Phương pháp nguyên tử đánh dấu được dùng rộng rãi để tìm hiểu, nghiên cứu rấ t nhiều vấn đề về việc hấp thụ, thải loại các chất, động học của q trình hố sinh, sự biên đôi tương hỗ của các châ't trao đổi nào đó. Bản chất của phương pháp này là đưa thêm chât đồng vị vào ngun tơ" hố học đang được nghiên cứu về sự trao đổi của nó. Khi đó ta thu được thành phần đồng vị của nguyên tơ" dị thường khơng có trong thiên nhiên đó.
Tuỳ thuộc vào chất đồng vị nào được sử dụng mà chia ra th àn h chất chỉ thị đánh dấu phóng xạ hay chất chỉ thị ổn định. Nguyên tơ" có thành phần đồng vị dị thường gọi là nguyên tô" đánh dấu.
Trong phương pháp nguyên tử đánh dấu, người ta dùng đơn vị đo là đơn vị hoạt tính phóng xạ. Hoạt tính phóng xạ là độ phóng- xạ đo bằng tốíc độ phân rã của nguyên tử. Đơn vị phóng xạ quy ước là curi. Dưới curi có milicuri và microcuri.
Người ta khơng có thói quen dùng trị sơ' hoạt độ tuyệt đối của nó mà dùng trị sơ" hoạt độ tương đôi. Độ hoạt độ tương đổi tính ra xung lượng/phút, hay xung lượng/giây. Trị số hoạt độ tương đối chiếm bao nhiêu phần của hoạt độ tuyệt đôi gọi là hệ sô đếm.
Khi đo hoạt độ của chất đồng vị phát ra hạt p có năng lượng bé thì hệ sơ" đếm lớn n h ất (đến 80% và hơn nữa) nhận được trong trường hợp đo dùng máy nhấp nháy thể lỏng. Việc đo bằng ông đếm Geiger hoạt độ của cùng chất đồng vị này thường chỉ đạt tối hê sô' đếm nhỏ hơn 10%.
Người ta cũng còn dùng đơn vị phần trăm nguyên tử để đo
độ phóng xạ. Thí dụ với nitơ (N), phần trăm nguyên tử là tỉ số N /(N +N ).
Hoat đô đánh dấu cịn được tính theo hoạt độ riêng, theo • • • * * mức độ chỉ thị hoạt độ, đơn vị chỉ liều lượng bức xạ...
VIII.PHƯ Ơ NG PHÁP PH Ó N G XẠ
Phương pháp nghiên cứu sự định khu của ngun tơ" phóng xạ trong cơ quan, mô, tế bào, trên cơ sở chụp ảnh các bức xạ ion lên những vật cảm quang tốt, được dùng để định tính sự phân bố của những chất phóng xạ ở bên trong cơ thể, tế bào. Với những điều kiện chặt chẽ như nhau của việc bảo quản, cách để hiện hình phim cũng như việc dùng những mẫu chuẩn thích hợp, phương pháp này có thể dùng như phương pháp định lượng.
Mẫu nghiên cứu dùng để phóng xạ tự ghi được xử lí hết sức cẩn thận chu đáo tuỳ theo yêu cầu nghiên cứu làm sao chúng tác động tốt lên phim có độ nhạy thích ứng. Tránh những chất có thể làm m ất tính cảm quang của bạc, nghía là làm phim hố đen; cụ thể phải có m ẫu khơ thực sự. Để tránh tác dụng hoá học lên phim thì phải để m ẫu và phim cách nhau một lốp polietilen (5 - 7|im). Phim thường dùng là phim hiện hình cả hai mặt, thời gian chụp phụ thuộc vào độ nhạy của vật liệu ảnh và độ phóng xạ của m ẫu thí nghiệm. Chất phóng xạ m ạnh như Co60, p 32, Cu64, Fe59, Zn65 có cách chụp và phim chụp khác với các chất phóng xạ yếu như c 14, s 35, Ca45...
Trong phương pháp chung trên, người ta hay sử dụng phương pháp sắc kí phóng xạ tự ghi để nghiên cứu sự trao đổi chất trong mẫu. Đó là phương pháp tiến hành phóng xạ bằng sác kí đồ sau khi đã tách xong các chất đánh dấu bằng sắc kí trên giây hay lớp mỏng. Khi so sánh sự phóng xạ tự ghi bằng sắc đồ với sắc đồ có hiện hình ta được giá trị tính châ't của chất
đánh dấu. Sắc kí phóng xạ tự ghi dùng để nghiên cứu con đường trao đổi cacbon trong quang hợp.
Trong phóng xạ tự ghi thì phóng xạ tự ghi của các sắc đồ lớp mỏng là th u ận tiện nhất.
Sau khi thu được bản tự ghi ứng với các vị trí sắc đồ, có thể cát th àn h bản và dùng trực tiếp để xác định mức độ phóng xạ bằng máy nhấp nháy thể lỏng hay ông đếm Geiger.
Phương pháp chuyên dụng vi phóng xạ tự ghi được phát hiện và dùng để nghiên cứu phóng xạ tự ghi từng tế bào riêng biệt. Những thành tựu vô cùng lốn lao đã đạt được nhờ sử dụng trititim idin đánh dấu và vi phóng xạ tự ghi vào việc nghiên cứu tổng hợp ADN trong nhân của tế bào.
Việc dùng nhũ tương h ạ t nhân đặc biệt để phết trực tiếp lên tiêu bản chuẩn bị nghiên cứu hiển vi là phương pháp dùng nhiều n h ất của vi phóng xạ tự ghi. Sau đó hiện hình tiêu bản và định hình tiêu bản.
Thí dụ: Để nghiên cứu sự tổng hợp ADN có thể dùng dung dịch định hình để bảo vệ chất nhân, nhưng cho phép rửa sạch tiêu thể, không đồng hoá được ADN-timidin đánh dấu ra khỏi tế bào. Khi nghiên cứu sự tổng hợp protein bằng cách đưa các axit amin đánh dấu vào trong phân tử protein, cần sử dụng dịch định hình có thể giữ lại được tấ t cả các protein, nhưng lại hoà tan hết các axit amino tự do.
Độ lớn của tinh thể halogen - bạc là đặc điểm quan trọng của nhũ tương h ạ t nhân. Điều đó được giải thích bằng sự khôi phục tinh thể xảy ra trong trường hợp rơi trúng dù chỉ là một h ạt p. Bởi th ế vối nhũ tương h ạ t lớn có thể xảy ra hiện tượng là nhừnẹ tinh thể được khôi phục là sẽ che m ất diện tích bản tự ghi, lớn hơn cấu trúc, nơi có sự tập trung của chất đánh dấu. Vì thê cần sử dụng nhủ tương vối tinh thể có kích thưốc bé hơn
nhiều kích thước của cấu trúc cần để quan sát bằng phóng xạ tự ghi.
Có loại thuốc hiện hình cho X - quang, có thuốc hiện hình metol h ạ t nhỏ, thuốc hiện hình metol h ạ t nhỏ - hiđroquinon vối borat... Có loại thuốc định hình tương ứng cho các thuốc
hiện hình nói trên...