C a,d ST3A axit asiatic
3.4.4.Một số đặc điểm sinh lý của 3 chủng vi khuẩn S.mutans H1, H2 và H
3.4.4.1. Khả năng sinh axit của S. mutans H1, S. mutans H2 và S. mutans H3
Sự giảm pH của mụi trường phản ỏnh sự sinh axit của vi khuẩn và được xỏc định bằng mỏy đo pH tại những khoảng thời gian nhất định. Kết quả thớ nghiệm sinh axit làm giảm pH của mụi trường của cỏc chủng S. mutans được thể hiện trong hỡnh 3.41. Với 3 chủng S. mutans được phõn lập chỳng tụi nhận thấy rằng hiện
tượng giảm pH thể hiện ngay sau khoảng 10 phỳt đầu tiờn tương tự như S. mutans GS-5, giỏ trị pH của mụi trường giảm từ 7,2 đến khoảng 4,5 đến 5,0. Sau đú giỏ trị pH này tiếp tục giảm nhanh, và qua 90 phỳt thớ nghiệm pH của mụi trường giảm xuống dưới giỏ trị 4. Một đặc điểm nổi bật là khả năng sinh axit của 3 chủng S. mutans H1, S. mutans H2 và S. mutans H3 đều mạnh hơn chủng S. mutans GS-5
chuẩn trong đú đặc biệt là S. mutans H2 với giỏ trị pH cuối cựng là thấp nhất (hỡnh 3.41). 3 4 5 6 7 8 0 30 60 90 pH thời gian ( phỳt)
Hỡnh 3.41. Khả năng sinh axit của cỏc chủng S. mutans từ người Việt Nam
S. mutans GS-5 (), S. mutans H1(), S. mutans H2(), S. mutans H3()
3.4.4.2. Khả năng chịu axit của cỏc chủng vi khuẩn phõn lập từ người Việt Nam
Cựng với khả năng sinh axit mạnh thỡ khả năng chịu axit tốt cũng là một đặc điểm quan trọng của loài S. mutans. Chớnh vỡ vậy chỳng tụi đó tiến hành kiểm tra
khả năng chịu axit của 3 chủng vi khuẩn được phõn lập. Chỳng tụi ly tõm thu tế bào vi khuẩn sau đú hoà lại trở lại trong dung dịch peptone 1% sao cho mật độ tế bào
cuối cựng tương đương OD700 = 1. Dựng HCl chỉnh pH của dịch huyền phự vi khuẩn về giỏ trị 3,0, giỏ trị pH mà ở đú đa số cỏc loài vi khuẩn khỏc đều khụng sống trong thời gian ngắn, chỉ những loài vi khuẩn cú khả năng chịu axit như S. mutans mới cú thể sống sút trong thời gian dài hơn. Kết quả thớ nghiệm kiểm tra sau 3 lần cho thấy khả năng chịu axit của cỏc chủng S. mutans (hỡnh 3.42). Kết quả này cho thấy ở pH 3,0, giỏ trị D của S. mutans GS-5, S. mutans H1, S. mutans H2 và S. mutnas H3 tương ứng là 18 phỳt, 18 phỳt, 23 phỳt và 27 phỳt.
Với 2 thớ nghiệm bước đầu nhằm kiểm tra khả năng sinh axit và chịu axit của 3 chủng S. mutans H1, S. mutans H2 và S. mutans H3 phõn lập từ người Việt Nam, chỳng tụi nhận thấy cỏc chủng được phõn lập đều cú khả năng sinh axit mạnh và chịu axit tốt tương đương hay thậm chớ cao hơn so với chủng chuẩn S. mutans GS-5 đặc biệt là S. mutans H2. -2.5 -2 -1.5 -1 -0.5 0 0 10 20 30 Thời gian (phỳt) Lo g N /N o
Hỡnh 3.42. Khả năng chịu axit của cỏc chủng S. mutans từ người Việt Nam
S. mutans GS-5 (), S.mutans H1(), S. mutans H2(), S. mutans H3().
3.4.4.3. Giải trỡnh tự gen mó hoỏ ARNr 16S của chủng S. mutans H2 phõn lập từ
người Việt Nam
Trong số 3 chủng vi khuẩn ngoài chủng S. mutans H1 cú độ tương đồng khỏ cao với S. mutans GS-5 chuẩn cũn hai chủng cũn lại cú sự khỏc biệt so với chủng chuẩn S. mutans GS-5 (Bảng 3.10). Chủng S. mutans H2 cú khả năng sinh axit mạnh và chịu axit tốt và cú những đặc điểm khỏc với S. mutans GS-5 chuẩn như
khả năng sử dụng một số loại đường khỏc nhau nờn chỳng tụi đó tiến hành xỏc định trỡnh tự nucleotide đoạn gen mó húa cho ARNr 16S ở chủng vi khuẩn S. mutans H2 trờn với sự hỗ trợ của mỏy giải trỡnh tự.
Qua kết quả so sỏnh trỡnh tự đoạn gen mó húa cho ARNr 16S của chủng S.
mutans H2 được phõn lập từ người Việt Nam với trỡnh tự tương ứng được cụng bố
trong Genbank bằng phần mềm Genetyx, chỳng tụi nhận thấy đoạn trỡnh tự gen mó húa cho ARNr 16S cú tỉ lệ tương đồng là 100% với đoạn gen tương ứng của S. mutans với mó số đăng ký X 58303 (hỡnh 3.43) trong ngõn hàng gen. Đõy là cụng
trỡnh đầu tiờn phõn lập và xỏc định chớnh xỏc, đầy đủ đến loài một chủng S. mutans từ người Việt Nam.
Trỡnh tự đoạn gen mó húa cho ARNr 16S của chủng Streptococcus mutans H2 phõn lập từ người Việt Nam