CHƯƠNG 2 THỰC NGHIỆM VÀ CÁC PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU
5.2.4. Đường đặc trưng chuẩn của cảm biến
Sau khi nghiên cứu độ lặp lại, từ giá trịđiện trởtrung bình và độ lệch chuẩn trung bình của từng nồng độ. Với giá trị thu được chúng tôi dựng được đường đặc trưng chuẩn của cảm biến. Hình 5.13 trình bày đường đặc trưng chuẩn thể hiện sự phụ thuộc của ∆RCT vào nồng độ của Norfloxacin của cảm biến NOR-MIP. Kết quả cho thấy giá trị RCT với cảm biến sử dụng đầu thu sinh học nhân tạo xác định NOR tăng tuyến tính trong 2 dải nồng độ từ 0,32 ng/mL (1nM) đến 3,19 ng/mL (10nM) và từ 3,19 ng/mL (10nM) đến 31,93 ng/mL (100 nM). Cả hai vùng làm việc của cảm biến đều có độ tuyến tính cao (R2 ~ 0,99).
Từđường đặc trưng chuẩn chúng tôi tính được giới hạn phát hiện của cảm biến (LOD) trong vùng 1 là 0,15 ng/mL, trong vùng 2 là 0,82 nM. Theo sau đó là giới hạn định lượng (LOQ) của cảm biến trong vùng 1 là 0,5 ng/mL và vùng 2 là 2,76 ng/mL. Như vậy giải nồng độ làm việc của cảm biến ứng với 2 vùng tuyến tính lần lượt là 0,5 ng/mL đến 3,19 ng/mL và 2,76 ng/mL đến 31,91 ng/mL. Giới hạn phát hiện của cảm biến (LOD), và giới hạn định lượng của cảm biến được tính theo công thức:
𝐿𝐿𝐿𝐿𝐿𝐿 = 3.𝑥𝑥𝑥𝑥𝐿𝐿𝑥𝑥𝑥𝑥(𝑏𝑏𝑠𝑠𝑎𝑎𝑛𝑛𝑘𝑘)
102
𝐿𝐿𝐿𝐿𝐿𝐿 = 10.𝑥𝑥𝑥𝑥𝐿𝐿𝑥𝑥𝑥𝑥𝑥𝑥𝑠𝑠𝑠𝑠𝑠𝑠𝑠𝑠(𝑏𝑏𝑠𝑠𝑎𝑎𝑛𝑛𝑘𝑘)
Trong đó STDEV (blank) là giá trị độ lệch chuẩn trung bình của giá trị điện trở truyền điện tích của mẫu trắng và Slope là độ nhạy.
Hình 5.13. Đường đặc trưng chuẩn của cảm biến NOR-MIP/EIS xác định kháng sinh
Norfloxacin và mẫu đối chứng không in phân tử MIP trong dải nồng độ của Norfloxacin từ 0,32 ng/mL (1 nM) đến 31,91 ng/mL (100 nM).
Bảng 5.5 thể hiện một số kết quảxác định nồng độ kháng sinh trong thuốc hoặc thực phẩm được công bố trên các tạp chí quốc tế.
Bảng 5.5. Một số các kết quả xác định nồng độ kháng sinh Norfloxacin được công bố trên các tạp chí khoa học trên thế giới.
Phương pháp Hóa chất Giới hạn phát hiện (µg mL-1) Dải làm việc (µg mL-1) Tài liệu tham khảo
Phân tích điện hóa Carbon nanotubes 0,016 0,032-
31,913 [2] UV-vis Hydrochloridric acid 0,670 2,0 – 7,0 [156]
UV-vis Hydrochloridric acid 22,050 90 – 120 [156] Phân tích điện hóa Glassy carbon electrode 1,100 5–50 [157] Quét thế tuần hoàn Pyrrole 0,015 0,032-2,553 [158] HPLC Sodium starch glycolate 2,185 5–20 [3]
103
Có nhiều phương pháp để xác định kháng sinh Norfloxacin tuy nhiên những phương pháp này đều cho dải làm việc cỡ microgram. Cảm biến phổ tổng trở kháng phức dựa trên công nghệ MIP cho giới hạn phát hiện và dải làm việc nhỏ hơn rất nhiều (ng/mL). Điều này có nhiều ưu điểm cũng như là nhược điểm. Vềưu điểm cảm biến phổ tổng trở điện hóa xác định nồng độ nhỏ hơn từ đó có ưu điểm trong phát hiện cỡ nồng độ cực nhỏ trong thực phẩm cũng như xác định được hàm lượng cực nhỏkháng sinh trong dược phẩm. Tuy nhiên, nếu như thực phẩm có dư lượng kháng sinh quá lớn cũng như thuốc có nồng độ kháng sinh lớn thì không thể phát hiện được. Điều này yêu cầu trong quá trình xử lý mẫu không làm mất đi lượng kháng sinh trong mẫu, cũng như sự chính xác của dụng cụ thí nghiệm trong bước pha loãng.