- Mô phđn sinh chồị Củ
138 KỸ THUẬT RFLP TRONG NGHIÍN cúu DI TRUYỀN
băn đồ, trong đd cả gen thông thường lẫn câc chi thị RFLP đíu có hiện tượng phđn lỵ 13ầng câch xâc định những chỉ thị của RFLP cùng phân ly như câc tính trạ n g thông t hường ta có th ể định vị được câc gen đó trín bản đồ.
7.7. ỨNG DỤNG CỦA KỸ THUẬT LP TR()N(; c HỌN (;iỐN{; THựC VẬT
Việc lập bản đò bằng phương phâp RFLP rât bổ ích cho câc nghiín cứu về tiến hoâ vă hệ thống học. Tuy nhiín, băn thđn bản đò RFLP không thể được âp dụng trực tiếp văo chọn giống cđy trồng. Nd chỉ có th ể được sử dụng cùng với việc phđn tích câc gen thông thường, tức lă phương phâp sử dụng chọn lọc giân tiếp. Chảng hạn, khi ta căn chọn lọc m ột gen năo đó bằng phương phâp thông thường, nhưng việc chọn lọc trực tiếp tỏ ra tốn kĩm, khd khân, tốn thời gian, thỉ ta chọn lọc giân tiếp đối v^ới nhiều gen khâc, trong
đó có gen căn nghiín cứu, liín kết chặt chẽ với nhau mă chúng có th ể phât hiện qua phương phâp RFLP. Nếu sự liín kết đó lă chật chẽ thi chúng vẫn tồn tại cùng nhau quâ trình phđn ly NST. Diều năy cho phĩp ta tin răng gen nghiín cứu sẽ cd m ặt, bởi vì ít khi câc gen đê tâi tổ hợp lại bị tâch rạ Ví dụ, nếu gen ta nghiín cứu nằm kẹp giữa hai gen được tìm ra băng phương phâp thông thường niă khoảng câch giữa chúng đều lă 10 cM, thì cd thế tin với xâc suất 99% rằng câc gen đd luôn liín kết vdi nhau,
• Trong một sô trường hợp, phương phâp chọn lọc giân tiếp lại có ưu điểm hơn phương phâp chọn lọc trực tiếp. Dó lă trường hợp chọn lọc đổi với gen lặn. Chẳng hạn, khi căn chuyển một gen lặn tù giống cđy năy sang giống cđy khâc bằng con đường lai trở lại, thì thông thường người ta phải phđn tích câc hậu thí qua nhiều bước; trong đó có khđu cho câc cđy lai tự thụ phấn để nhận được những câ thể đồng hợp từ lận. Trong khi đd, nếu dùng phương phâp chọn lọc giân tiếp băng RFLP đối với gen lận, thì người ta chọn lọc giân tiếp câc gen liín kết RFLP, không cần phđn tích th ế hệ laị Việc năy cd th ể tiến hănh ngay ở giai đoạn rấ t sớm của cđy lai - vì ta chỉ cđn một lượng ADN n h ất định lă đủ, nín khổng căn nhiều đến nguyín liệu thực vật. Mật khâc, sau khi xâc định xong sớm như vậy, những cđy không đạt yíu cđu sẽ bị loại bò, nín tiết kiệm được đất đai vă giâ thănh.
• Một ưu điểm khâc của phương phâp chọn lọc giân tiếp lă, khi ta cần chọn lọc m ột tính trạ n g năo đđ do nhiều gen kiểm soât mă mỗi gen trong đó đều gđy ra những hiệu quă kiểu hlnh giống nhau; ví dụ, việc chọn lọc tính trạng chống Bđu bệnh. Tính trạ n g năy do nhiều gen kiểm soât vă mỗi gen ấy đều gđy ra hiệu quả kiểu hinh gióng nhaụ Thông thường, ở mỗi th ế hệ người ta phải tiến hănh phân tích, nhưng việc lăm đó đối với tính trạ n g do nhiều gen kiểm soât thì không dễ dăng gì vă rẵt chậm chạp. Tuy nhiín, nếu như câc gen đd liín kết với nhau trong phương phâp RFLP thì có th ể dễ dăng theo dõi một số trong câc gen đd bằng việc laị Từng cđy năo đó sẽ được kiểm tra xem cd m ang 1; 2; 3 ... hay nhiều hơn câc gen chống chịu đó không, mă không căn cần phđn tích câc th ế hệ laị
• Đối với câc tính trạ n g số lượng : nói chung, nhiều tính trạng nông học quan trọng ở cđy tròng đều do nhiều gen nằm rải râc trín nhiều NST kiểm soât. Mỗi gen đổ gđy ra những ảnh hưởng đm tính hoặc dương tính đến tính trạng mă ta cần nghiín cứụ Sự biểu hiện trội rõ răng không được th ể hiện vă kiểu hinh bị sự chi phối của ngoại cảnh. Diều đó căng khd khân cho việc phđn tích câc tính trạn g số lượng. Phương phâp phđn tích đơn gen theo kiểu Mendel không th ể được âp dụng trong trường hợp năy, m ă thông thường