C B186 (E1) D H1929/34 (E4)
A- Tách protoplast; B Dung hợp protoplast bằng xung điện; C Các protoplast kết hợp với nhau nhờ luồng xung điện; D Sự phân chia tạo microcallus của các tổ hợp lai trên mơi trường VKM
lỏng; E- Các macrocalli hình thành sau 3 tuần nuơi cấy trên mơi trường Cul-medium tạo callus; F- Các callus hình thành trên mơi trường Cul-medium trước khi chuyển sang mơi trường tái sinh chồi; H- Macrocallus tái sinh chồi
PHẦN IV. KẾT LUẬN
Đã hồn thiện được các thơng số của quy trình dung hợp xung điện để đạt được hiệu quả dung hợp cao nhất. Các thơng số dung hợp như sau:
- Dung dịch dung hợp chứa 0,4M Manitol và 10-3M CaCl2
- Mật độ tế bào dung hợp dao động từ 2x 105 tế bào/ml đến 3x 105 tế bào/ml cho tỷ lệ con lai tứ bội cao, trong đĩ mật độ thích hợp nhất là 3x 105 tế bào/ml tỷ lệ con lai tứ bội đạt 45,65%.
- Dung hợp ở tần số AC= 800kHz, DC puls = 150 Vcm-1 trong 10-15 giây, số lần xung là 2, khoảng cách giữa các lần xung là 2 giây.
Đã tạo được 12 tổ hợp lai từ 8 dịng khoai tây nhị bội. Các tổ hợp lai này đã được nuơi cấy và tái sinh tạo chồi, các chồi này sẽ được sử dụng cho các thí nghiệm phân tích và đánh giá con lai soma.
Khả năng tạo macrocallus của các tổ hợp là khác nhau (29,7-78,9 macrocallus/đĩa nuơi cấy), tỷ lệ tái sinh chồi từ macrocallus của các tổ hợp dịng khoai tây dao động từ 0- 29,17 % phụ thuộc vào các tổ hợp dung hợp.
Thủ trưởng đơn vị Chủ nhiệm đề tài
TÀI LIỆU THAM KHẢO
1. Burgess J., & Fleming E.N., 1974. Ultrastructural observations of cell wall regenerated around isolated tobacco protoplasts. J. Cell Sci. 14: 439-449. around isolated tobacco protoplasts. J. Cell Sci. 14: 439-449.
2. Carlon P.S, Smith H.H.,Dearing R.D, 1972. Parasexual interspecific plant hybridization. Proc. Nat. Acad. Sci (Wash) 69: 2292-2294. Proc. Nat. Acad. Sci (Wash) 69: 2292-2294.
3. Chaput MH, Sihachakr D., Ducreux G., Marie D.,Barghi N., 1990. Somatic hybrid plants produced by electrofusion between dihaploid potatoes: BF15 (H1), Aminca (H6) produced by electrofusion between dihaploid potatoes: BF15 (H1), Aminca (H6) andCardinal (H3). Plant Cell Rep. 9: 411–414.