TRÌNH KHÉP KÍN
Nếu trong qui trình làm sạch virus có thể áp dụng được kỹ thuật xử lý nhiệt và nuôi cấy đỉnh phân sinh thì việc xét nghiệm virus chỉ còn là biện pháp kiểm tra cuối cùng của quá trình làm sạch virus , như vậy sẽ có mâu thuẩn với mục đích làm sạch virus nếu người ta xử dụng 50% cây trong tập đoàn cây trồng bị bệnh làm vật liệu ban đầu và coi chúng là những cây có phẩm chất tốt , một mặt thông qua cải tiến phương pháp xét nghiệm đưa độ chính xác của phương p háp lên cao người ta phải luôn tính để số lượng virus bảo tồn ở nồng độ tối thiểu mà phương pháp xét nghiệm không chứng minh được.
Vì vậy, theo kinh nghiệm thực tế cần tiến phải xét nghiệm theo phương thức sau:
Đưa vật liệu ban đầu vào xử lý nhiệt trong một thời gian dài để làm sạch những virus mẫn cảm nhiệt độ sau đó dùng phương pháp nuôi cấy đỉnh phân sinh sau từ 4-6 tháng kể từ ngày nuôi cấy mới bắt đầu xét nghiệm thời gian này đủ để cho virus bảo tồn trong cây đủ nồng độ cho phép chứng minh được . Những cơ thể được xác định là sạch bệnh là nguồn vật liệu ban đầu để cung cấp cây mẹ cho sản xuất . Khoảng 5-10% số cơ thể này được tách riêng ra thành tập đoàn nhân mạnh khoẻ (health nucleus clone)
để các nhà tạo giống cải tiến tính chất theo ý muốn và độ thuần chủng (đồng nhất) của giống. Người ta kiểm tra những cơ thể này bằng tất cả các phương pháp xét nghiệm virus hiện có. Với hoa nelken người ta đã kiểm tra bằng phương pháp huyết thanh các loài virus caruation woltle , caruation latent, caruation ringspot... và xét nghiệm bằng cây chỉ thị Cheuopodium quinoa và Vaccara pyramydata nhằm loại trừ những vi rus ít sinh sản không có biểu hiện nhận biết được . Những cây xác minh được là khoẻ được tiến hành ươm cành rồi sau đó đưa vào xử lý nhiệt , tiếp theo nuôi cấy đỉnh sinh trưởng và cuối cùng kiểm tra bằng xét nghiệm virus . Đó là toàn bộ qui trình làm sạch virus khép kín.
Ngoài phương pháp và quá trình xét nghiệm thì kết quả làm sạch virus phụ thuộc nhiều vào trạng thái của cây cần được xét nghiệm , nghĩa là nồng độ virus có trong các bộ p hận khác nhau , tuổi khác nhau , mùa khác nhau . Muốn bảo đảm xét nghiệm hàng loạt chính xác thì cần phải có nhà nuôi cây. Nhiệt độ ổn định, tương quan ánh sáng ổn định và cây xét nghiệm phải cùng độ tuổi nhất định với nồ ng độ virus thích hợp cho xét nghiệm, cho phép thu được kết quả xét nghiệm chính xác.