phương pháp xác định trình tự axit nucleic bằng phương pháp của sanger

Phương pháp xác định trình tự axit nucleic bằng phương pháp của sanger

Ngày tải lên : 29/10/2012, 14:41

... phương pháp điện di gel polyacrylamid điều kiện biến tính để băng đoạn oligonucleotid có kích thước khác - Thu kết phương pháp tự ghi, chụp ảnh, làm phim phóng xạ tự ghi cho gel điện di đọc trình ... riêng biệt (ddATP, ddCTP, ddTTP) điện di khác Các băng ADN xác định nhờ việc gắn đồng vị phóng xạ vào mồi, ddNTP Dựa vào để đọc trình tự ADN Các bước tiến hành: - Cắt ADN enzyme cắt giới hạn, ... Ví dụ: Nếu ta thêm ddCTP vào hỗn hợp phản ứng tổng hợp ADN trình tổng hợp chỗi polipeptid dừng lại vị trí C Nếu thêm ddGTP vào hỗn hợp gặp ddGTP chuỗi polynucleotit...

4
11K
146

Báo cáo " Xác định trình tự gen mã hoá cytochrome B của hệ gen ty thể và đánh giá mối quan hệ di truyền của một số loài cá song (Epinephelus spp.) nuôi thả tại các vùng biển Việt Nam" pdf

Ngày tải lên : 20/03/2014, 11:20

8
883
2

Phương pháp xác định trình tự của acid nucleic

Ngày tải lên : 06/11/2013, 05:15

... phương pháp vừa kể dùng để xác định trình tự DNA tạo dòng Sự đời phương pháp PCR cho phép xác định trực tiếp trình tự DNA khuyếch đại PCR không qua tạo dòng 2 -Phương pháp PCR dùng xác định trình ... PCR dùng xác định trình tự nucleic acid Nguyên tắc phương pháp dựa phối hợp phương pháp PCR phương pháp sử dụng dideoxynucleotide .Phương pháp sử dụng vùng cần xác định trình tư biết trước ; ứng ... xạ tự ghi III-Các phương pháp cải biên từ phương pháp Sanger Trong thực nghiệm, việc sử dụng phương pháp thống nêu đòi hỏi thao tác phức tạo phải tạo dòng trở lại đoạn DNA cần xác định trình tự...

8
1.6K
25

Phương pháp giải trình tự axit nucleic trên máy tự động

Ngày tải lên : 29/10/2012, 09:32

... xuất cung cấp • Sau hòa tan kết tủa tiến hành điện di gel polyacrylamid Kết thu nhờ máy đọc trình tự sử lí phần mềm chuyên dụng Những phần mềm cung cấp liệu in từ máy tính ...

2
1.4K
30

Phương pháp xác định trình tự ADN

Ngày tải lên : 29/10/2012, 14:02

... method III.Xỏc nh trỡnh t bng phng phỏp t ng Nguyên tắc chung giải trình tự gen tự động dựa theo sở phương pháp Sanger Nhưng : Quá trình tổng hợp AND thực nhờ kỳ thuật PCR Mỗi ddNTP đánh dấu loại ... đoạn ADN tổng hợp phản ứng Điện di riêng rẽ kết phản ứng gel Làm phim phóng xạ tự ghi cho gel điện di đọc trình tự nucleotit điện di đồ mẫu từ cực âm gel lên cực dương theo nguyên tắc: đoạn ADN ... chúng nhờ đánh dấu phóng xạ Dựa vào để đọc trình tự ADN Nhõn t kt thỳc c hiu c s dng l cỏc dideoxynucleotit (phng phỏp dideoxynucleotid) Phng phỏp Sanger 2.Cỏch tin hnh: Cắt ADN enzym cắt giới...

19
2.2K
24

Trình bày phương pháp xác định trinh tự axitnucleic bằng phương pháp hoá học của Maxam- Gilbert

Ngày tải lên : 29/10/2012, 14:41

... ATTGACTTAGCC C * ATTGA * ATTGACTTAG * ATTGACTTAGC * ATTGACTTAGCC ↓ điện di gel + chụp phóng xạ Trình tự AND: 5’ ATTGACTTAGCC 3’ ...

2
3K
45

Tài liệu Báo cáo " Góp phần xác định mức độ quan hệ họ hàng giữa sa mộc trồng Cunninghamia lanceolata và sa mộc dầu Cunninghamia Konishii (họ hoàng đàn Cupressaceae) ở Việt Nam bằng phương pháp xác định trình tự 18s-rDNA " pdf

Ngày tải lên : 26/02/2014, 10:20

... Xac dinh trinh ty gen 18S-rDNA Trinh ty gen 18S-rDNA dupc xac dinh theo phuomg phap tdng hop cua Sanger va dong tac gia (1977) vdi bp kit xac dinh trinh ty Bigdye terminator v3.1 va may dpe trinh ... thao Da dang sinh hpc Bac Truang San (lan thii hai): 61-64 Nha xuat ban Dai hpc Quoc gia Ha Npi Sanger F, Nicklen S, Coulson AR (1977) DNA sequencing with chain-terminating inhibitors Proc Natl...

8
591
0

Chương 7: PHƯƠNG PHÁP PHÂN TÍCH TRÌNH TỰ AXIT NUCLEIC pot

Ngày tải lên : 04/07/2014, 03:20

... Nguyên tắc phương pháp giải trình tự theo Sanger Giải trình tự đoạn oligonucleotide theo phương pháp enzyme học Các phương pháp cải biên từ phương pháp Sanger  Xác định trình tự máy tự động: Trong ... Giải trình tự đoạn oligonucleotide theo phương pháp hóa học Phương pháp enzyme học Sanger thông qua việc sử dụng dideoxynucleotide Dựa vào tổng hợp nhờ enzyme DNA polymerase mạch bổ sung cho trình ... 2 Phương pháp hóa học (Maxam Gilbert) Dựa vào thủy giải đặc trưng phân tử DNA cần xác định trình tự phương pháp hóa học Trước hết DNA đánh dấu P32 đầu...

8
563
4

Xác định trình tự và phân tích gen mã hóa kháng nguyên HA của virus cúm chủng NIBRG-14 sử dụng trong sản xuất vacine cúm A/H5N1 tại Việt Nam

Ngày tải lên : 27/10/2012, 11:12

... cho giải trình tự trình bày phần phương pháp nghiên cứu Quá trình giải trình tự thực máy giải trình tự tự động ABI 3100 Sau giải trình tự gen mã hóa kháng nguyên HA virus H5N1, trình tự phân tích ... tốc độ tối đa phút 27 2.2.10 Xác định trình tự gen máy tự động Nguyên tắc: Dựa nguyên tắc Sanger có sử dụng dideoxynucleotit Trong kỹ thuật xác định trình tự máy tự động, người ta không đánh ... đọc trình tự 38 3.5 Kết xác định trình tự Sử dụng DNA plasmit cho phản ứng PCR giải trình tự với việc sử dụng sinh phẩm BigDyeR Terminator v3.1 Cycle Sequencing Kit Applied Biosystems, quy trình...

47
1.1K
3

Xác định trình tự vùng ITS - rDNA của nấm Beauveria bassiana Vuille. ký sinh trên côn trùng gây hại

Ngày tải lên : 31/10/2012, 09:26

... người 2.4 Nguyên tắc đọc trình tự 2.4.1 Nguyên tắc phƣơng pháp đọc chuỗi mã Sanger Phương pháp đọc chuỗi mã Sanger dựa tổng hợp sợi DNA bổ sung sợi cần xác định trình tự Trong phản ứng tổng hợp ... 19 2.4.3 Đọc trình tự sản phẩm PCR Có hai phương pháp đọc trình tự sản phẩm PCR: Một là, người ta tạo dòng phụ (subclone) sản phẩm PCR sau đọc trình tự subclone Hai là, đọc trình tự sản phẩm PCR ... Bửu Thanh, 2003) 2.4.2 Nguyên tắc giải trình tự gen máy sequencer Nguyên tắc chung máy giải trình tự gen tự động dựa sở phương pháp dideoxy Máy đọc trình tự hai mạch đơn, phát giảm nhầm lẫn kỹ...

62
2.4K
7

luận văn thạc sĩ sinh học :Tách phòng và xác định trình tự Nucleotit

Ngày tải lên : 09/11/2012, 16:11

... PRISM 3100 Avant Genetic Analyzer 3.3 XÁC ĐỊNH TRÌNH TỰ NUCLEOTIT CỦA MỘT SỐ ĐOẠN TRONG GENOME CỦA RGSV Các trình tự RGSV thu đƣợc máy xác định trình tự tự động ABI PRISM® 3100 Avant Genetic ... khử ion (3,5µl ) Tổng thể tích 10µl 2.3.10 Xác định trình tự so sánh trình tự gen thu đƣợc với trình tự tƣơng ứng GenBank Tách dòng xác định trình tự gen: Sản phẩm PCR đƣợc gắn vào vector tách ... gen 39 3.3 XÁC ĐỊNH TRÌNH TỰ NUCLEOTIT CỦA MỘT SỐ ĐOẠN TRONG GENOME CỦA RGSV 40 3.4 SO SÁNH TRÌNH TỰ GEN CP-RGSV CỦA HAI TỈNH NINH THUẬN VÀ BÌNH THUẬN VỚI CÁC TRÌNH TỰ TƢƠNG ỨNG...

58
985
3

Tách dòng và xác định trình tự gene kháng thể tái tổ hợp kháng tế bào lympho bệnh ung thư vú

Ngày tải lên : 24/04/2013, 22:04

... ion vô trùng 2.3.8 Xác định trình tự nucleic Trình tự DNA xác định phương pháp enzyme Sanger Cơ sở phương pháp: dựa vào tổng hợp mạch bổ sung với đoạn DNA mạch đơn cần xác định nhờ enzyme DNA-polmerase ... vị trí ( trình tự ) xác định Do đặc tính RE khả nhận biết cắt trình tự xác định phân tử DNA nên dựa vào khả này, người ta chia chúng làm ba loại: - Loại I: Khi enzyme nhận biết trình tự, di chuyển ... thư vú Vì vậy, trình bày phần tách dòng xác định trình tự nucleotid gene mã hoá kháng thể tái tổ hợp kháng lại lympho bào tách từ bệnh nhân ung thư vú Để tách dòng xác định trình tự gene mã hóa...

37
1.1K
2

XÁC ĐỊNH TRÌNH TỰ NUCLEOTID VÙNG SIÊU BIẾN I Ở NGƯỜI VIỆT NAM

Ngày tải lên : 07/09/2013, 16:10

... ADN Xác định trình tự đoạn gen vùng siêu biến I ADN plasmit sau kiểm tra khẳng định gắn sản phẩm PCR gửi cho “BIOSERVICE UNIT”, Bangkok, Thailand để xác định trình tự Kết xác định trình tự nucleotid ... từ mẫu tóc chưa gửi xác định trình tự) sau: So sánh trình tự nucleotid sản phẩm PCR mà thu với trình tự vùng siêu biến mtADN Anderson, 1981 công bố thu kết sau: REF: Trình tự nucleotid vùng siêu ... tái tổ hợp tiến hành theo Sambrook cộng [10] Trình tự đoạn gen vùng siêu biến I Công ty “BIOSERVICE UNIT”, Bangkok, Thailand xác định theo phương pháp Sanger KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN Tách chiết ADN...

9
693
2

Báo cáo " Phân lập và xác định trình tự đoạn điều khiển của gen tổng hợp đường (Rsuc1 - promoter) từ các giống lúa Việt Nam " docx

Ngày tải lên : 11/03/2014, 08:20

11
419
0

Phát hiện đột biến nhờ Xác định trình tự của DNA (DNA sequencing) docx

Ngày tải lên : 21/03/2014, 01:20

... tiêu xác định cho trình tự base toàn phần gene Việc xác định trình tự ADN cho phép tìm hiểu chất đột biến gene, chức gene, mức độ tương tự gene với gene khác biết Kỹ thuật xác định trình tự nucleotide ... nucleotide ADN cách sử dụng phương pháp dideoxy Một kỹ thuật sử dụng rộng rãi để xác định trình tự ADN phương pháp dideoxy (dideoxy method) Frederick Sanger đưa Phương pháp thực cách sử dụng dide- ... tả đỉnh màu khác nhau, trình tự đỉnh màu đồ thị cho phép đọc trình tự đoạn ADN Một đoạn khoảng 500 bp 64 người khác phân tích gel vòng từ đến Phương pháp đọc trình tự tự động thực cho việc đánh...

6
630
2

Luận văn: TÁCH DÒNG VÀ XÁC ĐỊNH TRÌNH TỰ NUCLEOTIT MỘT SỐ ĐOẠN TRONG GENOME CỦA VIRUT VÀNG LÙN LÚA (RGSV) TẠI VIỆT NAM doc

Ngày tải lên : 27/06/2014, 09:20

... PRISM 3100 Avant Genetic Analyzer 3.3 XÁC ĐỊNH TRÌNH TỰ NUCLEOTIT CỦA MỘT SỐ ĐOẠN TRONG GENOME CỦA RGSV Các trình tự RGSV thu đƣợc máy xác định trình tự tự động ABI PRISM® 3100 Avant Genetic ... khử ion (3,5µl ) Tổng thể tích 10µl 2.3.10 Xác định trình tự so sánh trình tự gen thu đƣợc với trình tự tƣơng ứng GenBank Tách dòng xác định trình tự gen: Sản phẩm PCR đƣợc gắn vào vector tách ... gen 39 3.3 XÁC ĐỊNH TRÌNH TỰ NUCLEOTIT CỦA MỘT SỐ ĐOẠN TRONG GENOME CỦA RGSV 40 3.4 SO SÁNH TRÌNH TỰ GEN CP-RGSV CỦA HAI TỈNH NINH THUẬN VÀ BÌNH THUẬN VỚI CÁC TRÌNH TỰ TƢƠNG ỨNG...

58
494
0

XÁC ĐịNH TRÌNH Tự ADN và hệ gen học Là một trong những kỹ thuật chủ yếu pdf

Ngày tải lên : 05/07/2014, 05:20

... thuật xác định trình tự cao (highthroughput) đột ngột làm giảm chi phí xác định trình tự ADN, đem tới hy vọng cho nhiều nhà nghiên cứu thực việc với giá thành 1000 đô la [95] Mỹ Lượng lớn trình tự ... gián đoạn chuỗi phương pháp sử [93] dụng thường lệ Với kỹ thuật này, nhà khoa học nghiên cứu trình tự phân tử liên quan tới nhiều bệnh di truyền người Khi xác định trình tự trở nên đỡ tốn ... toán, nhà nghiên cứu xác định gen nhiều sinh vật cách liên kết trình tự nhiều đoạn khác (quá trình gọi "lắp ráp gen" -genome [94] assembly) Những kỹ thuật sử dụng để xác định gen người, hoàn...

5
697
1

xác định trình tự doc

Ngày tải lên : 06/07/2014, 03:20

... expand) Tự động hoá chuẩn bị mẫu Xác định trình tự Maxam-Gilbert Các phương pháp xác định trình tự DNA khác Các chiến lược xác định trình tự với mức độ lớn Xác định trình tự RNA Xác định trình tự ... tử vừa xác định trình tự Xác định trình tự DNA Tổng quan Trong thuật ngữ di truyền học, xác định trình tự DNA trình xác định trật tự nucleotide đoạn DNA Hiện nay, hầu hết xác định trình tự DNA ... tiềm áp dụng cho sản phẩm dịch vụ hữu ích Xác định trình tự Sanger Part of a radioactively labelled sequencing gel Phương pháp xác định trình tự gốc Sanger Dye terminator sequencing View of the...

6
325
0