P.digitatum và p .italicum trên môi trường PDA
4.8. Đánh giá khả năng phòng, trừ bệnh mốc lục của một số chất trên cam
SỐ CHẤT TRÊN CAM QUÝT
Mục đích của việc đánh giá khả năng phòng và trừ bệnh mốc lục là để xác định thời điểm xử lý quả có hiệu quả nhất. Xử lý quả khi nào là thích hợp: trước khi bệnh xuất hiện hay xử lý khi bệnh còn chưa xuất hiện là câu hỏi cần được giải đáp trong thí nghiệm này.
Để đánh giá khả năng trừ bệnh của các chất đã làm thí nghiệm in vitro trong các phần trước của báo cáo ta tiến hành như sau: Chọn cam có độ chín, kích thước đồng đều từ các nhà vườn. Làm sạch quả bằng nước sạch sau đó nhúng qua cồn 70o trong 30s, làm khơ trong điều kiện phịng. Tiến hành lây nhiễm nhân tạo như hướng dẫn trên phần phương pháp nghiên cứu. Sau khi lây nhiễm nhân tạo nhúng quả trong các dung dịch các chất saponin 2 mg/ml trong 10 phút, chitosan 2 %, EDTA 0,04 M, NaHCO3 3 % trong 2 phút, để khô rồi cho vào trong các túi nilon bảo quản ở ẩm độ 90 %. Đối chứng cam được xử lý bằng nước cất.Theo dõi sự phát sinh bệnh sau mỗi ngày. Kết quả được thể hiện ở các bảng 4.16.
Khả năng phòng bệnh cam được xử lý ngược lại: tạo vết thương cơ học, nhúng trong các dung dịch thí nghiệm sau đó cam được để khơ trong vòng 3h ở nhiệt độ phòng rồi lây nhiễm nhân tạo. Kết quả được thể hiện ở bảng 4.15.
Bảng 4.15. Khả năng phòng bệnh mốc lục (P.digitatum) trên cam của một số hoạt chất sinh học và hóa học
Hoạt chất Thời gian ủ bệnh (ngày) Tỷ lệ bệnh (%) sau
1 ngày 2 ngày 3 ngày 4 ngày 5 ngày 6 ngày 7 ngày
Đối chứng 0 - 1 16,67a 58,33a 100a 100a 100a 100a 100a
NaHCO3 3 % 2 - 3 0,00b 16,67b 50,00b 66,67b 91,67a 100a 100a
EDTA 0,04 M 2 - 3 0,00b 8,33b 33,33c 58,33b 100a 100a 100a
Saponin 2 mg/ml 4 - 7 0,00b 0,00b 0,00d 8,33c 16,67b 16,67b 16,67b
Chitosan 2 % 7 0,00b 0,00b 0,00d 0,00c 0,00b 0,00b 0,00b
LSD 0,05 12,15 20,15 12,15 22,73 25,77 24,30 24,30
Qua kết quả trên ta thấy cam được phịng bệnh bằng chitosan 2 % khơng bị nhiễm bệnh sau thời gian 7 ngày lây nhiễm, đối với saponin là 4 - 7 ngày nhưng có sự sai khác với chitosan. EDTA và NaHCO3 tỷ lệ nhiễm bệnh là 100 % sau 7 ngày và thời gian tiềm dục là thấp chỉ 2 - 3 ngày đó là kết quả khơng có sự sai khác có ý nghĩa đối với cơng thức đối chứng. Sau 7 ngày tỷ lệ bệnh ở hai công thức saponin 2 mg/ml và chitosan 2 % là sai khác có ý nghĩa với hai cơng thức muối EDTA 0,04 M và NaHCO3 3 %. Từ đó có thể thấy chitosan và saponin có hiệu quả trong phịng bệnh mốc lục trên cam.
Bảng 4.16. Khả năng trừ bệnh mốc lục (P.digitatum) trên cam của một số hoạt chất sinh học và hóa học
Hoạt chất Thời gian ủ bệnh (ngày) Tỷ lệ bệnh (%) sau 1 ngày 2 ngày 3 ngày 4 ngày 5 ngày 6 ngày 7 ngày
Đối chứng 0 41,67a 66,67a 100a 100a 100a 100a 100a
NaHCO3 3 % 2 - 3 0,00b 0,00b 25,00b 50,00b 66,67b 100a 100a
EDTA 0,04 M 2 0,00b 0,00b 25,00b 50,00b 75,00a 100a 100a
Saponin 2 mg/ml 2 - 7 0,00b 0,00b 0,00c 0,00c 8,33c 16,67b 16,67b Chitosan 2 % 4 - 7 0,00b 0,00b 0,00c 0,00c 8,33c 16,67b 16,67b
LSD 0,05 12.15 12.15 21.04 21.04 29.14 36.45 35.43
Đối với thí nghiệm trừ bệnh kết quả tương tự kết quả phòng bệnh tuy nhiên tỷ lệ bệnh ở các ngày trong thí nghiệm trừ bệnh hầu hết đều cao hơn ở thí nghiệm phịng bệnh. Thời gian ủ bệnh ở công thức saponin giao động lớn từ 2 - 7 ngày trong khi chitosan là 4 - 7 ngày, ở công thức NaHCO3, EDTA chỉ có thể kìm hãm bệnh mốc lục sau 2 - 3 ngày và 2 ngày. Sau 6 ngày tỷ lệ bệnh lên đến 100 %
vết bệnh được theo dõi. Sau 7 ngày tỷ lệ bệnh của saponin và chitosan đều là 16,67 %. Kết quả trên cho thấy chitosan 2 % và saponin 2 mg/ml có khả năng trừ bệnh mộc lục trên cam.
Kết quả trên tương đồng với các nghiên cứu của L. Cerioni et al. (2012) cho thấy khi cam quýt lây nhiễm nhân tạo với nấm mốc lục P.digitatum được xử lý bằng NaHCO3 2 % tỷ lệ bệnh lên đến 43.33 %, 81.67 % sau 3h và 6h.
Nghiên cứu của Weining Hao et al. (2010) cho thấy tea saponin (TS) khi
kết hợp với chủng Bacillus amyloliquefaciens HF - 01 được sử dụng để đánh giá khả năng kiểm sốt Penicillium digitatum. Thí nghiệm được bố trí HF - 01 kết hợp với 50 μg mL−1 TS có khả năng kiểm sốt được trên 90 % mốc xanh, mốc lục và thối chua.
Một nghiên cứu của M. Musto et al. (2014) cho thấy chiết suất lá cây Solanum nigrum có chứa các thành phần như alkaloids, tannins, flavonoids,
saponins,… Chiết suất này có tác dụng ức chế chống lại Penicillium digitatum
trên đĩa thạch petri. Đồng thời chiết suất này cũng có tác dụng phịng nấm gây thối khi bảo quản chanh có lây nhiễm nhân tạo trong 7 ngày ức chế 100 %, đến ngày thứ 14 và 21 hoạt động này giảm khả năng ức chế chỉ còn tương ứng là 85,71 % và 57,14 %. Tác dụng trừ nấm chỉ đạt 14,29 % sau 7 ngày bảo quản.
Qua kết quả của 2 thí nghiệm trên ta nhận thấy việc áp dụng biện pháp xử lý quả trước khi bệnh xuất hiện có hiệu quả hơn so với việc áp dụng sau khi bệnh đã xuất hiện và gây ra triệu chứng. Thời gian tiềm dục của các chất được kéo dài hơn, tỷ lệ bệnh của chitosan 2 % đạt ở mức 0 % so với đối chứng.
Dưới đây là một số hình ảnh về thí nghiệm trên:
Hình 4.15. Hình ảnh cam sau 7 ngày thí nghiệm
Hình 4.16. Hình ảnh bưởi bị nhiễm bệnh ở các công thức sau 28 ngày theo dõi