C 77 H34 H34 H195 H195 A15 A15 A16 A16 A41 A41 D A56 A56 B186 B186 B208 B208 16 16 17 17 18
3.2. Đánh giá khả năng kháng virus của các dịng khoai tây nhị bội thơng qua chỉ thị
phân tử
Hình 1: Hình ảnh test ELISA 8 dịng khoai tây nhị bội A. Kiểm tra trước khi lây nhiễm; B. Kiểm tra sau khi lây nhiễm virus PVY
A B
Hình 2: Hình ảnh các dịng khoai tây nhị bội trong thí nghiệm lây nhiễm nhân tạo virus PVY
9
Trong genom khoai tây người ta đã phát hiện cĩ một số loại gen cĩ khả năng kháng lại bệnh virus Y, đĩ là lồi S.stolonierum cĩ chứa gen Rysto , Rystona, Rystorns; lồi
S.tuberosum spp.Andigena cĩ chứa Ryadg; lồi S.demisum cĩ chứa gen Nydms; lồi
S.hougasi cĩ chứa gen Ryhou ... Trong các gen kháng PVY, gen Rysto là một gen cĩ nguồn gốc từ lồi S.stolonierum cho khả năng kháng rất cao đối với tất cả các chủng PVY. Hơn nữa hơng chỉ kháng PVY mà gen Rystocịn cho phép các dịng, giống khoai tây chứa nĩ kháng được một số loại virus khác nữa như PVA, PVV. Vì vậy gen này được các nhà nghiên cứu đặc biệt quan tâm.
Ye-Su Song và cộng sự (2005) [7] đã sử dụng 12 mồi AFLP và phân tích trên 106 mẫu giống khoai tây cĩ nguồn gốc từĐức, Hà Lan, Ba Lan để định vị gen Pysto và kết luận locus của gen Rysto nằm ở trên nhiễm sắc thể XII và được phát hiện bởi mồi SSR STM0003 – 111. Mồi STM 003 - 111 nhân đoạn ADN cĩ kích thước 111bp cùng nằm trên NST XII và liên kết rất chặt với gen Rysto.
Gen Nb là một gen trội cho phép khoai tây cĩ khả năng kháng cao với các chủng PVX thuộc nhĩm 1 (chủng PVX ROTH1), nhĩm 2 (chủng PVY CP2). Marano và cộng sự (2002) [4] đã xác định được vị trí của gen Nb nằm ở vị trí 0.76 cM trên NST số V, giữa 2 marker AFLP GM339, GM637. Marker GM339 nhân đoạn ADN cĩ kích thước 330bp liên kết rất chặt với gen Nb.
Từ những kết quả thu thập ở trên chúng tơi đã sử dụng mồi GM3339 để phát hiện ra gen kháng virus PVX, mồi STM0003-111 để phát hiện ra gen kháng PVY và một số
mồi SSR khác để phân tích sựđa hình của các dịng khoai tây nhị bội phục vụ cho cơng tác chọn tạo giống.