Nghiên cứu thiết lập quy trình sản xuất chế phẩm probiotic giàu carotenoprotein từ phế liệu tôm

ĐẠI HỌC HUẾ TRƢỜNG ĐẠI HỌC NÔNG LÂM LÊ THỊ THANH NGHIÊN CỨU THIẾT LẬP QUY TRÌNH SẢN XUẤT CHẾ PHẨM PROBIOTIC GIÀU CAROTENOPROTEIN TỪ PHẾ LIỆU TÔM LUẬN VĂN THẠC SĨ CHẾ BIẾN LƢƠNG THỰC, THỰC PHẨM VÀ ĐỒ UỐNG Chuyên ngành: Công nghệ thực phẩm HUẾ - 2018 ĐẠI HỌC HUẾ TRƢỜNG ĐẠI HỌC NÔNG LÂM LÊ THỊ THANH NGHIÊN CỨU THIẾT LẬP QUY TRÌNH SẢN XUẤT CHẾ PHẨM PROBIOTIC GIÀU CAROTENOPROTEIN TỪ PHẾ LIỆU TÔM LUẬN VĂN THẠC SĨ CHẾ BIẾN LƢƠNG THỰC, THỰC PHẨM VÀ ĐỒ UỐNG Chuyên ngành: Công nghệ thực phẩm Mã số: 8540101 NGƢỜI HƢỚNG DẪN KHOA HỌC PGS.TS ĐỖ THỊ BÍCH THỦY HUẾ - 2018 i LỜI CAM ĐOAN Tôi xin cam đoan: Đây cơng trình nghiên cứu riêng tơi dƣới hƣớng dẫn khoa học PGS.TS Đỗ Thị Bích Thủy Các số liệu kết trình bày luận văn trung thực, phần đƣợc cơng bố tạp chí khoa học chun ngành với đồng ý cho phép đồng tác giả Phần cịn lại chƣa đƣợc cơng bố cơng trình khác Tác giả luận văn Lê Thị Thanh ii LỜI CẢM ƠN Trong suốt trình học tập, nghiên cứu hồn thành luận văn nỗ lực đam mê thân, nhận đƣợc nhiều giúp đỡ, động viên q thầy cơ, gia đình bạn bè Lời tơi xin bày tỏ lịng cảm ơn sâu sắc tới PGS.TS Đỗ Thị Bích Thủy định hƣớng nghiên cứu tận tình hƣớng dẫn tơi q trình học tập thực luận văn Tơi xin cảm ơn Phòng Đào tạo, Ban Giám hiệu trƣờng Đại học Nông Lâm Huế tạo điều kiện thuận lợi giúp đỡ tơi hồn thành thủ tục cần thiết q trình làm nghiên cứu Tơi xin gửi lời cảm ơn chân thành tới Ban Chủ nhiệm Khoa, thầy giáo khoa Cơ khí - Công nghệ, trƣờng Đại học Nông Lâm Huế quan tâm, giúp đỡ, tạo điều kiện thuận lợi suốt thời gian học trƣờng thực đề tài luận văn Cuối xin cảm ơn ngƣời thân gia đình bạn bè ln bên để động viên, khích lệ, tạo điều kiện giúp đỡ suốt thời gian học tập nghiên cứu vừa qua Tôi xin chân thành cảm ơn! Tác giả luận văn Lê Thị Thanh iii TĨM TẮT Nghiên cứu số thơng số cơng nghệ thích hợp để thủy phân lên men phế liệu tôm chủng B subtilis C10 L fermentum TC10 đề xuất quy trình sản xuất chế phẩm probiotic giàu carotenprotein từ PLT Kết đề tài làm tiền đề cho nghiên cứu xử lý PLT kết hợp hai chế phẩm vi sinh nhằm tạo chế phẩm probitic giàu carotenoprotein có khả ứng dụng chăn nuôi Các phƣơng pháp đƣợc sử dụng để phân tích tiêu q trình nghiên cứu thực nội dung đề tài: phƣơng pháp tăng sinh nuôi cấy để thu nhận sinh khối tế bào, xác định số tế bào sống phƣơng pháp đếm khuẩn lạc đĩa thạch, xác định hoạt độ protease phƣơng pháp Ason cải tiến, xác định hàm lƣợng protein tổng số phƣơng pháp Kjeldahl, xác định hàm lƣợng nitơ formol phƣơng pháp sorensen, xác định hoạt tính kháng oxy hóa phƣơng pháp DPPH, xác định hàm lƣợng astaxanthin phế liệu tôm xác định độ ẩm phƣơng pháp sấy đến khối lƣợng không đổi Các thơng số cơng nghệ thích hợp để xử lý PLT quy trình sản xuất chế phẩm probiotic giàu carotenprotein: tỷ lệ B subtilis C10 L fermentum TC10 gieo cấy ban đầu vào PLT 1:2 Nhiệt độ lên men 35oC thời gian lên men 24 Sau xác định đƣợc thông số để xử lý PLT, tiếp tục khảo sát tỷ lệ phối trộn dịch carotenoprotein thu đƣợc từ trình lên men vào chất mang bã sắn khơ, thực sấy chế phẩm nhiệt độ 35oC xác định đƣợc tỷ lệ phối trộn thích hợp 1:4 thơng qua tiêu mật độ tế bào sống (9,45 lg CFU/g), hoạt độ protease (28,74 UI/ml), hàm lƣợng astaxanthin (4,2 µg/g) độ ẩm (6,9%) đạt yêu cầu chế phẩm Xây dựng đƣợc quy trình sản xuất chế phẩm probiotic giàu carotenoprotein từ phế liệu tôm iv MỤC LỤC LỜI CAM ĐOAN .i LỜI CẢM ƠN ii TÓM TẮT iii MỤC LỤC iv DANH MỤC CÁC CHỮ VIẾT TẮT vii DANH MỤC BẢNG BIỂU viii DANH MỤC HÌNH ẢNH ix MỞ ĐẦU 1 Đặt vấn đề Mục tiêu đề tài .2 Ý nghĩa khoa học thực tiễn .2 CHƢƠNG TỔNG QUAN CÁC VẤN ĐỀ NGHIÊN CỨU 1.1 TỔNG QUAN VỀ PROBIOTIC 1.1.1 Khái niệm probiotic 1.1.2 Tác dụng probiotic 1.2 TỔNG QUAN VỀ VI KHUẨN LACTIC 1.2.1 Khái niệm vi khuẩn lactic 1.2.2 Ứng dụng vi khuẩn lactic 1.2.3 Lactobacillus fermentum .8 1.3 TỔNG QUAN VỀ VI KHUẨN BACILLUS 1.3.1 Giới thiệu Bacillus 1.3.2 Đặc điểm chung 10 1.3.3 Bacillus subtilis 10 1.4 PHẾ LIỆU TÔM .13 1.5 PHỨC HỢP CAROTENOPROTEIN VÀ ASTAXANTHIN 13 1.5.1 Nguồn gốc chất chế phẩm caroten-protein 13 1.5.2 Astaxanthin ứng dụng 14 v 1.6 TÌNH HÌNH NGHIÊN CỨU LIÊN QUAN ĐẾN ĐỀ TÀI 16 1.6.1 Trên giới 16 1.6.2 Ở Việt Nam 20 CHƢƠNG NỘI DUNG VÀ PHƢƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 24 2.1 PHẠM VI VÀ ĐỐI TƢỢNG NGHIÊN CỨU .24 2.1.1 Phạm vi nghiên cứu 24 2.1.2 Đối tƣợng nghiên cứu 24 2.2 NỘI DUNG NGHIÊN CỨU 24 2.3 PHƢƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 25 2.3.1 Phƣơng pháp vi sinh 25 2.3.2 Phƣơng pháp hóa sinh 26 2.3.3 Phƣơng pháp vật lý 28 2.3.4 Phƣơng pháp bố trí thí nghiệm để thực nội dung nghiên cứu .29 2.3.5 Phƣơng pháp xử lý số liệu 34 CHƢƠNG KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU VÀ THẢO LUẬN 36 3.1 THÀNH PHẦN HÓA HỌC CỦA PHẾ LIỆU TÔM .36 3.2 KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU ẢNH HƢỞNG CỦA TỶ LỆ GIỮA B subtilis C10 VÀ L fermentum TC10 GIEO CẤY BAN ĐẦU VÀO PHẾ LIỆU TÔM ĐẾN CHẤT LƢỢNG CỦA CHẾ PHẨM PROBIOTIC GIÀU CAROTENOPROTEIN 37 3.2.1 Ảnh hƣởng tỷ lệ B subtilis C10 L fermentum TC10 gieo cấy ban đầu vào PLT đến hoạt độ enzyme protease 37 3.2.2 Ảnh hƣởng tỷ lệ B subtilis C10 L fermentum TC10 gieo cấy ban đầu vào PLT đến mật độ tế bào sống 39 3.2.3 Ảnh hƣởng tỷ lệ B subtilis C10 L fermentum TC10 gieo cấy ban đầu vào PLT đến hoạt tính kháng oxy hóa 40 3.2.4 Ảnh hƣởng tỷ lệ B subtilis C10 L fermentum TC10 gieo cấy ban đầu vào PLT đến hàm lƣợng protein tách đƣợc so với ban đầu 41 3.2.5 Ảnh hƣởng tỷ lệ B subtilis C10 L fermentum TC10 gieo cấy ban đầu vào PLT đến hàm lƣợng nitơ formol .42 3.3 KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU ẢNH HƢỞNG CỦA NHIỆT ĐỘ LÊN MEN ĐẾN CHẤT LƢỢNG CỦA CHẾ PHẨM PROBIOTIC GIÀU CAROTENOPROTEIN .43 vi 3.3.1 Ảnh hƣởng nhiệt độ lên men đến hoạt độ protease 43 3.3.2 Ảnh hƣởng nhiệt độ lên men đến mật độ tế bào sống 44 3.3.3 Ảnh hƣởng nhiệt độ lên men đến hoạt tính kháng oxy hóa 45 3.3.4 Ảnh hƣởng nhiệt độ lên men đến hàm lƣợng protein tách đƣợc so với ban đầu 46 3.3.5 Ảnh hƣởng nhiệt độ lên men đến hàm lƣợng nitơ formol 47 3.4 KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU ẢNH HƢỞNG CỦA THỜI GIAN LÊN MEN ĐẾN CHẤT LƢỢNG CỦA CHẾ PHẨM PROBIOTIC GIÀU CAROTENOPROTEIN .48 3.4.1 Ảnh hƣởng thời gian lên men đến hoạt độ protease .49 3.4.2 Ảnh hƣởng thời gian lên men đến mật độ tế bào sống 50 3.4.3 Ảnh hƣởng thời gian lên men đến hoạt tính kháng oxy hóa 51 3.4.4 Ảnh hƣởng thời gian lên men đến hàm lƣợng protein tách đƣợc so với ban đầu 52 3.4.5 Ảnh hƣởng thời gian lên men đến hàm lƣợng nitơ formol 54 3.5 KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU ẢNH HƢỞNG CỦA TỶ LỆ PHỐI TRỘN DỊCH CAROTENOPROTEIN VÀO CHẤT MANG ĐẾN CHẤT LƢỢNG CỦA CHẾ PHẨM PROBIOTIC 55 3.5.1 Ảnh hƣởng tỷ lệ phối trộn dịch carotenoprotein vào chất mang đến mật độ tế bào sống 55 3.5.2 Ảnh hƣởng tỷ lệ phối trộn dịch carotenoprotein vào chất mang đến hoạt độ protease, hàm lƣợng astaxanthin độ ẩm chế phẩm 56 3.6 THIẾT LẬP QUY TRÌNH SẢN XUẤT CHẾ PHẨM PROBIOTIC GIÀU CAROTENOPROTEIN TỪ PHẾ LIỆU TÔM 57 KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ .60 KẾT LUẬN 60 ĐỀ NGHỊ .60 TÀI LIỆU THAM KHẢO 61 PHỤ LỤC vii DANH MỤC CÁC CHỮ VIẾT TẮT ANOVA Analysis of Variance AA Activity of Amylase BOD Biochemical Oxygen Demand CFU Colony-forming Unit COD Chemical Oxygen Demand ĐC Đối chứng DDA Deacety hóa DH Degree of Hydrolysis DO Dissolved Oxygen DPPH 2,2-diphenyl-1-picrylhydrazyl FBC Fat Binding Capacity LAB Lactic acid bacteria OD Optical Density PA Protease Activity PFCP Peptide from Carotenoprotein PLT Phế liệu tôm SF Submerged Fermentation SSF Solid - State Fermentation UI International Unit VK Vi khuẩn VSV Vi sinh vật WBC Water Binding Capacity viii DANH MỤC BẢNG BIỂU Bảng 3.1 Thành phần hoá học phế liệu tôm .36 Bảng 3.2 Thơng số thích hợp cho q trình sản xuất chế phẩm probiotic giàu carotenoprotein từ PLT B subtilis C10 L fermentum TC10 54 Bảng 3.3 Ảnh hƣởng tỷ lệ phối trộn dịch carotenoprotein vào chất mang đến hoạt độ protease, hàm lƣợng astaxanthin độ ẩm chế phẩm 56 69 [91] Messina, C., Renda, G., Randazzo, M., Laudicella, A., Gharbi, S., Pizzo, F., Morghese, M., and Santulli, A (2015), Extraction of bioactive compounds from shrimp waste, Bull Inst Natn Scien Tech Mer de Salammbô, Vol 42 [92] Metusalach, Brown, J A., Shahidi, F (1997), Effects of stocking density on colour characteristics and deposition of carotenoids in cultured Arctic charr (Salvelinus alpinus), Food Chemistry, 59, pp 107–114 [93] Michetti, P., Dorta, G., Wiesel, P H., Brassart, D., Verdu, E., Herranz, M., Felley, C., Porta, N., Rouvet, M., Blum, A L., Theulaz, C.I (1999), “Effect of whey-based culture supernatant of Lactobacillus acidophilus (johnsonii) La1” on Helicobacter pylori infection in humans, Digestion, 60(3), pp 203-212 [94] Mongkol, T., Pongphun B., Piyanuch, N (2009), “Probiotic potential of lactic acid bacteria isolated from fermented dairy milks on antiproliferation of colon cancer cells”, Biotechnology Letters, 31, pp 571–576 [95] Motevaseli, E , Dianatpour, A and Ghafouri-Fard, S (2017), The Role of Probiotics in Cancer Treatment: Emphasis on their In Vivo and In Vitro Antimetastatic Effects, International Journal of Molecular and cellula Medicine 6(2), pp 66–76 [96] Moure, T., Dominguez, H and Parajo, J.C (2006), Antioxydant properties of ultrafiltrationrecovered soy protein factions from Industrial effluents and their hydrolysates, Process Biochem, 41, pp 447-456 [97] Mukkhejee, A K., Adhikari, H (2008), Production of alkaline protease by a thermophilic Bacillus subtilis under solid-state fermentation (SSF) condition usingImperata cylindrica grass and potato peel as low-cost medium: Characterization and application of enzyme in detergent formulation, Biochemical Engineering Jounal, Vol 39(2), pp 353–361 [98] Musa, H H., Wu, S L., Zhu, C H., Seri, H I and Zhu, G Q (2009), The Potential Benefits of Probiotics in Animal Production and Health, Journal of Animal and Veterinary Advances 8(2), pp 313-321 [99] Ohkouchi, Y., Inoue, Y (2006), “Direct production of L(+)-lactic acid from starch and food wastes using Lactobacillus manihotivorans LMG18011”, Bioresource Technology 97, pp 1554–1562 [100] Pal, J., Verma, H O., Munka, V K., Maurya, S K., Roy, D., Kumar, J (2014), Biological Method of Chitin Extraction from Shrimp Waste an Eco-friendly low Cost Technology and its Advanced Application, International Journal of Fisheries and Aquatic Studies, 1(6), pp 104-107 70 [101] Pan, C H , Y H Chien, and B Hunter (2003), The resistance to ammonia stress of Penaeus monodon Fabricius juvenile fed diets supplemented with astaxanthin, Journal of Experimental Marine Biology and Ecology, 297, pp 107-118 [102] Park, K B., Oh, S H (2007), “Production of yogurt with enhanced levels of gamma-aminobutyric acid and valuable nutrients using lactic acid bacteria and germinated soybean extract”, Bioresource Technology, 98, pp 1675–1679 [103] Parvez1, S., Malik, K.A., Ah, K S., Kim, H.Y (2006), “Probiotics and their fermented food products are beneficial for health”, Journal of Applied Microbiology, 100, pp 1171–1185 [104] Prescott, M L., Harley, J P., Klein, D A (2002), Microbiology 5th edition, McGraw−Hill, New York [105] Rao, M S and Stevens, W F (2005), Chitin production by Lactobacillus fermentation of shrimp biowaste in a drum reactor and its chemical conversion to chitosan, Journal of Chemical Technology and Biotechnology, Vol 80, pp 1080–1087 [106] Rao, M S., Tuyen, M H., Stevens, W F and Chandrkrachang, S (2001), Deproteination by mechanical, enzymatic and Lactobacillus treatment of shrimp waste for production of chitin, Chitin and Chitosan: Chitin and Chitosan in Life Science, Yamaguchi Press, Japan, pp 301–304 [107] Sadighara, P., Moghadam, H., Eskandari, T., S., Salehi, A (2015), Optimization of extraction of chitosan and carotenoids from shrimp waste, International Journal of Fisheries and Aquatic Studies, 2(5), pp 36-38 [108] Saikali, J., Picard, C., Freitas, M., Holt, P (2004), “Fermented milks, probiotic cultures, and colon cancer”, Nutrition and cancer, 49 (1), pp 14-24 [109] Sanders, M E., Morelli, L and Tompkins, T A (2003), Sporeformers as Human Probiotics: Bacillus, Sporolactobacillus, and Brevibacillus, Comprehensive reviews in food science and food safety, Vol [110] Sandes, S., Alvim, L., Silva, B., Acurcio, L., Santos, C., Campos, M., Santos, C., Nicolib, J., Neumannb, E., Nunesa, Á., (2017), Selection of new lactic acid bacteria strains bearing probiotic features from mucosal microbiota of healthy calves: Looking for immunobiotics through in vitro and in vivo approaches for immunoprophylaxis applications, Microbiological Research, 200, pp 1–13 71 [111] See, S F., Hoo, L L and Babji, A S (2011), Optimization of enzymatic hydrolysis of Salmon (Salmo salar) skin by Alcalase, International Food Research Journal, 18(40), pp 1359-1365 [112] Senphan, T., Benjakul S., Kishimura, H (2014), Characteristics and antioxidative activity of carotenoprotein from shells of Pacific white shrimp extracted using hepatopancreas proteases, Food Bioscience, 5, pp 54–63 [113] Sila, A., Kamoun, Z., Ghlissi Z., Makni M., Nasri M., Sahnoun Z., NedjarArroume N., Bougatef A (2014), Ability of natural astaxanthin from shrimp byproducts to attenuate liver oxidative stress in diabetic rats, US National library of Medicine National Institutes of Health, 67(2), pp 310-316 [114] Simon, O (2001), Probiotic feed additives - effectiveness and expected modes of action 10(Suppl 1), pp 51–67 [115] Soares, V F., Castilho, L R., Bon, E P S and Freire, D M G (2005), HighYield Bacillus subtilis Protease Production by Solid-State Fermentation, All rights of any nature what so ever reserved 0273-2289/05/121–124/311–320 [116] Sowmya, R., Rathinaraj, K and Sachindra, N M (2011), An Autolytic Process for Recovery of Antioxidant Activity Rich Carotenoprotein from Shrimp Heads, Mar Biotechnol, 1, pp 918–927 [117] Strompfova, V., Marcinakova, M., Gancarcikova, S., Jonecova, Z., scirankova, L., Guba, P., Koscova, J., Boldizarova, K., Laukova, A (2005), New probiotic strain Lactobacillus fermentum AD1 and its effect in Japanese quail, Vet Med – Czech, Vol 50(9), pp 415–420 [118] Tanaka, T., Morishita, Y., Suzui, M., Kojima, T., Okumura A and Mori H (1994), Chemoprevention of mouse urinary bladder carcinogenesis by the naturally occurring carotenoid astaxanthin, Carcinogenesis, 15,(1), pp 15-19 [119] Tokatlı, K and Demirdöven, S (2017), Optimization of chitin and chitosan production from shrimp wastes and characterization, Journal of food processing and preservation, 60 [120] Tolasa, S., Cakli, S., Ostermeyer, U (2005), Determination of astaxanthin and canthaxanthin in salmonid, European Food Research and Technology, 221, pp 787–791 [121] Trung, T S., Phuong, P T D (2012), Bioactive compounds from by-products of shrimp processing industry in Vietnam, Journal of Food and Drug Analysis, Vol 20(1), pp 194–197 72 [122] Veron, H E., Risio, H D D., Isla, M I., Torres S (2017), Isolation and selection of potential probiotic lactic acid bacteria from Opuntia ficus-indica fruits that grow in Northwest Argentina, Food Science and Technology 84, pp 231-240 [123] Vos, P D., Garrity, G M., Jones, D (2009), Bergey's manual of systematic bacteriology Springer Science [124] Yu, A Q and Li, L (2016), The Potential Role of Probiotics in Cancer Prevention and Treatment, US National library of Medicine National Institutes of Health 68(4), pp 535-44 [125] Zagal sky, P.F (1976), Carotenoid-protein complexes, Pure and Applied Chemistry 47, pp 103-120 [126] Zhao, Y., Zhang, W., Xu, W., Mai, K., Zhang, Y., Liufu, Z (2012), Effects of potential probiotic Bacillus subtilis T13 on growth, immunity and disease resistance against Vibrio splendidus infection in juvenile sea cucumber Apostichopus japonicas, Fish & Shellfish Immunology, 32, pp 750-755 [127] Zoumpopoulou, G., Foligne, B., Christodoulou, K., Grangette, C., Pot, B., Tsakalidou, E (2008), Lactobacillus fermentum ACA-DC 179 displays probiotic potential in vitro and protects against trinitrobenzene sulfonic acid (TNBS)-induced colitis and Salmonella infection in murine models, International Journal of Food Microbiology, pp 18-26 TÀI LIỆU INTERNET [128] http://sacngockhang.com/vi-sao-astaxanthin-chiet-xuat-tu-vi-tao-luc-nhat-bantot-nhat-hien-nay.html [129] https://jb.asm.org/content/197/13/2129 [130] https://nootriment.com/lactobacillus-fermentum/ [131] https://www.indiamart.com/proddetail/bacillus-subtilis-8411588688.html 70 PHỤ LỤC PHỤ LỤC XỬ LÝ SỐ LIỆU VÀ PHÂN TÍCH PHƢƠNG SAI (ANOVA) BẰNG PHẦN MỀM MINITAB 17 Phân tích thành phần phế liệu tôm One-way ANOVA: kết versus thanhphanPLT Source DF Adj SS Adj MS F-Value P-Value ThanhphanPLT 3912.65 1956.32 136.99 0.000 Error 85.69 14.28 Total 3998.34 ThanhphanPLT N Mean StDev 95% CI doam 76.30 4.78 (70.96, 81.64) HLastaxanthin 27.57 2.06 (22.23, 32.91) HLprotein 38.70 3.97 (33.36, 44.04) Grouping Information Using the Tukey Method and 95% Confidence ThanhphanPLT N Mean Grouping doam 76.3000 A HLprotein 38.7000 B Hlastaxanthin 27.5667 C Nghiên cứu ảnh hưởng tỷ lệ B subtilis C10 L fermentum TC10 gieo cấy ban đầu vào PLT đến chất lượng chế phẩm probiotic giàu carotenoprotein One-way ANOVA: Hoạt độ protease (UI/ml) versus tylevsv Source DF Adj SS Adj MS F-Value P-Value tylevsv 3044.12 1014.71 445.14 0.000 Error 18.24 2.28 Total 11 3062.35 tylevsv N Mean StDev 95% CI (1:1) 40.12 1.83 ( 38.11, 42.13) (1:2) 46.81 1.82 ( 44.80, 48.82) (2:1) 37.807 1.530 (35.797, 39.818) ĐC 5.600 0.320 ( 3.590, 7.610) Grouping Information Using the Tukey Method and 95% Confidence tylevsv N Mean Grouping (1:2) 46.8148 A (1:1) 40.1185 B (2:1) 37.8074 B ĐC 5.6000 C One-way ANOVA: hoạt tính kháng oxy hóa (%) versus tylevsv Source DF Adj SS Adj MS F-Value P-Value tylevsv 1255.24 418.413 107.82 0.000 Error 31.04 3.880 Total 11 1286.28 tylevsv N Mean StDev 95% CI (1:1) 26.908 0.886 (24.286, 29.531) (1:2) 40.58 2.09 ( 37.96, 43.20) (2:1) 23.86 2.58 ( 21.24, 26.49) ĐC 11.84 1.93 ( 9.21, 14.46) 71 Grouping tylevsv (1:2) (1:1) (2:1) ĐC Information N Mean 40.5797 26.9082 23.8647 11.8357 Using the Tukey Method and 95% Confidence Grouping A A B A B B One-way ANOVA: mật độ tế bào sống (lg CFU/ml) versus tylevsv Source DF Adj SS Adj MS F-Value P-Value tylevsv 0.034809 0.017405 64.56 0.000 Error 0.001618 0.000270 Total 0.036427 tylevsv N Mean StDev 95% CI (1:1) 9.5332 0.0187 ( 9.5100, 9.5564) (1:2) 9.68050 0.01083 (9.65730, 9.70369) (2:1) 9.5733 0.0185 ( 9.5501, 9.5965) Grouping Information Using the Tukey Method and 95% Confidence tylevsv N Mean Grouping (1:2) 9.68050 A (2:1) 9.57328 B (1:1) 9.53317 C ĐC -0.00000 D One-way ANOVA: protein tách so với ban đầu (%) versus tylevsv Source DF Adj SS Adj MS F-Value P-Value tylevsv 7366.53 2455.51 8151.16 0.000 Error 2.41 0.30 Total 11 7368.94 tylevsv N Mean StDev 95% CI (1:1) 55.053 0.555 (54.322, 55.783) (1:2) 72.211 0.746 (71.480, 72.941) (2:1) 62.000 0.329 (61.269, 62.731) ĐC 7.632 0.482 ( 6.901, 8.362) Grouping Information Using the Tukey Method and 95% Confidence tylevsv N Mean Grouping (1:2) 72.4211 A (2:1) 62.0000 B (1:1) 55.0526 C ĐC 7.6316 D One-way ANOVA: hàm lượng nitơ formol (g/l) versus tylevsv Source tylevsv Error Total tylevsv (1:1) (1:2) (2:1) ĐC Grouping tylevsv (1:2) (2:1) (1:1) ĐC DF Adj SS Adj MS F-Value P-Value 0,36280 0,120932 55,67 0,000 0,01738 0,002172 11 0,38017 N Mean StDev 95% CI 1,0873 0,0583 (1,0253 1,1494) 1,3113 0,0214 (1,2493 1,3734 1,1013 0,0492 (1,0393 1,1634) 0,8213 0,0492 (0,7593 0,8834) Information Using the Tukey Method and 95% Confidence N Mean Grouping 1.31133 A 1.10133 B 1.08733 B 0.82133 C 72 Nghiên cứu ảnh hưởng nhiệt độ lên men đến chất lượng chế phẩm probiotic giàu carotenoprotein One-way ANOVA: hoạt độ protease (UI/ml) versus nhietdo Source DF Adj SS Adj MS F-Value P-Value nhietdo 819,67 273,224 89,24 0,000 Error 24,49 3,062 Total 11 844,17 nhietdo N Mean StDev 95% CI 30 46,61 2,52 ( 44,28 48,94) 35 49,393 1,616 (47,063 51,722) 40 32,859 0,718 (30,530 35,189) 45 30,489 1,661 (28,159 32,818) Grouping Information Using the Tukey Method and 95% Confidence nhietdo N Mean Grouping 35 49.3926 A 30 46.6074 A 40 32.8593 B 45 30.4889 B One-way ANOVA: hoạt tính kháng oxy hóa (%) versus nhietdo Source DF Adj SS Adj MS F-Value P-Value nhietdo 2820.93 940.308 115.13 0.000 Error 65.34 8.167 Total 11 2886.26 nhietdo N Mean StDev 95% CI 30 49.86 3.14 (46.05, 53.66) 35 41.45 3.40 (37.64, 45.25) 40 16.96 2.26 (13.15, 20.76) 45 14.30 2.49 (10.49, 18.10) Grouping Information Using the Tukey Method and 95% Confidence nhietdo N Mean Grouping 30 49.8551 A 35 41.4493 A 40 16.9565 B 45 14.2995 B One-way ANOVA: mật độ tế bào sống (lg CFU/ml) versus nhietdo Source DF Adj SS Adj MS F-Value P-Value nhietdo 0.147448 0.049149 93.69 0.000 Error 0.004197 0.000525 Total 11 0.151644 nhietdo N Mean StDev 95% CI 30 9.67858 0.00387 (9.64808, 9.70907) 35 9.69051 0.01240 (9.66002, 9.72101) 40 9.54933 0.01176 (9.51884, 9.57983) 45 9.4177 0.0423 ( 9.3872, 9.4482) Grouping Information Using the Tukey Method and 95% Confidence nhietdo N Mean Grouping 35 9.69051 A 30 9.67858 A 40 9.54933 B 45 9.41769 C One-way ANOVA: hàm lượng protein tách với ban đầu (%) versus nhietdo Source DF Adj SS Adj MS F-Value P-Value nhietdo 140.88 46.961 33.05 0.000 73 Error Total nhietdo 30 35 40 45 Grouping nhietdo 35 30 40 45 11.37 1.421 11 152.25 N Mean StDev 95% CI 71.737 0.795 (70.150, 73.324) 72.579 0.638 (70.992, 74.166) 66.05 1.93 ( 64.47, 67.64) 64.737 0.960 (63.150, 66.324) Information Using the Tukey Method and 95% Confidence N Mean Grouping 72.5789 A 71.7368 A 66.0526 B 64.7368 B One-way ANOVA: hàm lượng nitơ formol (g/l) versus nhietdo Source DF Adj SS Adj MS F-Value P-Value nhietdo 0.15071 0.050236 20.10 0.000 Error 0.01999 0.002499 Total 11 0.17070 nhietdo N Mean StDev 95% CI 30 1.2227 0.0566 (1.1561, 1.2892) 35 1.3253 0.0492 (1.2588, 1.3919) 40 1.0967 0.0428 (1.0301, 1.1632) 45 1.0360 0.0505 (0.9694, 1.1026) Grouping Information Using the Tukey Method and 95% Confidence nhietdo N Mean Grouping 35 1.32533 A 30 1.22267 A B 40 1.09667 B C 45 1.03600 C Nghiên cứu ảnh hưởng thời gian lên men đến chất lượng chế phẩm probiotic giàu carotenoprotein One-way ANOVA: hoạt tính kháng oxy hóa (%) versus thoigian Source DF Adj SS Adj MS F-Value P-Value thoigian 4315.9 539.49 48.01 0.000 Error 18 202.3 11.24 Total 26 4518.2 thoigian N Mean StDev 95% CI 5.507 1.186 (1.441, 9.573) 16 11.932 0.715 (7.866, 15.998) 24 43.48 3.80 (39.41, 47.54) 32 40.29 2.16 (36.22, 44.36) 40 38.55 3.32 (34.48, 42.62) 48 36.67 3.07 (32.60, 40.73) 56 35.51 3.77 (31.44, 39.57) 64 32.66 2.22 (28.59, 36.72) 72 21.55 6.37 (17.48, 25.61) thoigian N Mean Grouping 24 43.4783 A 32 40.2899 A B 40 38.5507 A B 48 36.6667 A B 56 35.5072 A B 64 32.6570 B 72 21.5459 C 16 11.9324 D 74 5.5072 One-way ANOVA: hoạt độ protease (UI/ml) versus thoigian Source DF Adj SS thoigian 7012.2 Error 18 232.2 Total 26 7244.4 thoigian N Mean 1.778 16 23.348 24 51.53 32 50.81 40 51.79 48 52.03 56 47.14 64 43.23 72 42.46 Grouping Information thoigian N Mean 48 52.0296 40 51.7926 24 51.5259 32 50.8148 56 47.1407 64 43.2296 72 42.4593 16 23.3481 1.7778 Adj MS 876.52 12.90 F-Value 67.94 P-Value 0.000 StDev 95% CI 0.800 (-2.579, 6.135) 0.224 (18.991, 27.705) 2.67 ( 47.17, 55.88) 3.63 ( 46.46, 55.17) 4.59 ( 47.44, 56.15) 5.56 ( 47.67, 56.39) 4.02 ( 42.78, 51.50) 4.21 ( 38.87, 47.59) 3.05 ( 38.10, 46.82) Using the Tukey Method and 95% Confidence Grouping A A A A A A A B C One-way ANOVA: hàm lượng protein tách so với ban đầu (%) versus thoigian Source DF Adj SS Adj MS F-Value P-Value thoigian 11262.8 1407.85 1082.11 0.000 Error 18 23.4 1.30 Total 26 11286.2 thoigian N Mean StDev 95% CI 11.842 0.569 (10.459, 13.226) 16 29.947 0.965 (28.564, 31.331) 24 71.368 1.035 (69.985, 72.752) 32 70.632 0.746 (69.248, 72.015) 40 69.74 1.74 ( 68.35, 71.12) 48 68.526 0.986 (67.143, 69.910) 56 67.947 1.266 (66.564, 69.331) 64 67.105 1.555 (65.722, 68.489) 72 66.263 0.898 (64.880, 67.647) Grouping Information Using the Tukey Method and 95% Confidence thoigian N Mean Grouping 24 71.3684 A 32 70.6316 A B 40 69.7368 A B 48 68.5263 B C 56 67.9474 B C 64 67.1053 C D 72 66.2632 D 16 29.9474 E 11.8421 F 75 One-way ANOVA: mật độ tế bào sống (lg CFU/ml) versus thoigian Source DF Adj SS Adj MS thoigian 39.1036 4.88795 Error 18 0.3056 0.01698 Total 26 39.4092 thoigian N Mean StDev 6.082 0.350 16 7.8760 0.1727 24 9.70267 0.00595 32 9.69688 0.01030 40 9.69441 0.01157 48 9.68877 0.01059 56 9.68061 0.01424 64 9.68106 0.00993 72 9.68059 0.00163 Grouping Information Using the thoigian N Mean Grouping 24 9.70267 A 32 9.69688 A 40 9.69441 A 48 9.68877 A 64 9.68106 A 56 9.68061 A 72 9.68059 A 16 7.87599 B 6.08229 C F-Value 287.94 P-Value 0.000 95% CI ( 5.924, 6.240) ( 7.7180, 8.0340) (9.54463, 9.86070) (9.53885, 9.85492) (9.53637, 9.85245) (9.53073, 9.84681) (9.52258, 9.83865) (9.52302, 9.83910) (9.52255, 9.83863) Tukey Method and 95% Confidence One-way ANOVA: hàm lượng nitơ formol (g/l) versus thoigian Source DF Adj SS Adj MS F-Value P-Value thoigian 4.87462 0.609328 263.13 0.000 Error 18 0.04168 0.002316 Total 26 4.91630 thoigian N Mean StDev 95% CI 0.1307 0.0214 (0.0723, 0.1890) 16 0.3733 0.0291 (0.3150, 0.4317) 24 1.3533 0.0291 (1.2950, 1.4117) 32 1.3160 0.0370 (1.2576, 1.3744) 40 1.2787 0.0352 (1.2203, 1.3370) 48 1.2693 0.0450 (1.2110, 1.3277) 56 1.2320 0.0370 (1.1736, 1.2904) 64 1.1667 0.0771 (1.1083, 1.2250) 72 1.1713 0.0820 (1.1130, 1.2297) Grouping Information Using the Tukey Method and 95% Confidence thoigian N Mean Grouping 24 1.35333 A 32 1.31600 A 40 1.27867 A B 48 1.26933 A B 56 1.23200 A B 72 1.17133 B 64 1.16667 B 16 0.37333 C 0.13067 D 76 Nghiên cứu ảnh hưởng tỷ lệ phối trộn dịch carotenoprotein với chất mang đến chất lượng chế phẩm probiotic giàu carotenoprotein One-way ANOVA: độ ẩm (%) versus tylephoitron Source DF Adj SS Adj MS F-Value P-Value tylephoitron 52.4800 17.4933 333.21 0.000 Error 0.4200 0.0525 Total 11 52.9000 tylephoitron N Mean StDev 95% CI (1:1) 12.533 0.208 ( 12.228, 12.838) (1:2) 10.4000 0.1000 (10.0949, 10.7051) (1:3) 8.533 0.306 ( 8.228, 8.838) (1:4) 6.933 0.252 ( 6.628, 7.238) Grouping Information Using the Tukey Method and 95% Confidence tylephoitron N Mean Grouping (1:1) 12.5333 A (1:2) 10.4000 B (1:3) 8.5333 C (1:4) 6.9333 D One-way ANOVA: mật độ tế bào sống (lg CFU/g) versus tylephoitron Source DF Adj SS Adj MS F-Value P-Value tylephoitron 0.011888 0.003963 13.66 0.002 Error 0.002321 0.000290 Total 11 0.014209 tylephoitron N Mean StDev 95% CI (1:1) 9.63286 0.00668 (9.61018, 9.65554) (1:2) 9.5828 0.0270 ( 9.5602, 9.6055) (1:3) 9.57019 0.01042 (9.54752, 9.59287) (1:4) 9.54677 0.01668 (9.52409, 9.56944) Grouping Information Using the Tukey Method and 95% Confidence tylephoitron N Mean Grouping (1:1) 9.64582 A (1:2) 9.58285 B (1:3) 9.55005 B (1:4) 9.45574 C One-way ANOVA: hoạt độ protease (UI/g) versus tylephoitron Source DF Adj SS Adj MS F-Value P-Value tylephoitron 2390.1 796.69 32.53 0.000 Error 196.0 24.49 Total 11 2586.0 tylephoitron N Mean StDev 95% CI (1:1) 65.78 3.20 (59.19, 72.37) (1:2) 46.81 5.65 (40.23, 53.40) (1:3) 34.96 1.85 (28.37, 41.55) (1:4) 28.74 7.24 (22.15, 35.33) Grouping Information Using the Tukey Method and 95% Confidence tylephoitron N Mean Grouping (1:1) 65.7778 A (1:2) 46.8148 B (1:3) 34.9630 B C (1:4) 28.7407 C One-way ANOVA: hàm lượng astaxanthin (μg/g) versus tylephoitron Source DF Adj SS Adj MS F-Value P-Value tylephoitron 0.5256 0.17521 7.13 0.012 77 Error 0.1967 0.02458 Total 11 0.7223 tylephoitron N Mean StDev 95% CI (1:1) 4.433 0.176 ( 4.225, 4.642) (1:2) 4.100 0.180 ( 3.891, 4.309) (1:3) 3.8500 0.0500 (3.6413, 4.0587) (1:4) 4.200 0.180 ( 3.991, 4.409) Grouping Information Using the Tukey Method and 95% Confidence tylephoitron N Mean Grouping (1:1) 4.43333 A (1:4) 4.20000 A B (1:2) 4.10000 A B (1:3) 3.85000 B 78 PHỤ LỤC MỘT SỐ HÌNH ẢNH TRONG QUÁ TRÌNH LÀM THÍ NGHIỆM LIÊN QUAN ĐẾN NỘI DUNG NGHIÊN CỨU Hình PLT sau lên men Hình Xác định hoạt tính kháng oxy hóa Hình Xác định hàm lượng nitơ formol Hình Dịch carotenoprotein sau lọc tách bã Hình Xác định hoạt độ protease Hình Xác định độ ẩm chế phẩm Hình Xác định hàm lượng protein tách so với ban đầu 79 Hình Xác định mật độ tế bào sống Hình Xác định hàm lượng astaxanthin 80 ... THANH NGHIÊN CỨU THIẾT LẬP QUY TRÌNH SẢN XUẤT CHẾ PHẨM PROBIOTIC GIÀU CAROTENOPROTEIN TỪ PHẾ LIỆU TÔM LUẬN VĂN THẠC SĨ CHẾ BIẾN LƢƠNG THỰC, THỰC PHẨM VÀ ĐỒ UỐNG Chuyên ngành: Công nghệ thực phẩm. .. (5) Nghiên cứu ảnh hƣởng tỷ lệ phối trộn dịch carotenoprotein vào chất mang đến chất lƣợng chế phẩm probiotic giàu carotenoprotein (6) Thiết lập quy trình sản xuất chế phẩm probiotic giàu carotenoprotein. .. dịch carotenoprotein vào chất mang đến hoạt độ protease, hàm lƣợng astaxanthin độ ẩm chế phẩm 56 3.6 THIẾT LẬP QUY TRÌNH SẢN XUẤT CHẾ PHẨM PROBIOTIC GIÀU CAROTENOPROTEIN TỪ PHẾ LIỆU TÔM