Để có thể phát hiện các độc tố ruột tụ cầu trong mẫu thịt cần phải xây dựng đƣợc quy trình chuẩn bị mẫu thích hợp. Nếu tỷ lệ mẫu/đệm chiết là lớn thì khả năng tách chiết độc tố sẽ giảm và các hợp chất trong thực phẩm có thể gây ảnh hƣởng đến tốc độ dòng chảy, phản ứng kháng nguyên – kháng thể. Ngƣợc lại, tỷ lệ mẫu/đệm chiết nhỏ thì độ nhạy của que thử giảm, do độc tố bị pha loãng. Để đánh giá ảnh hƣởng của tỷ lệ mẫu/thể tích đệm chiết khi sử dụng đệm borat chiết các độc tố SEA, SEB, SEC1, SED và SEE, tiến hành nhiễm chủ động các độc tố trên vào mẫu thịt xay đã đƣợc xác định là âm tính với các độc tố này và tách chiết các mẫu thịt xay với tỷ lệ 1/2; 1/4; 1/6 và 1/8. Các kết quả phân tích (Hình 3.29) cho thấy tín hiê ̣u va ̣ch kiểm chƣ́ ng và vạch thử nghiệm có xuất hiê ̣n trong c ả bốn tỷ lệ mẫu/ đệm chiết, trong đó tỷ lê ̣ mẫu /đệm chiết 1/2 (que thử số 1 và que thử số 2) là tỷ lệ pha loãng mẫu thịt thấp nhất, mẫu thịt pha loãng 3 lần. Do vậy, trong các thí nghiệm tiếp theo, chúng tôi đã sử dụng tỷ lê ̣ mẫu/đệm chiết là 1/2 để chuẩn bị mẫu thịt tiến hành các thử nghiệm phân tích bằng que thử.
105
Hình 3.29. Lựa chọn độ pha loãng thịt cho que thử
1, 3, 5, 7: Các mấu thịt xay âm tính pha loãng với tỷ lệ tương ứng 1/2; 1/4; 1/6; 1/8; 2, 4,6,8: Các mẫu thịt xay nhiễm chủ động 30 ng, 60ng, 90ng và 120ng SEC1
tương ứng với các tỷ lệ pha loãng mẫu 1/2;1/4; 1/6; 1/8.
3.4.2.2. Kết quả phát hiện một số độc tố ruột (SEA, SEB, SEC1, SED và SEE) trên thịt được gây nhiễm thực nghiệm