ĐỐI TƯỢNG VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 2.1 ĐỐI TƯỢNG VÀ VẬT LIỆU NGHIÊN CỨU
2.1.2. Vật liệu nghiên cứu
Nọc tổng số của 4 loài rắn độc (lục xanh, hổ đất, chàm quạp và hổ chúa) do Trung tâm nuôi trồng và bảo tồn Dược liệu Quân Khu 9 (Trại rắn Đồng Tâm) cung cấp dưới dạng đông khô. Nọc được thu thập từ nhiều cá thể rắn của mỗi loài, không phân biệt tuổi, giới để bảo đảm tính đại diện loài. Số lượng mỗi loại 1 gam. Nọc tổng số của 4 loài rắn độc là sản phẩm nghiên cứu thuộc đề tài KCB 04.06.01 đã được hội đồng khoa học nghiệm thu năm 2009
(xem kết quả kiểm định nọc độc bằng sắc ký lỏng hiệu năng cao đảo pha (RP- HPLC ở phần phụ lục).
Các tá chất Freund hoàn chỉnh (Complete Freund’s adjuvant - CFA); Tá chất Freund không hoàn chỉnh (Incomplete Freund’s adjuvant - IFA); Cộng hợp HRP-kháng thể chuột kháng IgG thỏ; Dung dịch DMSO; Biotin-N- hydroxysuccinimide ester; Phức hợp Avidin-HPR; Cơ chất O- phenylenediamine (OPD) do hãng Sigma (Sigma Co., Mỹ) cung cấp. Các tá chất, kháng thể và sinh phẩm được bảo quản trong lọ kín ở nhiệt độ -20°C hoặc 4°C theo hướng dẫn của nhà sản xuất cho đến khi sử dụng.
Kít tách chiết IgG bằng phương pháp sắc ký ái lực với cột protein G và kít định lượng protein bằng phương pháp đo màu do hãng Bio-Rad (Mỹ) cung cấp;
Hạt sepharose 4B hoạt hóa bằng CNBr do hãng Armersham (Thụy Điển) cung cấp.
Các chế phẩm huyết thanh ngựa đơn đặc hiệu loài rắn lục xanh (lô số 17, sản xuất ngày 24/09/2010) và rắn hổ đất (lô số 21, sản xuất ngày 21/04/2010), loại đang được sử dụng để điều trị cho bệnh nhân nhiễm độc do rắn cắn tại các cơ sở y tế, được Viện vắc xin và sinh phẩm y tế (IVAC) tại Nha Trang cung cấp (có giấy chứng nhận kiểm định chất lượng kèm theo).
Các phiến xét nghiệm 96 giếng đáy phẳng - loại có thể tách rời từng thanh, mỗi thanh gồm 8 giếng dùng chế tạo bộ xét nghiệm ELISA phát hiện nọc rắn độc do hãng CORNING Mỹ sản xuất và cung cấp.
Máy đo mật độ quang (đọc ELISA): DTX 880 multimode detector do hãng BECKMAN COULTER sản xuất, được sử dụng và bảo dưỡng định kỳ tại phòng Protein - Độc chất và Tế bào, Trung tâm nghiên cứu Y dược học Quân sự, Học viện Quân y.
Các hoá chất khác và vật tư tiêu hao dùng cho nghiên cứu đều đạt tiêu chuẩn phân tích và được cung cấp từ chính hãng sản xuất.