3 Độ ác tính cao
1.2.1. Cấu trúc gen và protein CD
Một số kháng thể đơn dòng kháng CD20 đã thành công trong điều trị bệnh ung thƣ máu dạng ung thƣ lympho không Hodgkin [25], [35], [43]. Tuy nhiên, chúng ta biết rất ít về mặt sinh học của CD20 và sự hiểu biết về phân tử này chủ yếu dựa trên cấu trúc gen và protein.
Cấu trúc gen CD20
Gen mã hóa CD20 gồm 8 exon, dài 16 kb và đã đƣợc tách dòng thành công năm 1988 [116]. Gen này nằm ở nhiễm sắc thể số 11 trên nhánh dài vùng q12-q13.1 (11q12-q13.1), nằm gần sát các gen mã hóa chuỗi FcRIβ và các protein HTm4. Dựa trên sự biểu hiện của tế bào, cấu trúc gen CD20 ở ngƣời, chuột và thỏ khá giống nhau. Tuy nhiên, theo Liang và Tedder đã xác định một số thành viên họ mới, mô tả nhóm lớn hơn nhƣ họ gen MS4Ab gồm 21 protein khác biệt giữa ngƣời và chuột [81].
Gen CD20 không có hộp TATA cổ điển và thay vào đó là sự xuất hiện một số vị trí mở đầu khác nhau. Do vậy, quá trình phiên mã bắt đầu ở một số điểm khác nhau ở exon 1 và 2 dẫn đến sự khác nhau về chiều dài phân tử mRNA từ 2,6 đến 3,4
12
kb. Mặc dù có sự khác nhau về chiều dài của mRNA nhƣng vùng dịch mã đƣợc bắt đầu từ ở exon 3, do đó tạo nên protein có cấu trúc đơn giản.
Cấu trúc protein CD20
Kháng nguyên CD20 có bản chất là phosphoprotein gồm 297 amino acid với khối lƣợng phân tử 33-36 kDa. Tiên đoán từ trình tự cDNA và dữ liệu thực nghiệm [35], [48] cho thấy protein này đặc trƣng bởi 4 vùng xuyên màng, 2 đầu tận cùng NH2- và COOH- đều nhúng trong tƣơng bào, có 2 vòng không glycosyl hóa nằm ở ngoại bào: 1 vòng nhỏ 13 amino acid (từ aa thứ 72 đến 80), vòng lớn 41 amino acid (từ aa thứ 142 đến 182) (Hình 1.2). Cả 2 vòng nằm ở ngoại bào đều chứa các cấu trúc quyết định các loại kháng thể đặc hiệu kháng nguyên CD20 hiện có, bao gồm Rituximab (kháng thể đơn dòng (mAb) kháng CD20 đƣợc FDA phê chuẩn dùng trong điều trị bệnh u lympho không Hogdkin (NHL) đầu tiên. Cấu trúc bậc hai vùng vòng ngoại bào phụ thuộc vào hai amino acid, alanine và proline tại vị trí 170 và 172 tƣơng ứng. Đột biến gen mã hóa các amino acid này làm tất cả các kháng thể mất khả năng gắn với CD20 [41], [44].