2.2.3.1. Xác định tổng số vi sinh vật hiếu khí:Theo TCVN 4884:2005 ][40
Nguyên tắc: sử dụng kỹ thuật đổ đĩa, đếm khuẩn lạc trên môi trường thạch, sau khi ủ hiếu khí ở nhiệt độ 30 ± 10C trong thời gian từ 48- 72h. Số lượng hiếu khí trong 1 g (hoặc 1 ml) mẫu sản phẩm thực phẩm kiểm nghiệm được tính theo số khuẩn lạc đếm được từ các đĩa nuôi cấy theo các đậm độ pha loãng.
2.2.3 .2. Xác định tổng số coliforms:Theo TCVN 4882:2007 [43]
Nguyên tắc: Phát hiện và định lượng coliforms bằng kỹ thuật nuôi cấy trong môi trường lỏng ủ ở 370C, sử dụng cách tính số có xác xuất lớn nhất (MPN) để tính kết quả. Tổng số Coliform được xác định bằng số ống dương tính sau khi nuôi cấy vào các ống canh thang brilliantgreen broth 2% ở 370C/24- 48giờ.
2.2.3.3. Xác định tổng số E. coli: Theo TCVN 6846:2007 [44]
Nguyên tắc: Phát hiện và định lượng E. coli bằng kỹ thuật nuôi cấy trong môi trường lỏng ủ ở 370C, rồi ủ ở 440C, sử dụng cách tính số có xác xuất lớn nhất (MPN) để tính kết quả. Tổng số E.coli được xác định bằng các tính chất sinh hoá từ những ống dương tính nói trên sau khi làm thử nghiệm IMViC++--.(Indol+, Methyl Dred+, Voges-Proslcauer-Citrate)
2.2.3.4. Xác định B. cereus:Theo TCVN 4992:2005 [42]
Nguyên tắc: Cấy một lượng mẫu thử qui định nếu sản phẩm ban đầu ở dạng lỏng, hoặc một lượng huyền phù ban đầu qui định nếu các sản phẩm ở dạng khác, lên bề mặt môi trường cấy đặc chọn lọc đựng trong đĩa petri. Ủ trong điều kiện hiếu khí ở 300C từ 18 48 giờ. Tính số lượng – B.cereustrong 1 mlhoặc trong 1gam mẫu từ số lượng khuẩn lạc khẳng định thu được trên các đĩa ở các độ pha loãng đã chọn sao cho kết quả có ý nghĩa và được khẳng định theo phép thử qui định.
2.2 .5.3 . Xác định Cl. perfringens: Theo TCVN 4991:2005 [ ] 41
Nguyên tắc: Các đĩa petri được cấy một lượng mẫu thử qui định, nếu sản phẩm ban đầu ở dạng lỏng, hoặc một lượng huyền phù ban đầu qui định nếu các sản phẩm ở dạng khác. Ủ trong điều kiện kỵ khí các đĩa ở 370C trong 20 giờ. Định lượng các khuẩn lạc điển hình.
2.2.3.6. Xác định tổng số bào tử nấm men, nấm mốc: Theo TCVN 5166:90 39 [ ] Nguyên tắc: Sử dụng kỹ thuật đổ đĩa đếm khóm nấm trên môi trường thạch, sau khi ủ hiếu khí ở nhiệt độ 28±10 C trong thời gian từ 5 7 ngày. Số lượng bào tử nấm - men, nấm mốc trong 1g (ml) mẫu sản phẩm thực phẩm kiểm nghiệm được tính theo số khóm nấm đếm được từ các đĩa nuôi cấy theo các đậm độ pha loãng.