3 Độ ác tính cao
1.3.3.Kháng thể đơn chuỗi (kháng thể scFv)
Kháng thể đơn chuỗi hay kháng thể scFv là kháng thể có kích thƣớc nhỏ nhất, là protein dung hợp các vùng biến đổi của chuỗi nặng (VH) và chuỗi nhẹ (VL) của các globulin miễn dịch, đƣợc nối với nhau bằng một đoạn nối (linker peptit) ngắn khoảng 15 amino acid có trình tự (Gly4Ser)3. Đoạn nối này thƣờng giàu Glycine để tạo tính linh hoạt, cũng nhƣ giàu serine cần cho khả năng hòa tan và có thể kết nối vùng đầu N của VH với vùng đầu C của VL hay ngƣợc lại, [124], [63]. Đoạn nối cho phép vùng biến đổi của chuỗi nặng (VH) kết hợp với vùng biến đổi của chuỗi nhẹ (VL) tạo thành phân tử đơn chuỗi (scFv). ScFv đƣợc biểu hiện nhƣ một chuỗi polypeptide đơn và đƣợc mã hóa bởi một gen [23]. Và scFv vẫn bảo tồn hoạt tính nhận biết và liên kết đặc hiệu với kháng nguyên đích.
Ứng dụng trong chẩn đoán, scFv có thể đƣợc sử dụng để xác định các loại tế bào khác nhau trong huyết thanh hay đếm các tế bào đó [131].
21
Để tăng hiệu quả trong điều trị, từ scFv các nhà khoa học có thể tạo ra các loại “mảnh” kháng thể khác nhƣ: Fab, diabody, minibody (2 scFv-CH3 của ngƣời), scFv-Fc,… (Hình 1.8) [99]. Trong đó, scFv-Fc là dạng có cấu trúc gần với cấu trúc của phân tử mAb hoàn chỉnh nhất, nó giữ đƣợc phần Fc có nguồn gốc từ ngƣời. Vì vậy, khi sử dụng trong điều trị, scFv hiệu quả trong việc gây phản ứng miễn dịch khi cần tới sự có mặt của Fc (nhƣ gây độc tế bào phụ thuộc kháng thể - ADCC, CDC) [73].
Để thay thế sử dụng các phân tử mAb truyền thống, các mảnh kháng thể cần đảm bảo 4 đặc điểm sau:
(1) Có ái lực cao và liên kết đặc hiệu với kháng nguyên đích.
(2) Đảm bảo độ bền với thời gian cần thiết ở nhiệt độ cơ thể cũng nhƣ trong quá trình bảo quản.
(3) Phù hợp sản xuất ở quy mô lớn để đảm bảo số lƣợng cần thiết cho điều trị (4) Không kích thích sinh miễn dịch ở ngƣời sử dụng.
Hiện nay, scFv là kháng thể phổ biến nhất của kháng thể tái tổ hợp, so với kháng thể mAb thì các scFv đã có nhiều ƣu điểm nhƣ:
(1)Đƣợc tạo ra khá dễ dàng với một lƣợng lớn và chi phí thấp. (2)scFv có thể đƣợc tạo ra từ thƣ viện gen ngƣời [61].
22
(3)Tối ƣu cấu trúc scFv mà không mất khả năng liên kết với kháng nguyên và các bổ thể, hạn chế tối đa hiện tƣợng HAMA.
(4) Kích thƣớc nhỏ của scFv thuận lợi khi thâm nhập vào các mô đích và tiêu diệt các mô này [74].
(5) Kháng thể scFv có thể dễ dàng dung hợp với protein đánh dấu khác nhƣ enzym hoặc protein gắn huỳnh quang tạo thành các chất sẵn sàng cho các phân tích miễn dịch [91], [104]. Tuy nhiên, các phân tử scFv thể hiện ái lực thấp hơn các phân tử kháng thể đơn dòng gốc [86], điều này đã làm hạn chế tới việc ứng dụng các scFv trong các phép thử miễn dịch.