3 Độ ác tính cao
1.3.5.Ứng dụng mAb trong chẩn đoán bệnh ung thƣ máu
Từ cuối năm 1970, các tế bào tạo máu đã đƣợc sử dụng nhƣ nguồn kháng nguyên để phát triển các kháng thể đơn dòng và nhiều thuốc thử kháng lại các chỉ thị trên bề mặt tế bào đã đƣợc sử dụng trong chẩn đoán bệnh ung thƣ máu [113].
Hiện nay, mAb đƣợc sử dụng để chẩn đoán bệnh ung thƣ máu theo 3 phƣơng pháp chính: (1) chụp ảnh phóng xạ qua kháng thể đơn dòng, (2) xét nghiệm hóa mô miễn dịch, (3) xét nghiệm đếm tế bào dòng chảy.
(1). Chụp ảnh phóng xạ qua kháng thể đơn dòng
Kháng thể đơn dòng chỉ phản ứng đặc hiệu với riêng một loại kháng nguyên nhất định. Khi đƣợc tiêm vào cơ thể, kháng thể sẽ tìm đúng đối tƣợng là các kháng nguyên đặc hiệu nằm trên bề mặt các tế bào ung thƣ, lƣợng đồng vị phóng xạ gắn trên kháng thể đơn dòng sẽ đƣợc đo bằng máy Gamma và nhƣ vậy sẽ làm hiện hình khối u với vị trí và kích thƣớc rõ ràng. Ngoài ra, kháng thể scFv có thể gắn thêm phần cảm biến nano vàng để định hƣớng trực tiếp và tìm đúng các khối u có xuất hiện kháng nguyên đặc hiệu [20].
(2). Xét nghiệm hóa mô miễn dịch
Hóa mô miễn dịch là phƣơng pháp mà kháng thể đƣợc sử dụng để thăm dò các kháng nguyên ở các mẫu bệnh nhƣ máu, tủy sống. Đa số phƣơng pháp xét nghiệm này là chẩn đoán và phân loại ung thƣ máu, ngoài ra còn đƣợc sử dụng để xác định giai đoạn phát triển bệnh, tiên lƣợng và thăm dò khả năng điều trị bệnh theo liệu pháp miễn dịch [47].
Hiện nay có hơn 350 chỉ thị phân tử CD và nhiều kháng thể đặc hiệu CD đƣợc sử dụng trong phân tích chẩn đoán ung thƣ máu. Ở tế bào B, giai đoạn tiền
26
phát triển B chủ yếu xuất hiện các CD (CD10, CD19, CD22, CD34, CD79a, b), tế bào B trƣởng thành (CD19, CD20, CD22, CD79a, b), tế bào B đã hoạt hóa (CD10, BCL-6, CD5, CD20, CD23) và tƣơng bào (CD19, 38, CD138). Ở tế bào T, giai đoạn tiền T chủ yếu xuất hiện (CD1a, CD2, CD3, CD4, CD5, CD7, CD8, CD34, CD99), giai đoạn T trƣởng thành (CD2, CD3, CD4, CD5, CD7, CD8, CD43, CD54RO).
Dựa vào sự xuất hiện các chỉ thị CD ở các giai đoạn phát triển của tế bào máu mà các nhà sản xuất đã đƣa ra các panel chuẩn để chẩn đoán bệnh ung thƣ máu. Các panel này có thể xác định đƣợc dòng tế bào, giai đoạn phát triển của bệnh và phân loại ung thƣ máu [47].
(3). Xét nghiệm đếm tế bào dòng chảy
Xét nghiệm điếm tế bào dòng chảy sử dụng mAb để chẩn đoán (sàng lọc tế bào máu ác tính, phân loại kiểu hình miễn dịch của tế bào máu ác tính), theo dõi tình hình bệnh đang điều trị và sau khi điều trị ung thƣ máu. Phƣơng pháp này ngày càng đƣợc sử dụng rộng dãi và có ƣu điểm hơn hẳn phƣơng pháp xét nghiệm hóa mô miễn dịch nhƣ đơn giản, tính nhạy và độ đặc hiệu cao, cho kết quả xét nghiệm nhanh [95]. Ngoài ra, đếm tế bào dòng chảy còn đƣợc ứng dụng trong nhiều xét nghiệm khác nhƣ chẩn đoán trƣớc sinh, di truyền và phân loại tinh trùng cho thụ tinh ống nghiệm. Hiện nay, một số hãng nhƣ BD, Exbio đã bán kit dùng cho xét nghiệm đếm tế bào dòng chảy.
Nhìn chung, việc chẩn đoán các tế bào ung thƣ máu dạng lympho phổ biến và dễ dàng hơn ung thƣ dạng leukemia và myeloma [113], [115].
Đếm tế bào dòng chảy có thể chẩn đoán đƣợc các bệnh u lympho (có nguồn gốc lympho B và T) với số lƣợng rất nhỏ tế bào ác tính trong máu, tủy sống và hệ thần kinh trung ƣơng. Bệnh ung thƣ lympho không Hodgkin đƣợc phát hiện với lƣợng rất nhỏ tế bào lympho B ác tính trong dịch tủy sống (1 tế bào/3 l) hay dựa trên sự khảo sát màu sắc khác nhau của các mAb trong xét nghiệm (Bcl2/CD10/CD20/CD38) [95]. Bệnh ung thƣ tế bào lympho mạn tính (CLL) có thể chẩn đoán dựa trên sự khảo sát một số chỉ thị CD20, CD22, CD81 và CD5/CD23
27
trên tế bào lympho B [21]. Bệnh ung thƣ dòng tủy cấp (AML) có thể chẩn đoán dựa trên một số chỉ thị CD33, CD34, CD15, CD14, CD11b và HLADR [115].
Ngoài ra, đếm tế bào dòng chảy đƣợc sử dụng để theo dõi điều trị và sau khi điều trị, dự đoán khả năng tái phát bệnh ung thƣ dòng tủy cấp và ung thƣ tế bào lympho cấp [115], đánh giá hiệu quả điều trị các bệnh u lympho [113]. Kết quả xét nghiệm này còn đƣợc sử dụng để dự đoán phản ứng của kháng thể đặc hiệu kháng nguyên CD trên bề mặt tế bào trong liệu pháp điều trị bằng mAb [121] và có thể chỉ ra các thuốc mới - đích tiềm năng để kháng lại các chỉ thị hay gây chết tế bào ác tính theo chƣơng trình.