1.5.2.1. Vấn đề nguồn cung cấp mô
Nguồn cung cấp mô chính của các ngân hàng mô trên thế giới là từ ng-ời chết não và tử thi, do đó đảm bảo vấn đề ổn định về nguồn cung cấp ổn định. Tại Việt Nam, mặc dù Luật Hiến, Lấy, Ghép Mô, Bộ Phận Cơ Thể Ng-ời Và Hiến, Lấy Xác đã có hiệu lực tuy nhiên, các tiêu chuẩn, quy định về chết não và lấy mô ở ng-ời chết não cũng nh- tử thi ch-a đầy đủ đồng thời các yếu tố về phong tục, tập quán, văn hóa làm cho ý thức hiến mô tạng của ng-ời Việt Nam không cao do đó có thể coi việc lấy mô từ ng-ời chết (chết não hoặc tử thi) là ch-a khả thi.
Nguồn cung cấp mảnh ghép gân cho đề tài nghiên cứu đ-ợc là từ các chi thể cắt cụt do chấn th-ơng trong cấp cứu. Nguồn cung cấp này đảm bảo đ-ợc các yếu tố quan trọng là:
- Đảm bảo yếu tố ng-ời cho sống để phù hợp với quy định của Luật. - Chất l-ợng mảnh ghép tốt do thu nhận từ các chi thể cắt cụt do chấn th-ơng ở ng-ời trẻ.
1.5.2.2. Các khâu quan trọng của quy trình sàng lọc, thu nhận, xử lý và bảo quản mảnh ghép đồng loại
Một mảnh ghép đồng loại đảm bảo chất l-ợng phải giảm thiểu đ-ợc 2 yếu tố nguy cơ là nhiễm trùng và lây nhiễm đồng thời không làm biến đổi quá nhiều các đặc tính sinh cơ học cần thiết của mảnh ghép. Để giải quyết việc này, quy trình sàng lọc, thu nhận, xử lý và bảo quản mảnh ghép có nhiều khâu quan trọng cần l-u ý.
* Sàng lọc ng-ời cho mô
Lây nhiễm bệnh qua con đ-ờng sử dụng mảnh ghép là nỗi e ngại của cả các ngân hàng bảo quản mô, các phẫu thuật viên và bệnh nhân. Để loại trừ nguy cơ này, vấn đề hàng đầu là sàng lọc ng-ời cho mô. Trong các nguy cơ
lây nhiễm bệnh thì nguy cơ lây nhiễm HIV và các virus viêm gan HbsAg và HCV là lớn nhất. Trong lịch sử, đã có thông báo về lây nhiễm HIV và HCV qua con đ-ờng sử dụng mảnh ghép [57], [59] và các yếu tố nguy cơ đ-ợc chỉ rõ là ch-a có đủ các ph-ơng tiện chẩn đoán và sàng lọc ng-ời cho mô vì việc lây nhiễm xảy ra ở thời điểm virus HIV mới đ-ợc phát hiện và việc sử dụng mảnh ghép t-ơi, không qua tia xạ.
Quy trình sàng lọc không chỉ đơn thuần là các xét nghiệm máu mà còn bao gồm cả việc khai thác các yếu tố nguy cơ, tiền sử sức khỏe của ng-ời cho để giảm thiểu nhất khả năng lấy phải mảnh ghép của ng-ời cho mắc bệnh. Nhờ có sàng lọc ng-ời cho mô nh- vậy nên hàng năm ở Mỹ có khoảng 150000 ca sử dụng mảnh ghép đồng loại trong chấn th-ơng chỉnh hình nh-ng không phát hiện tr-ờng hợp nào lây nhiễm qua mảnh ghép [186]. Các tác giả -ớc tính thấy rằng nguy cơ lây truyền các bệnh truyền nhiễm rất thấp, 1/1.667.000 đối với HIV và 1/400.000 đối với HCV [99], [189]. Và một trong những yếu tố thuận lợi là đặc điểm cấu trúc của mảnh ghép gân nghèo mạch máu và tế bào là yếu tố thuận lợi nhất cho việc giảm các nguy cơ này [12].
* Cấy khuẩn th-ờng quy
Cấy khuẩn th-ờng quy mảnh ghép sau khi thu nhận, tr-ớc khi xử lý và tr-ớc khi bảo quản có vai trò rất quan trọng trong việc loại trừ các nguy cơ nhiễm khuẩn mảnh ghép. Mọi mảnh ghép đồng loại đều có nguy cơ này do có thời gian tồn tại ngoài cơ thể ng-ời bệnh 1 thời gian dài tr-ớc khi đ-ợc sử dụng. Mặc dù, trong khoảng thời gian này từ khi thu nhận, xử lý và bảo quản đều cố gắng đảm bảo vô trùng một cách tối đa nh-ng về mặt lý thuyết vẫn có nguy cơ. Các nguy cơ nhiễm trùng đối với mảnh ghép đ-ợc thu nhận có thể từ bên ngoài (nguyên nhân ngoại sinh) hoặc bên trong do sự phát tán vi khuẩn từ các cơ quan trong cơ thể đến sau khi ng-ời hiến mô chết (nguyên nhân nội sinh) [132], [148]. Và 1 điều rất thuận lợi đối với các mảnh ghép đ-ợc thu
nhận theo quy trình của chúng tôi là loại trừ đ-ợc nguy cơ nhiễm khuẩn nội sinh do các mảnh ghép đ-ợc thu nhận ở ng-ời cho mô sống.
* Tiệt khuẩn tia Gamma liều chiếu phù hợp
Việc cấy khuẩn th-ờng quy là cần thiết nh-ng chỉ có giá trị xác định có hay không có vi khuẩn tồn tại trong mảnh ghép và đôi khi vẫn có thể có âm tính giả, đặc biệt là với các vi khuẩn có nguồn gốc nội sinh. Việc sử dụng 1 ph-ơng pháp tiệt khuẩn mảnh ghép là cần thiết nhằm đảm bảo giải quyết nguy cơ nhiễm trùng. Có nhiều ph-ơng pháp tiệt khuẩn khác nhau nh-ng hiện nay, ph-ơng pháp phổ biến nhất đ-ợc hầu hết các ngân hàng mô trên thế giới sử dụng là tiệt khuẩn mảnh ghép bằng tia Gamma. Với việc sử dụng tia Gamma để tiệt khuẩn thì nguy cơ nhiễm khuẩn mảnh ghép đảm bảo ở mức d-ới 1/1000000. Và với việc sử dụng tia Gamma thì các nguy cơ nhiễm khuẩn gần nh- đ-ợc loại trừ với tỷ lệ nhiễm khuẩn đ-ợc các ngân hàng mô trong đó có Labô bảo quản mô của tr-ờng Đại Học Y Hà Nội công bố ở mức rất thấp [23], [87], [92], [140], [189].
* Bảo quản lạnh sâu âm 85oC
Có 2 kỹ thuật bảo quản mô ghép cơ bản trong các ngân hàng mô là: bảo quản lạnh sâu hoặc bảo quản đông khô, trong đó, bảo quản đông khô th-ờng đ-ợc áp dụng cho mô x-ơng cứng, còn đối với mô mềm, th-ờng sử dụng là bảo quản lạnh sâu [140], [189]. Với kỹ thuật bảo quản lạnh sâu thì mô bảo quản có thể đảm bảo sử dụng trong vòng 5 năm.