... gây ra ungthư vú và
Thử nghiệm phân lập và nuôicấytếbàoungthư cổ tử cung
Tạ Ngọc Tuyết Minh
28
ung thư ác tính vốn có thể nhân bản vô tận trong môi trường nuôicấy với một tếbào
B ... trong nuôicấytếbàoungthư cổ tử cung là sự nhiễm
khuẩn, nhiễm mycoplasma và nhiễm nguyên bào sợi. Vì vậy môi trường phát triển
Thử nghiệm phân lập và nuôicấytếbàoungthư cổ tử cung
Tạ ... có nguồn gốc từ tổn thư ng
biểu mô tử cung độ thấp.
Những hạn chế gặp trong nuôicấytếbào biểu mô bình thư ng cũng xãy ra ở
quá trình nuôicấytếbàoungthư cổ tử cung sừng hóa, thêm vào...
... Hela (tế bàoungthư cổ tử cung) hay
tế bào Namalwa (tế bàoungthư limphoma của một phụ nữ có tên là Namalwa).
2.2.3. Sự sinh trưởng của tếbào động vật trong nuôi cấy.
Sự sinh trưởng của tếbào ... tếbào cho (tế bào soma) và đem cấy
chuyển vào tếbào trứng chưa thụ tinh đã bị lấy hoặc hủy nhân để tạo nên một tế
bào 2n giống như hợp tử chứa nhân của tếbào soma và tếbào chất của tếbào ... nghệ sinh học: tếbào và nuôicấytếbào là công cụ quan
trọng hầu như không thể thiếu trong các nghiên cứu. Quả thật không thể nói hết
công lao của tếbào và kỹ thuật nuôicấytếbào trong nghiên...
... NỘI DUNG
1. CẤY CHUYỂN TẾBÀO LỚP ĐƠN
2. CẤY CHUYỂN TRONG NUÔICẤY HUYỀN PHÙ TẾ BÀO
3. ĐÔNG LẠNH TẾ BÀO
4. GIẢI ĐÔNG TẾ BÀO
5. XÁC ĐỊNH SỐ LƯỢNG TẾ BÀO
6. CHUẨN BỊ TẾBÀO CHO VẬN CHUYỂN
24
... trypan blue
NỘI DUNG
1. CẤY CHUYỂN TẾBÀO LỚP ĐƠN
2. CẤY CHUYỂN TRONG NUÔICẤY HUYỀN PHÙ TẾ BÀO
3. ĐÔNG LẠNH TẾ BÀO
4. GIẢI ĐÔNG TẾ BÀO
5. XÁC ĐỊNH SỐ LƯỢNG TẾ BÀO
6. CHUẨN BỊ TẾBÀO CHO VẬN CHUYỂN
15
... tế bào
Nạp buồng đếm hồng cầu
Đếm tế bào
Tính tổng số lượng tếbào
Nhuộm tếbào để xác định sức sống của tếbào
Tính số lượng tếbào sống
34
CẤY CHUYỂN TRONG NUÔICẤY HUYỀN
PHÙ TẾ...
...
Tế bào có màng blebbing – Đặc trưng
của tếbào apoptosis giai đoạn cuối
(B)
TẠP CHÍ PHÁT TRIỂN KH&CN, TẬP 11, SỐ 01 - 2008
Trang 75
2.3 .Nuôi cấytếbào
Dòng tếbàoungthư cổ tử cung ...
gây độc tếbào của các cao chiết trên dòng tếbàoungthư cổ tử cung HeLa. Cao chiết có hoạt
tính ức chế tếbào mạnh nhất sẽ được nghiên cứu sâu hơn nhằm xác định cơ chế gây độc tếbào
của ... độc tếbào của tác nhân nghiên cứu. Phương pháp này
dựa trên hoạt động của enzyme dehydrogenase của ty thể trong các tếbào sống. Tếbào được
nuôi trong đĩa 96 giếng. Sau khi ủ 24 giờ, tế bào...
... LẠNH TẾ BÀO
4. GIẢI ĐÔNG TẾ BÀO
5. XÁC ĐỊNH SỐ LƯỢNG TẾ BÀO
6. CHUẨN BỊ TẾBÀO CHO VẬN CHUYỂN
28
CẤY CHUYỂN TRONG NUÔICẤY HUYỀN
PHÙ TẾ BÀO
Nuôi cấy huyền phù tếbào là
phương thức nuôicấy ... huyền phù tế bào)
39
NỘI DUNG
1. CẤY CHUYỂN TẾBÀO LỚP ĐƠN
2. CẤY CHUYỂN TRONG NUÔICẤY HUYỀN PHÙ TẾ BÀO
3. ĐÔNG LẠNH TẾ BÀO
4. GIẢI ĐÔNG TẾ BÀO
5. XÁC ĐỊNH SỐ LƯỢNG TẾ BÀO
6. CHUẨN BỊ TẾBÀO CHO ... của tếbào đông lạnh….
21
NỘI DUNG
1. CẤY CHUYỂN TẾBÀO LỚP ĐƠN
2. CẤY CHUYỂN TRONG NUÔICẤY HUYỀN PHÙ TẾ BÀO
3. ĐÔNG LẠNH TẾ BÀO
4. GIẢI ĐÔNG TẾ BÀO
5. XÁC ĐỊNH SỐ LƯỢNG TẾ BÀO
6. CHUẨN BỊ TẾ...
... (BA), Kinetin.
•
Kích thích sự phân chia tế bào.
•
Tạo chồi.
•
Được tổng hợp ở rễ.
Các giai đoạn nuôicấy mô TBTV
•
Đưa mẫu nuôicấy lên môi trường nuôicấy thích hợp
(mỗi loài, giống cây trồng ... phải cung cấp các
chất này cho mẫu nuôi
cấy.
Ngọn - Auxin
và Gibberellin
Rễ - Nước, vitamins
Chất khoáng và cytokinin
Lá -
Đường, GA
Các giai đoạn nuôicấy mô TBTV
•
Chọn vật liệu khởi đầu: thư ng ... hay norbonadien.
Đường
•
Khi nuôicấy mô thư ng quang hợp không
đủ cung cấp đủ đường ⇒ thêm saccaroza
2-3% w/v.
•
Glucoza hay hỗn hợp glucoza và fructoza.
•
Khi nuôicấy công nghiệp, các nguồn...
... trình nuôi cấy. Tuy
nhiên, các tếbào không phân hóa trong nuôicấy huyền phù thư ng tạo thành một khối vài
trăm tế bào, các tếbào ở giữa khối có sự tiếp xúc với môi trường khác với các tếbào ... trong nuôicấytếbào T. cuspidata. Srinivasan và cs (1995) nghiên cứu
quá trình sản xuất taxol bằng nuôicấytếbào của T. baccata. Lee và cs (1995) đã nghiên cứu
sản xuất taxol bằng nuôicấytế ... các tếbào đơn, các cụm tếbào với kích thư c khác nhau, các mẫu
nuôi cấy còn thừa chưa phát triển và các tếbào chết. Tuy nhiên, cũng có những dịch huyền
phù hoàn hảo, chứa tỷ lệ cao các tế bào...
... effects (bệnh
tích tế bào- CPE).
D PRV có thể được nuôicấy trên một phổ rộng các loại tếbào như tế
bào phổi thỏ (rabbit lung-ZP), tếbào thận thỏ (rabbit kidney-
RK13), tếbào thận chuột Hamster ... kidney-BHK21), tế
bào thận heo (porcine kidney-PK15), tếbào thận khỉ xanh (green
monkey kidney-GMK), tếbào phổi chồn Vizon (mink lung-MK),
tế bào thận chồn furo (ferret kidney-FK), tếbào phôi bào ... lọc 0.2 um và đưa vào môi trường tế bào.
• Mẫu huyết thanh cho qua lọc 0.2 um và đưa vào môi trường tế
bào.
b) Chuẩn b
ị môi trường tếbào
D Cả hai loại tếbào PK-15 và BT được phát triển...
... thấy vật chất trong tếbào chất dương tính mạnh trong
tế bào chất của mô bào và những tếbào thực bào hoạt hóa.
Không có sự khác biệt nào về dạng tếbào nhuộm hoặc sự nhuộm nội bào giữa hai
phương ... cấy được cấy chuyển
bằng cách tách tếbào PK15 sử dụng trypsin versene, tái hòa tan những tếbào tách
này trong 20 ml MEM-G, đưa chúng vào bình nuôicấy 75 ml sạch ở nồng độ 4 x
10
5
tế bào/ ... trong tếbào chất và nhân tếbào của những nang trong hạch lympho
phổi (hình 2)
13
thể vùi riêng biệt hoặc sự tích đọng tếbào chất đến sự hòa nhập chất nhuộm ở tế
bào chất...
... trình nuôi cấy. Tuy
nhiên, các tếbào không phân hóa trong nuôicấy huyền phù thư ng tạo thành một khối vài
trăm tế bào, các tếbào ở giữa khối có sự tiếp xúc với môi trường khác với các tếbào ... các tếbào đơn, các cụm tếbào với kích thư c khác nhau, các mẫu
nuôi cấy còn thừa chưa phát triển và các tếbào chết. Tuy nhiên, cũng có những dịch huyền
phù hoàn hảo, chứa tỷ lệ cao các tếbào ... trong nuôicấytếbào T. cuspidata. Srinivasan và cs (1995) nghiên cứu
quá trình sản xuất taxol bằng nuôicấytếbào của T. baccata. Lee và cs (1995) đã nghiên cứu
sản xuất taxol bằng nuôicấy tế...
... thuật nuôicấytếbào
a. Giới thiệu về kỹ thuật nuôicấytếbào
Nuôi cấytếbào là là đơn vị nuôicấy nhỏ nhất, là kỹ thuật duy trì và phát triển các tếbào
ngoài cơ thể sống, các tếbào trong ... chuyên biệt của tế bào. Nuôicấytếbào
Kỹ thuật nuôicấytếbào được tiến hành lần đầu vào năm 1907 bởi Harrison với những tế
bào thần kinh ếch.
Ngày nay, kỹ thuật nuôicấytếbào được ứng dụng ... huỷ.
- pH = 7,4
Sự cấy
- Đưa tếbào vào môi trường nuôicấy tiệt trùng.
- Mật độ lúc cấy 10
4
- 10
5
tếbào tb/ml.
- Sau 3 – 4 ngày đạt 10
6
tếbào hoặc 10
5
tế bào/ cm
2
/bề mặt cứng...
... của tế bào.
2.2 Các loại tếbàonuôi cấy: Tếbào biểu mô, Nguyên sợi bào, Tếbào cơ,
Tếbào thần kinh, Lympho bào.
2.3 Một số máy móc thiết bị cần thiết
Tủ cấy vô trùng chuyên nuôicấytế bào, ... Triệu chứng và bệnh tích 14
2. Phương pháp nuôicấytế bào. 16
2.1 Khái niệm 16
2.2 Các loại tếbàonuôi cấy: Tếbào biểu mô, Nguyên sợi bào, Tếbào cơ, 16
2.3 Một số máy móc thiết bị cần ... đàn gà
mới nhập.
2. Phương pháp nuôicấytế bào.
2.1 Khái niệm
Nuôicấytếbào là kỷ thuật duy trì và phát triển các tếbào ở ngoài cơ thể sống,
các tếbào trong điều kiện phòng thí nghiệm...
... đĩa
nuôi. Tếbàothu được sau trên 2 lần cấy chuyền là nguyên bào sợi có hình dạng là hình
sao hoặc hình thoi, có nhân to hình cầu.
Hình 3: Tếbào lan toả sau 7 ngày nuôi sơ cấp
Hình 4: Tếbào ... hành cấy chuyền ra đĩa 4 giếng mới.
2. Kết quả sau khi cấy chuyền lần 1
Sau khi được cấy chuyền lần 1, các tếbào tiếp tục phân chia và phát triển mạnh
trong môi trường nuôi cấy. Sau 10 ngày tếbào ... quả nuôicấy sơ cấp
Khi được nuôi nguyên phát từ mảnh mô, sau 7 ngày nuôitếbào mọc lan ra và sau
14 ngày tếbào lan hết bề mặt đĩa 4 giếng, mẫu mô được gắp bỏ ra khỏi môi trường nuôi
cấy và có...
... CÔNG NGHỆ 2007
318
Hình 3. Tếbào sau 10 ngày nuôi (X20)
Hình 4. Tếbào sau 10 ngày nuôi (X10)
2. Kết quả sau khi cấy chuyền lần 1
Sau khi được cấy chuyền lần 1, các tếbào tiếp tục phân chia và ... tục cấy chuyền khi tếbào mọc lan ra hơn 80% diện
tích của đĩa nuôi.
Hình 5. Sau khi tách bằng
trypsin/edta 0,25%
Hình 6. Tếbào sau 24 giờ
được cấy chuyền lần 1
Hình 7. Tếbào sau 48 giờ
cấy ... phát triển mạnh
trong môi trường nuôi cấy. Sau 6 ngày, tếbào mọc lan hết bề mặt của đĩa 4 giếng và đạt
mật độ cấy chuyền qua đĩa mới.
Khi nuôicấy in vitro, các tếbào bám trên bề mặt của đĩa đa...
... Nadu State.
¾ Dòng tế bào:
Tế bào thận lợn (PS-Porcine Kidney) lấy từ trung tâm quốc tế về khoa học
tế bào được sử dụng trong nghiên cứu. Tếbào phát triển trong bình nuôicấy mô
plastic và ... Shell vial
1ml tếbào thận (4 x 10
5
tế bào/ ml) trong dung môi phát
triển được thêm vào mỗi shell
vial và ủ ở 37
o
C cho tới khi tế
bào một lớp hợp dòng được tạo
thành. Dung môi phát triển ... nhiễm virus vào những tếbào nhạy cảm. Người ta nghĩ rằng chấn thư ng
nhỏ trên bề mặt tếbào đưa đến kết quả của việc ly tâm tốc độ chậm làm gia tăng
lực cho virus vào trong tế bào, việc này làm...