C a,d ST3A axit asiatic
3.4.1. Phõn lập S.mutans trờn mụi trường mitis salivarius và TSA pH 5,
Mụi trường thạch Mitis Salivarius của hóng Difco là mụi trường được dựng phổ biến cho việc phõn lập cỏc loài thuộc chi Streptococcus và Enterococcus từ dịch chứa vi khuẩn hỗn hợp ban đầu và cũng là mụi trường giỳp cho việc phõn biệt cỏc chủng gõy bệnh trờn mảng bỏm răng [115]. Thành phần mụi trường cú chứa đầy đủ nguồn carbon, nitơ, cỏc vitamin và khoỏng chất. Ngoài ra, việc bổ sung thờm kali tellurite 1% vào mụi trường cú tỏc dụng ức chế hầu hết vi khuẩn Gram (-) và cỏc vi khuẩn Gram (+) khỏc ngoại trừ cỏc loài thuộc chi Streptococcus và Enterococcus. Đối với từng loài vi khuẩn trờn mụi trường này sẽ xuất hiện hỡnh thỏi khuẩn lạc đặc trưng [11].
Chỳng tụi đó tiến hành nuụi cấy gạt cỏc mẫu bệnh phẩm với độ pha loóng nhỏ dần 10 lần trờn mụi trường Mitis Salivarius bổ sung tellurite 1%. Kết quả thu được ở hỡnh 3.33 cho thấy cỏc khuẩn lạc với hỡnh thỏi khỏc nhau bắt đầu xuất hiện sau 24 giờ nuụi cấy.
Hỡnh 3.33. Hỡnh thỏi khuẩn lạc một số chủng vi khuẩn phõn lập từ người Việt Nam
trờn mụi trường Mitis- salivarius
Cỏc đĩa thạch chứa mụi trường Mitis Salivarius được nuụi cấy cỏc mẫu vi khuẩn từ vựng răng sõu ở người Việt Nam cú sự đa dạng cao về hỡnh thỏi khuẩn lạc, khẳng định sự đa dạng về cỏc chủng thuộc chi Streptococcus và Enterococcus. Dựa vào hỡnh thỏi khuẩn lạc đặc trưng của S. mutans cú dạng trũn, viền khụng đều, xanh nhạt, lồi, nổi, mờ đục chỳng tụi phõn lập 20 khuẩn lạc cú hỡnh thỏi tương tự với của
S. mutans GS-5 từ cỏc mẫu bệnh khỏc nhau để nuụi cấy tiếp.
Kết quả nuụi cấy 20 khuẩn lạc này trờn mụi trường thạch TSA pH 5 ở 37 oC sau 2 ngày (hỡnh 3.34) cho thấy 10/20 chủng cú hỡnh thỏi khuẩn lạc tương tự hỡnh thỏi khuẩn lạc của vi khuẩn S. mutans GS-5 (khuẩn lạc nhỏ, trũn, đường kớnh khoảng 1-2 mm, màu trắng). Dựa trờn đặc điểm sinh trưởng của S. mutans GS-5
trờn mụi trường TSA là khuẩn lạc chỉ xuất hiện rừ sau 48 giờ nuụi ở 37 oC, chỳng tụi nhận thấy trong số 10 khuẩn lạc này chỉ cú 6 khuẩn lạc cú đặc điểm sinh trưởng này (4 khuẩn lạc cũn lại hỡnh thành rừ chỉ sau 1 ngày). Từ đú 6 khuẩn lạc này được tỏch riờng và ký hiệu lần lượt là H1, H2, H3, H4, H5 và H6.
Hỡnh 3.34. Hỡnh thỏi khuẩn lạc vi khuẩn trờn mụi trường thạch TSA pH 5,0
Một số chủng vi khuẩn được phõn lập cú hỡnh thỏi khuẩn lạc tương tự S. mutans GS-5 (bờn trỏi); S.mutans GS-5 (bờn phải).