Tất cả các vector pGEX đều cĩ đặc điểm chung là cĩ chứa tac promotor
(Ptac) điều khiển sự biểu hiện vượt mức của gen nằm ở hạ lưu theo cơ chế kiểm
sốt âm được cảm ứng bằng IPTG (Isopropyl-β-D-thiogalactoside) hoặc các chất
tương đồng về cấu trúc. Họ vector pGEX cĩ gồm tất cả 13 vector tương tự như vector pGEX-2TK (Hình 1.8).
Hình 1.8. Sơ đồ hệ thống vector biểu hiện pGEX 2TK.
Trong họ vector pGEX, cĩ 9 vector cĩ vùng MCS rộng, chứa đến 6 vị trí cắt giới hạn của các enzyme, giúp dễ dàng trong việc dịng hĩa. Vector pGEX- 2TK cĩ vị trí MCS rất khác biệt so với các vector khác trong họ vector pGEX, được thiết kế cho phép phát hiện các protein đã biểu hiện bằng cách đánh dấu
trực tiếp in vitro. Vùng MCS này nằm về phía hạ lưu của trình tự nhận biết của
Luận án Tiến sĩ Tổng quan
GST (Glutathione S-Transferase) là họ enzyme cĩ thể chuyển nhĩm S của glutathione vào những cơ chất như nitro và các hợp chất của halogen, làm cho chúng bị khử độc tính [50]. Hệ thống pGEX biểu hiện protein tái tổ hợp dung hợp với GST. Trung tâm cơ chất của GST cĩ ái lực cao đối với glutathione. Đặc tính này giúp việc thu nhận dễ dàng protein tái tổ hợp ở dạng dung hợp với GST. GST cịn cĩ vai trị trong sự phát hiện protein dung hợp với GST bằng phương pháp so màu dựa vào hoạt tính của GST trên cơ chất tạo sản phẩm cĩ màu như CDNB (1-chloro-2-dinitrobenzene) hoặc bằng phương pháp miễn dịch dựa trên kháng thể đặc hiệu của GST. Hệ thống gen dung hợp GST đã được ứng dụng thành cơng trong nhiều lĩnh vực như trong miễn dịch học phân tử [9], trong sản xuất vắc xin (đối với các protein cĩ kích thước phân tử nhỏ khi dung hợp với GST thành kích thước lớn hơn làm tăng tính kháng nguyên), trong nghiên cứu tương tác protein-protein, hoặc tương tác protein-DNA [26], [33].