... Dương
Đề tài:
Đề tài:
ỨngdụngkỹthuậtPCR và lây nhiễm nhân tạoỨngdụngkỹthuậtPCR và lây nhiễm nhân tạo
kiểm chứng gen kháng bệnh bạc lá ở các dòng đẳng gen”
kiểm chứng gen kháng bệnh bạc ... 94ºC trong
4 phút, 34 chu kỳ: 94ºC trong 1 phút, 55ºC trong 1 phút, 72º trong
1 phút 50 giây, và 72 º C trong 7 phút. Sau đó, sản phẩm PCR
được cắt bằng enzyme DraI. Trong 15μl phản ứng gồm ... Dương
+ PCR của gen Xa4 và Xa 7 và Xa21 được thực hiện theo chu kì
nhiệt: 94ºC trong 4 phút, 30 chu kỳ, 94ºC trong 1 phút, 56ºC trong
1 phút, 72º trong 2 phút, và 72 º C trong 8 phút.
+ PCR của...
... các kỹthuật có độ nhạy
bằng các kỹthuật có độ nhạy
và độ đặc hiệu cao sẽ có ý nghĩa rất quan trọngtrong việc lựa chọn
và độ đặc hiệu cao sẽ có ý nghĩa rất quan trọngtrong việc lựa chọn ... được sử dụng để xác định
Có nhiều phương pháp được sử dụng để xác định
E.coli
E.coli
gây tiêu
gây tiêu
chảy. Trong đó, PCR là phương pháp được sử dụng hữu hiệu nhất.
chảy. Trong đó, PCR là ... dụng hữu hiệu nhất.
Xuất phát từ những lí do trên, chúng tôi tiến hành thực hiện đề tài
Xuất phát từ những lí do trên, chúng tôi tiến hành thực hiện đề tài
“
“
Ứng dụngkỹthuậtPCR trong...
... mẫu đối chứng vào
mỗi phản ứng trộn đều.
− Thực hiện phản ứng RT -PCR
Sau khi phn ng kt thỳc thờm 15àl hn hợp thứ 2 vào ống chứa sản
phẩm phản ứng RT -PCR.
− Th
ực hiện phản ứngPCR thứ 2. ...
2.7 Ứngdụng của kỹthuậtPCRtrong thủy sản
Theo Trần Thị Tuyết Hoa (2004) thì ứngdụng của PCR là:
Phát hiện nhanh tác nhân gây bệnh ở dạng tiềm ẩn giúp cho quá trình chọn lọc
cá thể thủy ... bằng kỹthuật này. Hiện nay
PCR được ứngdụng rộng rãi trong nhiều lĩnh vực nghiên cứu để phát hiện và
tạo ra đột biến gen, chẩn đoán phát hiện mầm bệnh. Theo Khuất Hữu Thanh,
(2003) thì PCR...
... trắng 12
2.4. KỹthuậtPCR và các yếu tố ảnh hưởng đến phản ứngPCR 14
2.4.1 Nguyên tắc phản ứngPCR 14
2.4. 2 Các yếu tố ảnh hưởng đến phản ứngPCR 15
2.4.3 Ứngdụng của PCR 16
PDF created ... đến phản ứngPCR
ADN mạch khuôn: Theo Khuất Hữu Thanh (2003), trongkỹthuậtPCR khuôn
ADN có vai trò rất quan trọng, nó ảnh hưởng rõ rệt đến hiệu quả của phản ứng
PCR. Phản ứngPCR tối ưu ... phản ứng
PCR bước 1: 94
0
C trong 2 phút, 94
0
C trong 20 giây, 62
0
C trong 20 giây, 72
0
C
trong 30 giây. Lặp lại chu kỳ trên 15 lần. Sau đó, ở 72
0
C trong 30 giây, 20
0
C
trong 30 giây.
PCR...
... 150)
Tên chủng PCR (+) %
EAEC
2 1,3
EHEC 0 0
EIEC 0 0
EPEC 0 0
ETEC 0 0
Tổng cộng 2 1,3
IV. Bàn luận
Về độ nhạy của phản ứngPCR đa mồi: kết
quả độ nhạy của phản ứngPCR đa mồi của ... có một số kết
luận sau:
1. Độ nhạy của phản ứngPCR đa mồi (8 cặp) với
các chủng chuẩn là 100%.
2. Độ đặc hiệu của phản ứngPCR 8 cặp mồi đà chọn
với các vi khuẩn Citrobacter freundii, Salmonella ... thời gian. Bởi vậy, việc nghiên cứu áp
dụng một kỹthuật phù hợp với nhiều cặp mồi,
nhằm phát hiện nhiều loại E. coli gây tiêu chảy
trong một phản ứng là hết sức cần thiết và có ý
nghĩa thiết...
... bằng kỹthụât sinh học
phân tử mà kỹthuật huyết thanh học không
phát hiện đợc.
Các áp dụng chính trong việc định nhóm
HLA bằng kỹthuật PCR- SSP: đối với kỹthuật
PCR- SSP chúng tôi đà ứngdụng ... dụngkỹ
thuật PCR vì lý do giàu pseudogenes cùng
khuyếch đại trong vùng của lớp I.
2.3. Kỹthuật PCR- SSP: ngày nay trong
nhiều phòng thí nghiệm hoà hợp mô trên thế
giới ngời ta sử dụngkỹ ... với tình hình thực tế ở Việt Nam
Kỹ thuật PCR- SSP là kỹthuật sử dụng
những mồi đợc khuyếch đại từ phía đầu tận
3. Phản ứng chỉ bao gồm 2 giai đoạn chính là
PCR và điện di trên gen agarose...
...
Sử dụngkỹthuậtPCR đa mồi trong chẩn
đoán E. coli gây tiêu chảy giúp tránh lây
nhiễm, tiết kiệm thời gian, nguyên vật liệu gấp
5 lần so với dùngPCR đơn mồi.
Kỹ thuậtPCR đa mồi đà đợc ứng ... khi giảm số lần tiến hành các
phản ứngPCR chúng ta sẽ làm giảm sự nhiễm
của phản ứng này. Một vấn đề đáng lo ngại của
kỹ thuật PCR.
Khi tiến hành kỹthuậtPCR đa mồi trên các
bệnh phẩm phân ...
1. Phát triển kỹthuậtPCR đa mồi.
Chúng tôi đà phối hợp thành công 8 cặp mồi
trong một phản ứng để chẩn đoán cùng một lúc
5 loại E. coli gây tiêu chảy trong phân.
PCR đơn mồi PCR đa mồi
1....
... mẫu đối chứng vào mỗi phản ứng
trộn đều.
− Thực hiện phản ứngPCR bước 1
− Sau khi phản ứng kết thúc thêm 15àl hn hp th 2 vo ng cha sn
phm phản ứngPCR b
ước 1
− Thực hiện phản ứngPCR thứ ... kiện phản ứng:
Phản ứng RT -PCR:
42
0
C trong 30 giây
94
0
C trong 2 phút
Sau đó
94
0
C trong 20 giây
62
0
C trong 20 giây
72
0
C trong 30 giây
Lặp lại chu kỳ trên 15 lần
72
0
C trong 30 ... Một số nghiên cứu liên quan đến phương pháp (PCR) phát
hiện WSSV 20
2.5 Phương pháp PCR 22
2.6 Phương pháp RT -PCR 24
2.7 Ứngdụng của kĩ thuậtPCRtrong thủy sản 25
CHƯƠNG III: PHƯƠNG PHÁP...
... trắng 12
2.4. KỹthuậtPCR và các yếu tố ảnh hưởng đến phản ứngPCR 14
2.4.1 Nguyên tắc phản ứngPCR 14
2.4. 2 Các yếu tố ảnh hưởng đến phản ứngPCR 15
2.4.3 Ứngdụng của PCR 16
PDF created ... đến phản ứngPCR
ADN mạch khuôn: Theo Khuất Hữu Thanh (2003), trongkỹthuậtPCR khuôn
ADN có vai trò rất quan trọng, nó ảnh hưởng rõ rệt đến hiệu quả của phản ứng
PCR. Phản ứngPCR tối ưu ... phản ứng
PCR bước 1: 94
0
C trong 2 phút, 94
0
C trong 20 giây, 62
0
C trong 20 giây, 72
0
C
trong 30 giây. Lặp lại chu kỳ trên 15 lần. Sau đó, ở 72
0
C trong 30 giây, 20
0
C
trong 30 giây.
PCR...
... Blume-Amaranthaceae) có thời gian sinh trởng dài và
củ ít xơ.
ã Sử dụngkỹthuật phân tử trong nghiên cứu đa dạng và ứngdụngtrongtạo
giống: Sử dụngkỹthuật phân tử để nghiên cứu khoảng cách di truyền nhằm ... nghiên cứu trong và ngoài nớc 10
1.1. Nhân nhanh in vitro 10
1.2. Tạogiống bằng công nghệ tế bào thực vật 11
1.3. ứngdụng chỉ thị phân tử trong nghiên cứu chọntạogiốngcâytrồng mới 12 ... thời gian tạo
giống rút ngắn xuống từ 2 - 3 năm.
Xuất phát từ cơ sở trên, đề tài: Nghiên cứu sử dụng công nghệ tế bào thực vật và
kỹ thuật chỉ thị phân tử phục vụ chọntạogiốngcâytrồng giai...
... chuyển gen bằng Agrobacterium.
3. Câytrồng biến đổi gen:
3.1 Khái niệm câytrồng biến đổi gen:
Cây trồng biến đổi gen là câytrồng mới được được áp dụngkỹthuật di truyền hiện
đại để làm biến ... TP.HCM
KHOA CÔNG NGHỆ SINH HỌC & KỸTHUẬT MÔI TRƯỜNG
BỘ MÔN CÔNG NGHỆ SINH HỌC THỰC VẬT
Đề tài: ỨNGDỤNG CỦA GENOMICS VÀ KỸ
THUẬT CHUYỂN NẠP GEN TRONG CẢI
TIẾN GIỐNGCÂY TRỒNG
GVHD: ThS. Phạm Văn ... đến 2010, câytrồng công
nghệ sinh học là công nghệ câytrồng được áp dụng nhanh nhất trong lịch sử của nông
nghiệp hiện đại.
Trong năm 2010, các nước đã phát triển các loại câytrồng biến...
...
2.3.2.6 Các vấn đề thƣờng gặp trongPCR và phƣơng pháp khắc phục 16
2.3.2.7 Ứngdụng của PCR 18
2.4 Giới thiệu về kỹthuật RFLP và kỹthuậtPCR – RFLP 18
2.4.1 Kỹthuật RFLP ( restricton fragment ... tôi tiến hành đề tài “ Ứngdụngkỹthuật
PCR - RFLP xác định các kiểu gen thụ thể prolactin trên giống heo Yorkshire”
1.2 Mục đích - yêu cầu
1.2.1 Mục đích
Ứng dụngPCR để phát hiện sự hiện ... dùngtrongchọngiống và xác định các yếu tố gây bệnh trên cây
trồng. Dùng chuẩn đoán bệnh trong công tác chăn nuôi, chọn giống. Dùng phát hiện ra
các gen dự tuyển về năng suất sinh sản trong...
... bệnh nhân tạo virus, trên cây chỉ thị tạo ra vết
bệnh điển hình nhất. Có thể lây bệnh nhân tạo bằng dịch cây muốn chẩn đoán lên cây
chỉ thị, hoặc ghép cành, ghép mắt cây chỉ thị lên cây bệnh. ...
96
o
C trong 1 phút
96
o
C trong 10 giây
50
o
C trong 5giây 25 chu kỳ
60
o
C trong 4 phút
24
Chu kỳ nhiệt của phản ứng tổng hợp cDNA
25
o
C trong 5 phút
42
o
C trong 30 phút
85
o
C trong ... các phƣơng pháp khác nhƣ Northern blot.
Một kỹthuật mới phát triển - kỹthuật in situ RT -PCR cho phép khuếch đại các
RNA ngay trên mô và tế bào. Kỹthuật này có nguyên tắc nhƣ trên, đƣợc tiến...
... phản ứngPCR
Là phản ứng nhân nhanh số lƣợng mẫu DNA nhờ thực hiện cơ chế tự nhân đôi
DNA invitro. Quá trình này đƣợc tiến hành nhờ enzyme DNA polymerase.
Nguyên tắc phản ứngPCR
Phản ứngPCR ... kỳ nhiệt độ của phản ứng
PCR thì pH có thể thay đổi từ 6,8 – 7,8.
2.4.2.8 Các vấn đề thƣờng gặp trongPCR và phƣơng pháp khắc phục
Trong quá trình thực hiện phản ứngPCR chúng ta thƣờng gặp ... gen PRLR, Vincent và cộng sự đã dùngkỹthuậtPCR –
RFLP (polymerase chain reaction – restriction fragment length polymorphism). Trƣớc
ông dùngkỹthuậtPCR để phân lập một đoạn DNA của gen...