đânh dấu mặt ngoăi vă măt trong của măng.
Nh đê chỉ ra tế băo hồng cầu có xu hớng chỉ vỡ một chỗ vă chỉ có một lỗ hổng đơn trín xâc. Một bọc nhỏ hơn đê đợc chế tạo từ xac hồng cầu bằng câch phâ vỡ một câch cơ học, hớng của măng trong bọc có thể từ trong ra ngoăi, hoăc hớng theo nh cũ, tuỳ theo lợng ion sử trong quâ trình phâ vỡ.
thì khâc nhau. Cũng giống nh câc quy luật cơ bản khâc, những giữ liệu đê thu đ- ợc trong viíc nghiín cứu tế băo hồng cầu sau n y cũng đă ợc triển khai văo câc tế băo nhđn chuẩn khâc.
Sự có cạnh (nhô lín) của câc protein măng có thể đợc chứng minh bằng một văi câch. Một trong những câch đó lă sử dụng thuốc thử đânh dấu đồng hoâ trị (ví dụ đânh dấu huỳnh quang hay phóng xạ.), đó lă chất tan trong nớc, tuy nhiín không phâ vở lớp lipit kĩp, chất đânh dấu sẽ tâc động văo (đồng hoâ trị) phía nhô lín khỏi măng .
Câc măng khi đó sẽ đợc hoă tan bằng chất tẩy rửa vă đợc phđn tích bằng câch điện di, câc protein sẽ đợc tâch ra. Câc protein sẽ đợc phât hiện bằng phơng phâp phóng xạ hay phơng phâp huỳnh quang. Bằng câch sử dụng vectorial labeling, nó có khả năng chứng minh câc tiểu phần protein đợc phât hiện nh lă một band trín gel nh thế năo vă nó có hớng nh thế năo ở trong măng: ví dụ nếu nó đợc đânh dấu cả đầu ngoăi (khi tế băo còn nguyín vẹn hay xâc hồng cầu đê bịt lại đê đợc đânh dấu) vă phía trong của măng (trong trờng hợp lật ra ngoăi,tế băo hồng cầu đê đợc đânh dấu ) khi đó nó cần phải lă một protein vắt qua măng. Một phơng phâp khâc để chỉ ra cả mặt trong vă mặt ngoăi nhờ câc enzym phđn giải protein, nếu bị tiíu cả hai mặt, nh vậy đó lă protein vắt qua măng.Thím nữa, câc khâng thể đợc đâng dấu, nó liín kết chỉ với một phần của phđn tử protein có thể dợc sử dụng để xâc định nếu phần của protein qua măng đợc bộc lộ trín phía năy hay phía kia của măng.
Protein măng hồng cầu ngời đê đợc nghiín cứu bằng SDS, polyacrylamide gel-electrophore, gần 15 giải protein đê đợc phât hiện.Trọng lợng phđn tử thay đổi từ 15-250.000. Ba protein lă spectrin, glucophorin, protein đỉnh 3 (protein đỉnh 3 theo tính toân chiếm khoảng 60% theo trọng lợng (Hình 1-44). Mỗi protein đợc sắp xếp trong măng theo một câch khâc nhau. Chúng ta sẽ coi chúng nh lă những ví dụ của ba câch chủ yếu để protein liín kết với măng, không chỉ trong măng hồng cầu mă còn cả câc tế băo khâc.
H.1-44: Điện di đồ gel SDS polyacrylamide của măng tế băo hồng cầu ngời.
Gel trong(A) đợc nhuộm bằng Coomassive blue. Câc vị trí của một văi protein chính trong gel đê đợc chỉ ra trong (B), glycophorin thì đợc chỉ mău đỏ để phđn biệt với protein đỉnh 3. Câc protein khâc trong gel thì không vẽ, phần lớn câc carbohydrate trong phđn tử glycophorin thì lăm chậm di chuyển của chúng, vì thế phần lớn chúng chạy chậm nh lă band 3.
3.2.3 Spectrin lă một protein khung tế băo(cytoskeletal protein) kếthợp không đồng hoâ trị với phía trong (cytoplasmic) của măng tế băo hồng hợp không đồng hoâ trị với phía trong (cytoplasmic) của măng tế băo hồng cầu.
Hầu hết câc phđn tử protein kết hợp với măng tế băo hồng cầu ngời lă protein ria măng gắn văo phía băo tơng của măng lipid kĩp. Phổ biến nhất trong câc protein đó lă spectrin, một protein dăi mỏng vă nh lă một câi roi rất linh động d i 100 nm, nó chiếm khoảng 25% khối lă ợng protein măng (khoảng 2,5.105 phđn tử giống nhau trín một tế băo). Đđy lă th nh phần tạo ra mạng lă ới (khung tế băo), nó nằm bín dới măng hồng cầu, duy trì cấu trúc thống nhất vă có dạng hai mặt lỏm của măng (H. 1-42): Nếu khung tế băo bị tâch khỏi xâc hồng cầu trong dung dịch ion hoâ mạnh , măng tế băo cắt vở ra thănh câc túi nhỏ.
Spectrin có kích thớc thay đổi tạo thănh từ hai tiểu phần tơng tự nhau về cấu trúc (H. 1-45). Hai tiểu đơn vị tự kết hợp để tạo thănh bốn tiểu đơn vị (thể 4) dăi
200 nm. Câc phần cuối của đuôi của 4 hay 5 thể 4, liín kết với sợi actin ngắn vă câc sợi protein khung tế băo (bao gồm band 4-1 protein) trong một phức hợp nối giao nhau. Kết quả cuối cùng lă một mạng lới giống nh lă một lới có thể biến dạng nằm dới toăn bộ măng nguyín sinh (H.1-46). Đó lă khung cơ bản spectrin
ra bệnh thiếu mâu vă có hồng cầu hình cầu vă bất thờng, hay bị vỡ vă yếu. Sự nguy hiểm của bệnh tăng lín tuỳ thuộc văo độ thiếu hụt spectrin.