CHƯƠNG 3: PHƯƠNG PHÁP SẢN XUẤT PROTEIN Y SINH HỌC
3.5. PHƯƠNG PHÁP SẢN XUẤT ENZYME TỪ VI SINH VẬT:
Có 2 phương pháp nuôi cấy vi sinh vật để thu nhận enzyme [7]:
Nuôi cấy bề mặt:môi trường nuôi cấy có cơ chất chủ yếu là cám mì, cám gạo, bột đậu, bột ngô, bột sắn… đã được hấp chín và làm ẩm, phối trộn thêm trấu, mùn cưa để tăng độ xốp. Trong nhiều trường hợp, ngoài môi trường bán rắn, người ta còn sử dụng môi trường lỏng để nuôi cấy vi sinh vật (chủ yếu là nấm mốc) theo phương pháp bề mặt.
Nuôi cấy bề sâu: môi trường nuôi cấy là môi trường lỏng. Thành phần dinh dưỡng cho các loại vi sinh vật khác nhau sẽ khác nhau, thường chứa tinh bột, các dạng bột và một số vật liệu khác làm nguồn carbon. Nguồn nitơ được cung cấp bởi nước chiết ngô, nước chiết malt, dịch tự phân nấm men. Thành phần khoáng của môi trường cũng có ý nghĩa quan trọng trong việc tạo ra enzyme mong muốn.
STT Đặc điểm
kĩ thuật Nuôi cấy bề mặt Nuôi cấy bề sâu
1 Nhu cầu oxi Cần oxi trong quá trình nuôi cấy.
Cần oxi trong quá trình nuôi cấy.
2 Nhu cầu
khuấy trộn môi trường
Không cần. Cần khuấy trộn để đảo trộn
môi trường và tăng khả năng hoà tan của oxi.
3 Sự thay đổi pH
pH ban đầu rất có ý nghĩa trong quá trình lên men. pH chỉ thay đổi cục bộ do môi trường không bị đảo trộn. Không có khả năng điều chỉnh pH.
pH ban đầu ít có ảnh hưởng vì pH thay đổi rất nhanh và đều khắp trong lòng môi trường. Có khả năng điều chỉnh pH. 4 Nước trong môi trường 58-60% 100% 5 Nhiệt độ lên men
Tối ưu 28-32oC. Nhiệt độ tăng trong quá trình lên men nên cần tiến hành điều hoà nhiệt độ.
Tối ưu 28-32oC. Trong quá trình lên men, khả năng tăng nhiệt chậm do sự điều hoà bởi lượng khi cung cấp vào môi trường liên tục. 6 Thời gian nuôi cấy 32-72 giờ 48-96 giờ 7 Vô trùng môi trường
Không cần vô trùng tuyệt đối.
Vô trùng tuyệt đối. 8 Khả năng cơ giới hoá, tự động hoá Thấp Cao 9 Khả năng sinh tổng hợp enzyme Cao Thấp 10 Khả năng thu nhận chế phẩm Dễ thu nhận, dễ làm khô để bảo quản, chi phí tinh chế thấp.
Thu nhận khó, bảo quản khó, chi phí tinh chế cao.
cấy năng. năng và thiết bị. 12 Diện tích xây
dựng
Diện tích lớn. Diện tích nhỏ.