- Khĩ đánh giá sự dung nạp
GHÉP TỰ THÂN TẤM TẾ BÀO SỪNG NHIỀU LỚP TRÊN BỆNH NHÂN
TRÊN BỆNH NHÂN
Thí nghiệm được tiến hành tổng quát như sau:
Sơ đồ 2.1. Quy trình chung của thí nghiệm
Mẫu da người
Nuơi, nhân tế bào sừng
Cấy tế bào sừng
lên màng collagen
Tạo nhiều lớp tế bào sừng trên màng collagen
Đánh giá Phân lập tế bào
Màng collagen
Loại biểu mơ
Màng ối người
Theo dõi, đánh giá sản phẩm Ghép tự thân trên
35
2.7. QUY TRÌNH NUƠI CẤY TẾ BÀO SỪNG – GHÉP DA :
- Sau khi qua giai đoạn sốc bỏng, bệnh nhân được tiến hành thay băng, đánh giá diện tích và độ sâu của thương tổn, hội chẩn, lập kế hoạch ghép da và định vị trí vùng lấy da.
- Thời điểm lấy mẫu da là 2 tuần trước ngày dự kiến ghép da. Ngày dự kiến ghép da thường từ tuần thứ 3 sau tai nạn bỏng.
- Vị trí lấy mẫu da là một vùng da khơng bị bỏng, kích thước 5 x 10 cm, thường chọn ở chi để dễ băng bĩ. Chỗ lấy da tốt nhất là ở một vùng chi cách xa thương tổn bỏng. Tuy nhiên, trong những trường hợp bỏng rộng, thì cĩ thể lấy da cạnh vùng bỏng, nhưng phải băng riêng với thương tổn bỏng.
- Chúng tơi kết hợp việc lấy mẫu gửi đi nuơi cấy da và cắt lọc mơ hoại tử trong một lần phẫu thuật.
- Vào ngày lấy mẫu da, bệnh nhân được chuyển đến Phịng mổ, gây mê tồn thân. Sau khi mở băng, chúng tơi sát khuẩn theo thứ tự : vùng lấy da (sạch) trước, vùng bỏng sau. Trải săng che phủ bệnh nhân, bộc lộ vùng lấy da.
- Mẫu da nuơi cấy được lấy 5 x 10 cm, bằng dao Watson, theo kiểu lấy da mỏng (thượng bì và nửa lớp trung bì), dày 0,015 inch. đựng trong lọ vơ khuẩn, với dung dịch bảo quản. Dán nhãn tên bệnh nhân, đặt trong túi giữ lạnh và chuyển ngay cho labo trong vịng 2 giờ từ khi lấy mẫu.
- Băng vùng lấy da với gạc mỡ. Dùng săng che phủ và tiến hành cắt lọc mơ hoại tử. Trong mỗi lần phẫu thuật cắt lọc mơ hoại tử, bệnh nhân được cắt lọc dưới 15 % diện tích cơ thể.
- Bệnh nhân được tiếp tục hồi sức, giảm đau và điều trị kháng sinh theo như phác đồ tại khoa Bỏng. Vết bỏng được thay băng bằng kem Sulfadiazine 1% và đánh giá tình trạng nhiễm trùng và tình trạnh mơ hạt để chuẩn bị cho ghép da.
2.8. QUY TRÌNH CHUẨN BỊ CHO GHÉP DA:
- Hội chẩn để ghép da : ngày ghép là 14 ngày sau khi lấy mẫu, tình trạng bệnh nhân ổn định, khơng cĩ dấu hiệu nhiễm trùng (tồn thân hay tại chỗ), tình trạng dinh dưỡng chấp nhận.
- Nếu vì những lý do nào đĩ mà khơng thực hiện được đúng dự tính thì thời gian hỗn lại khơng quá 2 ngày.
- Thống nhất ngày ghép da với labo : ngày ghép, bệnh nhân vào phịng mổ lúc 8 giờ, da nuơi cấy được nhận về phịng mổ lúc 9 giờ.
- Vào ngày ghép da, bệnh nhân được xếp ca đầu tiên trong ngày : 8 giờ sáng, bệnh nhân được chuyển đến Phịng mổ. 8 giờ 30: Tiến hành gây mê tồn thân. Mở băng và sát khuẩn chỗ ghép da bằng Povidon, sau đĩ bằng nuớc muối 0,9 %.
- Thực hiện đặt da nuơi cấy với tấm nền đúng quy trình : dùng nhíp tách tấm nền và da nuơi cấy ra khỏi giá treo. Đặt lên nền chỗ ghép theo đúng chiều hướng lên trên. Dùng kéo đục lỗ trên tấm nền để thốt dịch. Băng ép nhẹ vùng ghép da với gạc khơng dính Urgotul, gạc và băng thun.
- Chỗ ghép da được giữ yên trong 6 ngày, sau đĩ thay băng với gạc khơng dính. Da nuơi cấy ghép sẽ được đánh giá sau 1 tuần nữa ( tức là 2 tuần sau ghép).
36 - Nếu diện tích bỏng rộng thì những lần cắt lọc – lấy mẫu da và cắt lọc – ghép da nuơi cấy được bố trí cách nhau 1 tuần và cứ tuần tự như thế cho đến khi đĩng kín vết thương. Trong trường hợp khơng cĩ da nuơi cấy, bệnh nhân cần ghép da sẽ được hội chẩn để ghép da mỏng như quy trình thơng thường tại Khoa bỏng.
- Số lần phẫu thuật được tính trên số lần phẫu thuật để ghép da, da nuơi cấy và / hoặc da mỏng tự thân.
- Tái khám theo lịch hẹn. Đánh giá da ghép sau ghép da 3 tháng và 1 năm. - Nhĩm chứng được lấy từ số liệu hồi cứu của 12 tháng trước đĩ. Các tiêu chuẩn chọn vào cũng tương đồng như nhĩm nghiên cứu. Da ghép chỉ là da mỏng tự thân.
2.9. NGHIÊN CỨU THỬ NGHIỆM:
Thực hiện khảo sát thử 14 bệnh nhi.
Sau khi thu thập thơng tin từ 14 bệnh nhi đánh giá lại giá trị của các biến, tính phù hợp của thiết kế nghiên cứu.
Đánh giá lại những thuận lợi, khĩ khăn và dự kiến tiến độ thực hiện.
Hiệu chỉnh phiếu khảo sát và điều chỉnh kế hoạch khảo sát.
2.10. VẤN ĐỀ Y ĐỨC
Nghiên cứu tuân thủ các yêu cầu về y đức.
Bố mẹ hoặc người thân của trẻ đồng ý (bằng văn bản) tham gia thử nghiệm sau khi được giải thích đầy đủ và rõ ràng.
Nghiên cứu đã được Hội đồng y đức Bệnh viện Nhi Đồng 1 thơng qua.
2.11. XỬ LÝ SỐ LIỆU
Số liệu thu nhận được xử lý bằng chương trình Excel, tính tốn thống kê sai số chuẩn và độ khác biệt cĩ ý nghĩa nhỏ nhất (Least Significant Different - LSD) ở mức xác suất p = 95% bằng phương pháp phân tích phương sai (Analysis of Variance - ANOVA) theo chương trình Statgraphic 7.0 của Trường Đại học Michigan (Mỹ).
37