng 60% số chủng B. cereus xem yếu tố < /b> gây độc < /b> B. cereus ... khuẩn/ml gen < /b> độc < /b> tố < /b> vi khuẩn B. cereus tách chiết trực tiếp từ thực phẩm phát < /b> kỹthuật Multiplex- PCR 40 3.2 KẾT QỦA ỨNG DỤNG KỸTHUẬTMULTIPLEXPCR ĐỂ PHÁTHIỆN TRỰC TIẾP GEN < /b> ĐỘCTỐBCEREUS TRÊN...
... Emb vi khu n lao g m gene s p x p theo tr t t embC– embA– embB mã hóa cho enzyme arabinosyl transferases tương đương Nh ng nghiên c u g n ch r ng đ t bi n gen < /b> emb, đ c bi t t i codon 306 (embB306) ... Bgen < /b> c a vi khu n lao có ch a t i 90,8 % trình < /b> t mã hóa protein ch có gen < /b> gi [20] Gen < /b> IS6110 phân b r i rác nhi u nơi bgen < /b> ðây đo n gen < /b> có tính b o t n cao Các phương pháp PCR, real-time PCR ... amynoglycozid, đ t bi n rpsL ho c c gen < /b> Vi khu n kháng pyrazinamid đ t bi n gen < /b> rrS, gen < /b> pncA Hình 2.4: ð t bi n vùng 81 bp codon 507-533 gen < /b> rpoB “Ngu n: http://www.cdc.gov” Hơn 90% đ t bi n vùng 81 bp codon...
... Emb vi khu n lao g m gene s p x p theo tr t t embC– embA– embB mã hóa cho enzyme arabinosyl transferases tương đương Nh ng nghiên c u g n ch r ng đ t bi n gen < /b> emb, đ c bi t t i codon 306 (embB306) ... Bgen < /b> c a vi khu n lao có ch a t i 90,8 % trình < /b> t mã hóa protein ch có gen < /b> gi [20] Gen < /b> IS6110 phân b r i rác nhi u nơi bgen < /b> ðây đo n gen < /b> có tính b o t n cao Các phương pháp PCR, real-time PCR ... amynoglycozid, đ t bi n rpsL ho c c gen < /b> Vi khu n kháng pyrazinamid đ t bi n gen < /b> rrS, gen < /b> pncA Hình 2.4: ð t bi n vùng 81 bp codon 507-533 gen < /b> rpoB “Ngu n: http://www.cdc.gov” Hơn 90% đ t bi n vùng 81 bp codon...
... perfringens nhóm C gây độc < /b> xảy Ở số chủng C perfringens, gen < /b> tạo độc < /b> tố < /b> nằm nhiễm sắc thể, số chủng khác gen < /b> lại nằm plasmid vi khuẩn Gen < /b> plc tạo độc < /b> tố < /b> alpha phospholipase c nhóm C perfringens ... perfringens mẫu Kết B ng Hình 12 cho thấy phương pháp PCR ta phát < /b> C perfringens sớm sau 18 nuôi cấy 47 3.1.4.Khảo sát độ nhạy phản ứng PCRphát < /b> C perfringens Độ nhạy phản ứng PCRphát < /b> C perfringens ... nhạy phát < /b> C perfringens phương pháp PCR 48 3.1.5.Quy trình < /b> PCRphát < /b> C perfringens mẫu thực phẩm Dựa vào kết thí nghiệm trên, đề nghị qui trình < /b> phát < /b> C perfringens mẫu thực phẩm phương pháp PCR...
... Spring Harbor Laboratory Press, USA Hình thành qui trình < /b> phát < /b> đột biến intron 18 19 gen < /b> mã hoá cho yếu tố < /b> VIII, b nh Hemophilia A kỹthuậtPCR - RFLP với Vent ADN polymerase 16/29 (55%) số b nh nhân ... phẩm PCR (ở giếng 4) sau cắt enzyme Hind III Mr: Thang ADN chuẩn 100bp hãng New England Biolabs IV B N LUẬN PCR - RFLP với intron 18 gen < /b> yếu tố < /b> đông máu số VIII Việc khuyếch đại intron 18 kỹthuật ... kích thước 142bp, giống kết Kogan cộng công b [4] Kết nghiên cứu trước đột biến gen < /b> b nh Haemophilia rõ [2, 4], đột biến intron 18 làm vị trí nhận biết enzyme giới hạn Bcl I Nghĩa b nh nhân Hemophilia...
... điều trị Kết kỹthuậtPCR nhóm AFB ( - ) sau tháng điều trị: - KỹthuậtPCRphát < /b> thêm 26/50 trờng hợp (52%) BN xét nghiệm đờm trực tiếp cho kết âm tính - Kỹthuật nuôi cấy MGIT nhóm PCR (+) có ... nhóm AFB ( - ), khác biệt có ý nghĩa (p < 0,05) Kết PCR nhóm AFB âm hoá, sau điều trị tháng 3.1 Kết phát < /b> thêm VK lao đờm PCR Số BN (n = 50) PCR (+) 52% 24 26 PCR (-) 48% Biểu đồ 1: Kết phát < /b> thêm ... trị SHRZ Mỗi b nh nhân đợc làm b nh án mẫu theo nội dung nghiên cứu Kết PCR nhóm AFB âm hoá Những b nh nhân có kết PCR (+) đợc làm thêm kỹthuật MGIT (Mycobacterie Growth Indicator Tube) xem vi...
... phẩm PCR (ở giếng 5) sau cắt enzyme Hind III Mr: Thang ADN chuẩn 100bp KẾT LUẬN • Hình thành qui trình < /b> phát < /b> đột biến intron 18 19 gen < /b> mã hoá cho yếu tố < /b> VIII, b nh Haemophilia A kỹthuật PCR- RFLP ... đoán phát < /b> đột biến b nh nhân Haemophilia A Trong nghiên cứu này, muốn sử dụng ưu điểm gây lỗi trình < /b> xúc tác Deep Vent ADN polymerase để sử dụng kỹthuật PCR- RFLP phát < /b> đột biến intron 18 19 gen < /b> ... sắc thể vị trí Xq28 Gen < /b> mã hoá cho yếu tố < /b> VIII lớn (khoảng 180 kb) bao gồm 26 exon (1) KỹthuậtPCR dùng Taq ADN polymerase, sau phát < /b> điểm đột biến enzyme giới hạn (PCR- RFLP) nghiên cứu trước...
... quy trình < /b> Multiplex- PCR nhân gen < /b> AZF (a, b, c) nhiễm sắc thể Y Đã áp dụng quy trình < /b> kỹthuật nói để phát < /b> vi đứt đoạn gen < /b> AZF BN nam vô sinh nguyên phát-< /b> vô tinh trùng Việc phát < /b> đứt đoạn gen < /b> AZF BN ... cố gắng làm sáng tỏ vai trò gen < /b> đến trình < /b> sinh tinh Với kết b ớc đầu sử dụng Multiplex- PCR để phát < /b> vi đứt đoạn gen < /b> vùng AZF, chưa có tần số đứt đoạn gen < /b> AZF B ng kỹthuật này, cần tiếp tục nghiên ... nhân gen < /b> với mồi chọn đảm b o độ nhạy độ đặc hiệu cao Kết nhóm vô tinh trùng Trong số 16 BN vô tinh trùng, phát < /b> thấy BN đứt đoạn gen < /b> thuộc vùng AZFb vùng AZFc Hình ảnh đứt đoạn AZFb AZFc BN A16...
... đinh type độc < /b> tố < /b> trình < /b> b y hình 3.10 P N M 1000 bp 500 bp 402 bp Hình 3.10 Kết xác định gen < /b> mã hoá độc < /b> tố < /b> vi khuẩn C perfringens Theo tài liệu, type độc < /b> tố < /b> có khả sản sinh loại độc < /b> tố < /b> khác nhau: ... kappa, lambda, mu, nu, neuraminidase, enterotoxin Trong năm gần số tác giả phát < /b> độc < /b> tố < /b> beta [11] - 10 - B ng 1.2 Các độc < /b> tố < /b> vi khuẩn C perfringens Độctố < /b> Epsilon Iota Alpha Beta A + - - - B + + + ... hành gene Cpb2 chủng C perfringens phân lập bbb nh tiêu chảy, b nh nhiễm độc < /b> huyết đường ruột chết đột tử 21,4%, bbb nh type A 11,8%, type C 40% type E 97,3% Epsilon toxin, gene mã hóa độc...
... QUả PHáT < /b> HIệN < /b> MYCOBACTERIUM TUBERCULOSIS Từ B NH PHẩM B NG KỹTHUậT REAL-TIME PCR CủA B KíT MTB REAL-TM Và ANAPURE MTB QPCR KIT TạI B NH VIệN B NH NHIệT ĐớI TRUNG ƯƠNG KHểA LUN TT NGHIP BC S ... kớt MTB Real-TM Biu 3.2: Kt qu xỏc nh Mycobacterium tuberculosis bng b kớt MTB Real-TM Theo biu 3.2, t l mu bnh phm cú kt qu dng tớnh vi M tuberculosis bng k thut real-time PCR ca b kớt MTB Real-TM ... mng bng, mỏu, (4%) 32 3.2.3 So sỏnh kt qu xỏc nh Mycobacterium tuberculosis bng b kớt MTB Real-TM v ANAPURE MTB qPCR KIT Bng 3.5 So sỏnh kt qu xỏc nh Mycobacterium tuberculosis bng b kớt MTB Real-TM...
... phân biệt hai biotype dựa vào gen < /b> tcpA 50 (Rivera cs, 2001) Trình < /b> tự đoạn mồi kích cỡ sản phẩm PCRtrình < /b> b y B ng B ng Trình < /b> tự nucleotid đoạn mồi phản ứng m -PCR V cholerae Vc.sodB-F Vc.sodB-R ... V cholerae O1 có độc < /b> tố < /b> CT (ctxA + rfbO1) 0,0 0,0 V cholerae O139 có độc < /b> tố < /b> CT (ctxA + rfbO139) 5,0 9,4 V cholerae O1 độc < /b> tố < /b> CT (rfbO1) 3,0 8,3 V cholerae O139 độc < /b> tố < /b> CT (rfbO139) 8,1 12,5 V ... m -PCR2 phát < /b> mẫu dương tính đồng 53 thời gen < /b> ctxA với rfbO1 rfbO139 mà môi trường không giúp phát < /b> được; mẫu môi trường so với mẫu môi trường gen < /b> rfbO1; mẫu môi trường so với mẫu môi trường gen...
... pET2 2b( +) mang gen < /b> seb đột biến 48 3.3.1 Thiết kế vector pET22 (b+ ) mang gen < /b> seb đột biến 48 3.3.2 Giải trình < /b> tự gen < /b> seb đột biến vector biểu 49 3.4 Tối ƣu điều kiện biểu gen < /b> seb đột biến ... định trình < /b> tự gen < /b> seb 44 3.2 Tạo đột biến điểm gen < /b> seb 45 3.2.1 Tạo gen < /b> seb đột biến 45 3.2.2 Xác định trình < /b> tự gen < /b> seb đột biến 47 3.3 Thiết kế vector biểu ... biểu gen < /b> seb đột biến tế b o E coli BL21 tinh protein mtSEB 50 3.4.1 Biểu gen < /b> seb đột biến tế b o E coli BL21 50 3.4.2 Tối ưu điều kiện biểu gen < /b> seb đột biến 51 3.4.3 Tinh...
... 27 B ng 4.4 Kết phát < /b> gen < /b> độc < /b> lực E coli nhóm khuẩn lạc phân b tiêu chảy 29 B ng 4.5 Kết phát < /b> gen < /b> độc < /b> lực E coli b mặt thịt b .30 B ng 4.6 Tổng kết kết phát < /b> gen < /b> độc < /b> lực ... BSTY B i Thị Thu Trang Đề tài thực nhằm phát < /b> gen < /b> độc < /b> lực stx1, stx2, eae, ehxA, gen < /b> uid vi khuẩn E coli phân lập từ 27 mẫu phân tiêu chảy b , heo, b mẫu b mặt thịt bkỹthuậtmultiplex – PCR ... Verotoxigenic E coli DANH SÁCH CÁC B NG B NG TRANG B ng 2.1 Danh pháp thành viên họ Stx B ng 3.1 Trình < /b> tự đoạn mồi sử dụng phản ứng multiplex – PCR 22 B ng 4.1 Kết phát < /b> gen < /b> độc...
... cập đến E coli sản sinh hay nhiều độc < /b> tố < /b> gây độc < /b> tế b o Tuy nhiên, có gen < /b> sản sinh độc < /b> tố < /b> gây b nh yếu tố < /b> độc < /b> lực khác Những dòng E coli mang gen < /b> sản sinh độc < /b> tố < /b> diện ruột gia súc khỏe mạnh với ... (-) Multiplex - PCR Loại b ống NA giữ gốc (+) ) Ly trích DNA riêng theo ống NA Multiplex- PCR Sơ đồ 3.1 Qui trình < /b> phân lập, định tính phát < /b> gen < /b> độc < /b> lực E coli 3.3.4 Qui trình < /b> multiplex – PCR ... chảy b Feng Monday (2000) cho biết có 100 loại serotype STEC khác sản sinh loại độc < /b> tố < /b> Stx1, Stx2, nhiều biến chủng Stx2 Trong đó, Stx1 Stx2 độc < /b> tố < /b> chủ yếu gây b nh người B ng 4.4 Kết phát < /b> gen < /b> độc...
... %.Đây gene phổ biến mẫu phát < /b> PCR Theo nhiều nghiên cứu, HBL độc < /b> tố < /b> nội ruột ly giải hồng cầu bao gồm thành tố < /b> protein B mã hóa gene hblA, thành tố < /b> protein L: L1 mã hóa gene hblD L2 mã hóa gene hblC ... Trong gene (Bcet) mã hóa protein độc < /b> tính nội ruột T có tần suất xuất 45.6% Biểu đồ 2: Tần suất xuất kiểu gene mang độc < /b> tố < /b> Bacillus cereusđợcphát < /b> PCR KếT LUậN B i b o trình < /b> b y kết khảo sát ban ... đủ để Bacillus cereus sinh độc < /b> tố < /b> Nghiên cứu ứng dụng thành công phơng pháp sinh học phân tử tiên tiến, multiplex- PCR để xác định gene sinh độc < /b> tố < /b> Bcereus (bceT, nheA, hblA, hblD) Kết b c đầu...
... DNA chạy multiplex – PCRphát < /b> gen < /b> gây độc < /b> Kết trình < /b> b y b ng 4.4 Kết b ng 4.4 cho thấy (1) khuẩn lạc riêng lẻ màu hồng MAC lấy ngẫu nhiên, multiplex – PCRphát < /b> 1/4 số khuẩn lạc mang gen < /b> stb (25%) ... coli phân lập từ phân b , phân heo tiêu chảy thịt b ” 1.2 Mục tiêu - Phát < /b> số gen < /b> độc < /b> lực E coli kỹthuậtmultiplex – PCR từ mẫu phân tiêu chảy b , b , heo mẫu b mặt thịt b 1.3 Mục đích - Góp ... Chưa phát < /b> gen < /b> sta E coli phân lập từ 27 mẫu phân tiêu chảy b , b heo 5.2 Đề nghị (1) Có thể ứng dụng kỹthuậtmultiplex – PCR để phát < /b> gen < /b> độc < /b> lực dòng E coli gây b nh, góp phần chẩn đốn b nh...