Mẫu nghiên cứu phải thoả mãn các tiêu chuẩn:
- Là mẫu ST tổn thương da của BN được CĐXĐ là BDBNTM.
- Tiêu bản nhuộm H&E cùng với thông tin và hình ảnh tổn thương đại thể đầy đủ. - Mẫu ST được chỉ định làm DIF để CĐ bệnh và thành công trong quy trình nhuộm
DIF.
Tiêu chuẩn chẩn đoán BDBNTM: chẩn đoán BDBNTM được xác định khi thoả mãn cả 3 tiêu chuẩn sau:
(1) Lâm sàng: có biểu hiện bóng nước, mụn nước và/hoặc vết tích bóng nước/mụn nước trợt, đóng mài ở da và/hoặc niêm mạc mà bác sĩ lâm sàng da liễu có nghi ngờ do bệnh da bóng nước tự miễn.
(2) Giải phẫu bệnh:
- Đại thể: Bóng nước, mụn nước căng hoặc chùng và/ hoặc vết tích bóng nước/mụn nước trợt, đóng mài.
- Vi thể: Bóng nước dưới thượng bì đối với nhóm bệnh pemphigoid. Bóng nước trong thượng bì có ly gai đối với nhóm bệnh pemphigus. Nhóm biểu hiện bóng nước trong thượng bì trên vi thể được chia thành hai phân nhóm: pemphigus nông (gồm PF, PE) biểu hiện sự tách lớp tạo bóng nước dưới lớp sừng hoặc trong lớp
hạt; pemphigus sâu (gồm PV, Pve, PNP) biểu hiện sự tách lớp tạo bóng nước trên lớp TB đáy của thượng bì.
(3) Xét nghiệm DIF:
Lắng đọng KT ở bề mặt TB gai kèm hoặc không kèm lắng đọng ở BMZ đối với nhóm bệnh pemphigus.
Lắng đọng KT ở BMZ không kèm lắng đọng KT ở bề mặt TB gai đối với nhóm BDBNTM dưới thượng bì.
Các loại bệnh PE, PH, PNP, BSLE, LAD đã được thiết lập tiêu chuẩn chẩn đoán trong y văn sẽ được CĐXĐ khi đã thoả mãn đầy đủ các tiêu chuẩn đó (Bảng 2.1)
Bảng 2.1. Tiêu chuẩn chẩn đoán một số BDBNTM
Loại bệnh Tiêu chuẩn chẩn đoán
PNP Tiêu chuẩn chẩn đoán theo Camisa và Helm [90]: thoả 3 t/c chính hoặc 2 t/c chính và 2 t/c phụ sau
3 t/c chính: (1) Phát ban bóng nước da niêm đa hình thái, (2) Có bệnh lý u đồng thời, (3) XN kết tủa miễn dịch phát hiện KT đặc hiệu trong huyết thanh.
3 t/c phụ: (1) Ly gai trên mô học, (2) DIF có lắng đọng KT bề mặt TB gai và ở BMZ, (3) IIF dương tính.
BSLE Tiêu chuẩn để chẩn đoán BSLE theo Gammon và Briggaman [59]: (1) Thoả mãn các tiêu chuẩn chẩn đoán SLE theo Hội thấp khớp học Hoa Kỳ (American Rheumatism Association – ARA)
(2) Phát ban bóng nước da mắc phải trên vùng da phơi bày ánh sáng và các vùng da khác.
(3) Mô bệnh học là bóng nước dưới thượng bì thấm nhập BCĐNTT . (4) Có bằng chứng về sự lắng đọng dọc màng đáy của IgG và C3, có thể kèm theo IgM, IgA
(5) Có bằng chứng về sự hiện diện của KT kháng collagen týp VII (bởi xét nghiệm DIF, IIF, thẩm tách miễn dịch, kết tủa miễn dịch, ELISA), hoặc quan sát thấy sự phân bố tương đồng giữa tự KT lắng đọng và tự KN (collagen týp VII hoặc các sợi neo giữ) trên KHV điện tử.
LAD Tiêu chuẩn chẩn đoán theo Genovese và cs. [62], thoả mãn 2 tiêu chí: (i) Tổn thương da là mụn nước/bóng nước căng và/hoặc trợt da, có thể
dạng chuỗi vòng ngọc, và/hoặc tổn thương da dạng sẩn hoặc dạng mề đay, có thể kèm tổn thương niêm mạc miệng/ nướu răng/ mũi/ niệu dục. Tổn thương niêm mạc không được biểu hiện đơn thuần hoặc ưu thế. (ii)DIF da quanh tổn thương cho thấy lắng đọng IgA dạng đường hoặc
dạng đường/hạt dọc BMZ, nếu có C3c, IgG và/hoặc IgM cùng lắng đọng ở màng đáy thì cường độ lắng đọng IgA phải ưu thế hơn cả.
EBA Tiêu chuẩn chẩn đoán theo Hallel Halevy [69], thoả mãn 3 tiêu chí đầu kèm (iv) và/hoặc (v)
(i) Bóng nước da trong phổ các biến thể lâm sàng của EBA (ii) Bóng nước dưới thượng bì trên mô bệnh học
(iii) Lắng đọng IgG ở BMZ trên da quanh tổn thương.
(iv) DIF cho thấy lắng đọng KT dưới lá đặc (u-shape) và/hoặc (v) Lắng đọng KT dưới lá đặc xác định bởi các phương pháp khác: DIF/IIF tách lớp bằng muối bão hoà hoặc bằng bơm khí, IIF trên cơ chất khiếm khuyết
collagen type VII, thẩm tách MD, MDHQ định vị KN, ELISA, hiển vi miễn dịch điện tử.