Thuyết minh quy trình thu nhận β-glucan từ Rhodosporidium sp.
Nguyên tắc:
Bản chất β-glucan là một polysaccharide, do đó phương pháp tách chiết β-glucan cũng dựa trên nguyên lý chung khi tách chiết polysaccharide. Chúng tôi sử dụng sodium
hydroxide (NaOH) để tách chiết β-glucan. Sau đó tiến hành ly tâm thu hồi và tinh chế. Phương pháp hóa học thích hợp với các mẫu phân tích chứa một lượng glucan tổng số
lớn hơn 20 %. Theo nghiên cứu của Mỹ, các phương pháp này đạt hiệu suất thu hồi 50 –
13
80 %, quy trình đơn giản, khơng tốn kém nhiều thời gian và chi phí như đối với phương pháp sử dụng enzyme β-1,3-glucanase .
Bước 1:
Ly giải thành tế bào nấm men. Trong dung dịch NaOH 4%, tỷ lệ mẫu:NaOH là 1w:10V ở nhiệt độ 50oC, trong 9 giờ. Sau đó ly tâm rửa với ethanol đến khi hết màu.
Khi kết thúc bước ly giải, một lượng β-glucan cũng được phóng thích ra dịch nổi, nên ký hiệu đó là POLY2, và được thu nhận bằng cách tủa bằng ethanol (cồn) để tận thu.
Bước 2: Tách polysaccharide từ thành tế bào: NaOH 0.5M, thời gian 4 giờ, tỷ lệ
mẫu:NaOH là 1:5, nhiệt độ 100 oC thu được POLY1.
Bước 3: Sau khi ly trích polysaccharide ta tiến hành các bước tinh sạch loại tạp chất,
khử màu và trung hòa mẫu.
Hiệu suất của cả quy trình thí nghiệm hàm lượng β-glucan tính trên khối lượng
sinh khối khô nấm men mẫu POLY1, POLY2 lần lượt là 9,31 %, 0,69 % (g/g) và hàm
14
QUY TRÌNH TÁCH CHIẾT β-GLUCAN TỪ THÀNH TẾ BÀO NẤM MEN BIA VÀ NẤM MEN BÁNH MÌ