Phân tích hàm lượng kháng sinh Norfloxacin trong dược phẩm

Một phần của tài liệu Nghiên cứu và chế tạo cảm biến sinh học trên cơ sở công nghệ polyme in phân tử ứng dụng phát hiện một số phân tử nhỏ (protein, kháng nguyên, kháng sinh) (Trang 59 - 61)

Ngoài phân tích dư lượng kháng sinh NOR trong nước nuôi thủy sản, chúng tôi phân tích hàm lượng kháng sinh trong NOR trong dược phẩm. Thuốc kháng sinh NOR 400 mg có thành phần bao gồm 400 mg kháng sinh Norfloxacin và tá dược (xem hình 2.8). Thuốc kháng sinh này chỉ điều trị nhiễm khuẩn và sẽ không dùng cho điều trị nhiễm virus (ví dụnhư cảm lạnh thông thường hoặc cúm). Đây là một loại kháng sinh phổ biến và bán khá nhiều trên thị trường. Chúng ta có thể dễ dàng mua được chúng từ hiệu thuốc mà không cần chỉ định của bác sĩ. Chúng tôi sẽ xác định hàm lượng của kháng sinh Norfloxacin trong thuốc theo hai phương pháp: sử dụng phương pháp quang phổ UV-vis và cảm biến NOR-MIP/EIS.

Hình 2.8. Thuốc kháng sinh Norfloxacin 400 mg.

Quy trình phân tích được thể hiện trên hình 2.9. Sau khi mua được kháng sinh dưới dạng viên nén chúng tôi tiến hành nghiền nhỏ viên thuốc thành dạng bột bằng cách sử dụng cối nghiền. Hỗn hợp thu được được trộn đồng nhất và được hòa tan trong 20 mL dung dịch axit acetic đểthu được hồn hợp của thuốc và axit acetic 1%. Hỗn hợp được rung siêu âm trong 20 phút để hòa tan toàn bộ kháng sinh Norfloxacin. Sau đó

40

hỗn hợp được lọc qua màng lọc kích thước 0,45 µm. Cuối cùng hỗn hợp được đem quay ly tâm với tốc độ 6000 rpm trong 5 phút. Sau đó chúng tôi pha loãng hỗn hợp dung dịch 20.000 lần (20 µg/mL), 40.000 lần (10 µg/mL), 200.000 lần (2 µg/mL) để tiến hành phân tích UV-vis và pha loãng xuống 400.000.000 lần (1 ng/mL) để phân tích điện hóa. Sau khi được pha loãng lần lượt từng nồng độ, thuốc được đem phân tích bằng cách nhỏ 2 µL dung dịch lên cảm biến điện hóa NOR-MIP được chế tạo theo phương pháp như đã được mô tả ở trên. Sau 15 phút cảm biến được rửa sạch bằng nước cất 2 lần và sấy khô và được phân tích điện hóa. Giá trị điện trở truyền điện tích chênh lệch giữa trước và sau khi nhỏ dung dịch kháng sinh ΔRCTđược ghi lại. So sánh giá trị trên vào giá trị đường chuẩn đã thu được chúng tôi thu được giá trị nồng độđã phát hiện được.

Hình 2.9. Quy trình xác định nồng độ kháng sinh Norfloxacin trong thuốc kháng sinh

41

Để phân tích hàm lượng kháng sinh trong dược phẩm bằng phương pháp UV- vis, chúng tôi cần xây dựng đường chuẩn để xác định nồng độ của mẫu chuẩn kháng sinh NOR. Mẫu chuẩn NOR (98%) được cân và pha loãng trong acid acetic 1% đểđạt được nồng độ 10 mg/mL. Sau đó mẫu được pha loãng thành nhiều mẫu mỗi mẫu có nồng độ xác định từ 1µg/mL đến 40 µg/mL. Đường đặc trưng chuẩn được xây dựng theo sự phụ thuộc của nồng độ và diện tích của đỉnh lớn nhất. Chúng tôi phân tích với dải bước sóng từ 200 đến 400 nm do kháng sinh Norfloxacin thuộc họquinolone có đặc tính hấp thụ mạnh trong tia cực tím.

Đầu tiên 3 mL của axit actetic 1 % được chọn đo và chọn giá trị đo được của 3mL trên làm nền. Sau đó, 3 mL của nồng độ mẫu chuẩn được cho vào cuvet và phân tích. Sau khi phân tích dải nồng độ từ 1µg/mL đến 40 µg/mL, giá trị diện tích của đỉnh lớn nhất trên từng nồng độ được ghi lại. Chúng tôi tiến hành phân tích mỗi nồng độ 3 lần và lấy giá trị trung bình của đỉnh lớn nhất. Đường chuẩn của phương pháp được xây dựng dựa trên sự thay đổi của giá trị trung bình diện tích của đỉnh đặc trưng lớn nhất theo từng nồng độ. Để phân tích mẫu thuốc chúng tôi pha loãng mẫu thuốc xuống 20.000 lần (20 µg/mL) 40.000 lần (10 µg/mL) 200.000 lần (2 µg/mL). Chúng tôi tiến hành phân tích kết quả ở 3 nồng độ trên 3 lần và thu được kết quả có độ sai số rất thấp (< 3%). Kết quảtrung bình được so sánh với đường chuẩn đã xây dựng ở trên để xác định hàm lượng kháng sinh Norfloxacin trong thuốc kháng sinh Norfloxacin 400 mg.

Một phần của tài liệu Nghiên cứu và chế tạo cảm biến sinh học trên cơ sở công nghệ polyme in phân tử ứng dụng phát hiện một số phân tử nhỏ (protein, kháng nguyên, kháng sinh) (Trang 59 - 61)

Tải bản đầy đủ (PDF)

(181 trang)