Chúng tôi sử dụng mật độ tế bào cấy là 5 x 105 tế bào/ml để khảo sát tác động của
nồng độ FBS lên sự tăng trưởng của hybridoma và sự sản xuất KTĐD theo thời gian. Hai nồng độ FBS khảo sát là 5 % và 10 %.
Hình 44. Sự thay đổi mật độ tế bào, nồng độ kháng thể trong môi trường có bổ sung 5 % FBS
(A) và 10 % FBS (B) khi nuôi bằng bioreactor với mật độ cấy 5 x 105 tế bào/ml.
Kết quả (hình 44, phụ lục 13) cho thấy, sau 48 giờ nuôi cấy, mật độ tế bào sống đạt
8,62 x 105 tế bào/ml trong môi trường bổ sung 5 % FBS và 11,56 x 105 trong môi trường
bổ sung 10 % FBS.Trong môi trường bổ sung 5 % FBS mật độ tế bào đạt mức tối đa ở thời điểm 120 giờ nhưng hàm lượng KTĐD vẫn tiếp tục tăng tới thời điểm 192 giờ (Hình 44-A), đạt khoảng 120 µg/ml và chưa có khuynh hướng giảm.Còn trong môi trường bổ sung 10 % FBS, hybridoma tăng trưởng nhanh, đạt mức tối đa ở thời điểm 96 giờ, hàm lượng KTĐD tăng đạt mức cao nhất sau 168 giờ nuôi cấy là khoảng 160 µg/ml rồi giảm dần (Hình 44-B). Theo kết quả này, lượng kháng thể thu được từ môi trường nuôi có bổ
68
sung 10 % FBS cao hơn so với trong môi trường 5 % FBS. Do đó, chúng tôi chọn sử dụng môi trường bổ sung 10 % FBS với thời điểm thu kháng thể là ở thời điểm 168 giờ.
Như vậy, đối với dòng tế bào lai 4H5 nuôi cấy trong hệ thống Wave bioreactor,
các thông số xác định được là : mật độ cấy 5 x 105 tế bào/ml, môi trường RPMI 1640 bổ
sung 10% FBS và thu nhận kháng thể sau 168 giờ.
So sánh giữa nuôi cấy tĩnh và nuôi trong bioreactor, kết quả cho thấy nồng độ KTĐD đạt được trong nuôi cấy động cao gấp hai lần. Tính về hiệu quả kinh tế thì đầu tư ban đầu cho hệ thống bioreactor cao, nhưng nếu tính cho từng mẻ sản xuất thì nuôi cấy bioreactor có lợi hơn. Mặt khác, KTĐD sản xuất cũng đồng nhất hơn.