phản ứng chuỗi polimerase polimerase chain reaction pcr
Kĩ THUẬT DNA sinh học phân tử
... .87 THẢO LUẬN 91 Chương 7: PHẢN ỨNG CHUỖI POLIMERASE (POLIMERASE CHAIN REACTION - PCR) 92 §1 PHẢN ỨNG CHUỖI POLIMERASE (PCR) 92 §2 PHÂN TÍCH TÍNH ĐA HÌNH CỦA ... protein đặc tính sinh vật Chương Kĩ thuật sinh học phân tử tích hệ gene sinh vật Chương Phản ứng chuỗi polimerase (PCR) Chương Tế bào chủ Vector Chương Phân lập gene, tách dòng phân tử biểu gene Tác ... polimerase α , ADN -polimerase β ADN -polimerase γ Theo quan niệm nay, sinh vật nhân chuẩn bậc cao nói chung α - polimerase sử dụng chép ADN nhân, β polimerase hoạt động enzyme sửa chữa, γ -polimerase...
- 162
- 1,672
- 10
Tách dòng và xác định trình tự gene kháng thể tái tổ hợp kháng tế bào lympho bệnh ung thư vú
... EcoRI ) Yêu cầu phản ứng cắt RE: - Mồi RE hoạt động tối ưu điều kiện phản ứng xác định, mặt dung dịch đệm Các dung dịch đệm dùng phản ứng RE thường khác nồng độ NaCl Do đó, phản ứng cần sử dùng ... đó, điều kiện phản ứng PCR chưa tối ưu nên mồi không bắt cặp với đoạn gene mong muốn mà bắt cặp với đoạn gene khác trình nhân PCR Tuy nhiên với việc thay đổi điều kiện phản ứng PCR thường không ... sản phẩm phản ứng PCR vào vector tách dòng pCR ™ 2.1 (invitrogen) với mục đích tạo vector tái tổ hợp mang đoạn DNA cần tách dòng sau biến nạp vào tế bào E.coli chủng DH5α Nguyên tắc: Phản ứng dựa...
- 37
- 1,062
- 2
PHÂN LẬP GENE TÁCH DÒNG PHÂN TỬ VÀ BIỂU HIỆN GENE
... (máy PCR) đoạn gene từ phân tử ADN mẫu khuếch đại Phân lập gene PCR tiến hành theo bước sau: (1) Tách chiết tinh ADN (2) Thiết kế primers (3) Chọn điều kiện phản ứng PCR (4) Nhân đoạn ADN máy PCR ... sản phẩm PCR dòng đậu tương ML61 mở vòng vector pBluescirpt KS (-) Phản ứng gắn vector với đoạn cắt sản phẩm PCR tiến hành 160C vòng 24 giờ, sử dụng enzyme T4 ligaza Sau đó, dịch phản ứng biến ... Điện di đồ sản phẩm PCR gene chaperonin dòng đậu tương Sau 32 chu kì phản ứng, sản phẩm PCR kiểm tra điện di gel agarose 0,8% kết cho thấy ba dòng đậu tương thu sản phẩm PCR đặc hiệu Kích thước...
- 29
- 2,300
- 20
Khóa luận nghiên cứu tách dòng, giải trình tự và thiết kế vecto biểu hiện gene novw tham gia sinh tổng hợp kháng sinh novobiocin
... mi chy PCR gen novW ta s dng cp mi cho phn ng l mi xuụi (WF -5- GAA TTC CGA TCA CGA GGA GTT GAA GGA -3) v mi nguc (WR -5- AA GCT TCA CGG GCC CGG GTC TCC GAC - 3) - Chy PCR Cỏc thnh phn PCR ADN ... GCC CGG GTC TCC GAC - 3) - Chy PCR Cỏc thnh phn PCR ADN 25 ng dNTP 200 mM Mi PCR (PCR primer) 200 mM MgCl2 m PCR Enzym Taq polymerase n v 1.5 mM 1X* 35 V Vn Hựng Lp: 06 - 04 Khoa Cụng Ngh ... phm PCR ca gen novW Gen novW cú cha 624 bp nucleotide, gen ny c tỏch dũng nh phn ng PCR nhõn gen novW phn ng ny c thc hiờn vi phn ng liờn tc vi cỏc giỏ tr Tm khỏc (t 60 63,5 0C) tỡm sn phm PCR...
- 56
- 474
- 0
Avira Antivir Updates Generator 2.0 – Đóng gói bản cập nhật Offline cho Avira Antivir doc
... thay đổi Sau bấm nút GO để chạy, ứng dụng tiến hành đóng gói liệu cập nhật Avira cho bạn Sau tạo xong gói liệu lưu trữ dekstop mang định dạng vdf Sau bạn đóng ứng dụng lại, kích hoạt Avira Antivirus...
- 3
- 495
- 1
Tách dòng và biểu hiện gene mã hóa chitinase của Bacillus licheniformis KNUC213 trong nấm men Pichia pastoris
... Bảo quản mẫu Sản phẩm phản ứng PCR đƣợc kiểm tra điện di gel agarose 1% Kích thƣớc đoạn DNA thu đƣợc sau phản ứng PCR đƣợc so sánh với thang DNA chuẩn (Fermentas) Sản phẩm PCR đƣợc tinh kit PureLinkTM ... chi phản ứng PCR đƣợc thể hình 3.4 Hình 3.4 Điện di đồ kiểm tra sản phẩm PCR cặp mồi ChiBF ChiBR gel agarose 1,0% (Đƣờng chạy M: Thang DNA chuẩn (0,25-10kb); Đƣờng chạy 1: Sản phẩm phản ứng PCR ... N-acetyl-D-glucosamine dung dịch phản ứng đƣợc xác định thông qua đƣờng chuẩn 2.2.16 Xác định đặc tính rCHI Xác định pH tối ƣu cho phản ứng xúc tác rCHI đƣợc thực cách thay đổi dịch đệm phản ứng có pH 4,0; 4,5;...
- 74
- 693
- 3
Tách dòng và xác định trình tự gene glta mã hóa cho enzyme citrate synthase từ vi khuẩn e coli
... Sinh t bo PCR Sn phm PCR ó tinh sch Vector tỏch dũng PTZ57R/T Gn ni Sn phm gn ni gene Vi khun E coli DH5 kh bin Bin np v chn lc trờn MT chn lc Khun lc trng Sng lc bng PCR Khun lc dng tớnh PCR Chn ... phỏp PCR 40 Phn ng PCR khuch i gene gltA vi cp mi c hiu c thc hin vi tng th tớch 15àl chy 25 chu kỡ Thnh phn phn ng c trỡnh by theo bng: Bng 8: Thnh phn phn ng PCR HểA CHT TH TCH( àl) DNA khuụn PCR ... 9: Chu trỡnh nhit ca phn ng PCR 40 Hỡnh 10: Hỡnh nh tỏch chit DNA tng s ca E coli 47 Hỡnh 11: Ti u húa nhit gn mi cho phn ng PCR .48 Hỡnh 12: Sn phm PCR trc v sau tinh sch ...
- 78
- 325
- 0
Đề Tài Nghiên Cứu Tách Dòng Và Xác Định Trình Tự Gene Lycopene Beta - Cyclase
... phm PCR Tin hnh phn ng PCR sau 24h mi thc hin phn ng gn ni cú th sn phm PCR a vo ó b hng u A hot tớnh Exonnuclease Sn phm PCR em thc hin phn ng gn ni khụng c tinh sch cỏc thnh phn phn ng PCR ... 250C - Thu khun Pantoea ananatis s dng lm khuụn cho phn ng PCR 3.4.4 Phng phỏp PCR khuch i gene crtY t Pantoea ananatis Thc hiờn phn ng PCR nhõn bn on gene crtY vi cp mi c trng crtY-F v crtY-R ... qu tỏch dũng gene crtY ln Thc hin phn ng PCR vi cp mi c hiu, thớ nghim ny chỳng tụi s dng trc tip 2àl t bo ó pha loóng 10 ln so vi ln PCR trc Sn phm PCR c tinh sch theo Kit MEGA- sinpTM Agarose...
- 47
- 627
- 0
Tách dòng và thiết kế vector biển hiện nhóm gene doxa và dnrv tham gia điều hoà sinh tổng hợp doxorubicin trong xạ khuẩn streptomyces lividans TK24
... nằm mồi xuôi mồi ngược không lớn 2.2.2 Phương pháp PCR Định nghĩa PCR chữ viết tắt cụm từ Polymerase Chain Reaction (phản ứng trùng hợp - phản ứng khếch đại gen) nhà bác học Kary Mullis cộng (Mỹ) ... tiến hành Thành phần phản ứng nối ADN sau: Vector : µl Insert ADN: µl T4 ADN Ligase : µl 2X Rapid Ligation Buffer : µl Tổng phản ứng : : 10 µl Hỗn hợp phản ứng trộn Phản ứng ủ qua đêm 160C Tiến ... Enzyme EcoRI µl µl Đệm Buffer K 10X 8,5 µl 8,5 µl Tổng phản ứng 64,5 µl 64,5 µl Hỗn hợp phản ứng trộn Thực phản ứng 300C 4giờ Sản phẩm phản ứng cắt kiểm tra cách điện di gel agarose 2.2.9 Phương...
- 73
- 615
- 0
Bóc tách động mạch chủ
... lý động mạch chủ van động mạch chủ lá, dãn gốc động mạch chủ, hội chứng Turner, hội chứng Noonan, hội chứng Marfan, hội chứng Ehrlers Danlos nguyên nhân thường gặp bóc tách động mạch chủ người ... thật bò tắc hoàn toàn BIỂU HIỆN LÂM SÀNG Các triệu chứng lâm sàng bóc tách động mạch chủ thường liên quan tới rối loạn tưới máu Đau triệu chứng thường gặp nhất, 93% trường hợp có đau ngực, 85% ... lê, 25% trường hợp xảy động mạch chủ xuống, 10% động mạch chủ bụng % cung động mạch chủ Có băng chứng thuyết phục cho thấy lớp nội mạc bò rách vò trí động mạch chủ có độ chênh áp lực cao kỳ tâm...
- 5
- 800
- 8
Bóc tách động mạch chủ
... nhân người trẻ: •Van động mạch chủ lá, •dãn gốc động mạch chủ, •hội chứng Turner, •hội chứng Noonan, •hội chứng Marfan, •hội chứng Ehrlers Danlos •50% trường hợp bóc tách động mạch chủ cấp phụ nữ ... yếu thành mạch thúc đẩy động mạch chủ bò bóc tách Tổn thương tưới máu 31% trường hợp Triệu chứng lâm sàng Đau: 93% trường hợp có đau ngực, 85% trường hợp đau xuất đột ngột Đa số trường ... hợp, –khi có dấu hiệu thường bệnh nhân bò chèn ép tim tổn thương động mạch thân tay đầu Triệu chứng lâm sàng Liệt hạ chi: –thường gặp bóc tách động mạch chủ type B với tần suất – 10% Huyết áp...
- 17
- 639
- 4
Tách dòng và thiết kế vector chuyển gen của gen mã hoá protein vỏ (coat protein) từ virus gây bệnh đốm vòng cây đu đủ (PRSV) ở việt nam
... vào phản ứng với nồng độ đơn vị/ 10àl phản ứng Hỗn hợp phản ứng đợc trộn theo thứ tự ddH2O Đệm T4 ligase x10 Đoạn gen cần gắn 34 àl àl àl Vector mở vòng T4 ligase (4 đơn vị/àl) thể tích Phản ứng ... phẩm đợc sử dụng cho phản ứng khuếch đại đoạn cDNA T + Khuếch đại đoạn cDNA: hỗn hợp phản ứng đợc chuẩn bị theo trình tự bảng sau: Thành phần phản ứng Dung dịch MgCl2 Đệm PCR 10X Nớc khử ion Mồi ... theo phản ứng: + Xử lý với enzim: Hỗn hợp phản ứng đợc trộn theo thứ tự (30 -x - 3,5) àl àl x àl (~1àg) 0,5àl 30àl H20 Đệm 10X riêng enzim Dịch plasmid Enzim (10U/àl) Tổng thể tích phản ứng +...
- 54
- 1,611
- 25
Đánh giá tính đa dạng của các virus gây bệnh xoan lá cà chua ở Việt Nam thong qua tách dòng, xác định và so sánh trình tự đoạn gen mã hóa cho protein vỏ
... rộng rãi 1.4 Một số kỹ thuật sinh học phân tử ứng dụng nghiên cứu bệnh vi rút 1.4.1 Kĩ thuật PCR Kĩ thuật PCR (Polymerase Chain Reaction -chuỗi phản ứng trùng hợp nhờ Polymerase) Karl Mullis cộng ... pháp PCR Trên sở trình tự gen CP đợc công bố ngân hành gen giới, thiết kế cặp mồi, để nhân gen CP vi rút thông qua phản ứng PCR Bảng Thành phần phản ứng PCR Thành phần Nớc cất hai lần Buffer PCR ... trình gel, đầu -A bị gãy Do đó, thực phản ứng gắn đầu -A vào sản phẩm PCR Sau tinh sạch, thực phản ứng gắn sản phẩm PCR vào vectơ tách dòng Thành phần phản ứng gắn đợc trình bày bảng 7, hỗn hợp...
- 42
- 1,532
- 7
Tách dòng, xác định và so sánh trình tự gen mã hoá Nuclear Inclusion Body protein (NIb) của một số dòng virus gây bệnh đốm vòng trên cây đu đủ (Papaya Ringspot virus-PRSV) ở Việt Nam
... Taq polymerase PCR Reverse transcriptase Mồi nhẫu nhiên cADN (mẫu PCR) Hình Sơ đồ minh họa kỹ thuật RT -PCR 1.5.2 Kỹ thuật PCR Kỹ thuật PCR (Polymerase Chain Reaction chuỗi phản ứng trùng hợp) ... tổng số hay không thực phản ứng RT -PCR 3.3 Kết RT -PCR ARN tổng số sau tách chiết đợc sử dụng cho phản ứng RT -PCR để nhân gen NIb với cặp mồi đợc thiết kế Nếu phản ứng RT -PCR xảy đặc hiệu, theo ... nhiệt cho phản ứng PCR Bớc Phản ứng Nhiệt độ (0C) Thời gian Biến tính 96 phút Biến tính 96 10 giây Gắn mồi 55 giây Kéo dài chuỗi 60 phút Hoàn tất kéo dài 72 phút Chu kỳ 25 Kết thúc phản ứng 30 phút...
- 33
- 1,406
- 5
tách dòng và thiết kế vector chuyển gen mã hóa protein vỏ từ virus gây bệnh đốm vòng cây đu đủ ở Việt Nam
... vào phản ứng với nồng độ đơn vị/ 10àl phản ứng Hỗn hợp phản ứng đợc trộn theo thứ tự ddH2O Đệm T4 ligase x10 Đoạn gen cần gắn 34 àl àl àl Vector mở vòng T4 ligase (4 đơn vị/àl) thể tích Phản ứng ... phẩm đợc sử dụng cho phản ứng khuếch đại đoạn cDNA T + Khuếch đại đoạn cDNA: hỗn hợp phản ứng đợc chuẩn bị theo trình tự bảng sau: Thành phần phản ứng Dung dịch MgCl2 Đệm PCR 10X Nớc khử ion Mồi ... theo phản ứng: + Xử lý với enzim: Hỗn hợp phản ứng đợc trộn theo thứ tự (30 -x - 3,5) àl àl x àl (~1àg) 0,5àl 30àl H20 Đệm 10X riêng enzim Dịch plasmid Enzim (10U/àl) Tổng thể tích phản ứng +...
- 54
- 993
- 1
Đánh giá tính đa dạng của các virus gây bệnh xoan lá cà chua ở Việt Nam thong qua tách dòng, xác định và so sánh trình tự đoạn gen mã hóa cho protein vỏ
... rộng rãi 1.4 Một số kỹ thuật sinh học phân tử ứng dụng nghiên cứu bệnh vi rút 1.4.1 Kĩ thuật PCR Kĩ thuật PCR (Polymerase Chain Reaction -chuỗi phản ứng trùng hợp nhờ Polymerase) Karl Mullis cộng ... pháp PCR Trên sở trình tự gen CP đợc công bố ngân hành gen giới, thiết kế cặp mồi, để nhân gen CP vi rút thông qua phản ứng PCR Bảng Thành phần phản ứng PCR Thành phần Nớc cất hai lần Buffer PCR ... trình gel, đầu -A bị gãy Do đó, thực phản ứng gắn đầu -A vào sản phẩm PCR Sau tinh sạch, thực phản ứng gắn sản phẩm PCR vào vectơ tách dòng Thành phần phản ứng gắn đợc trình bày bảng 7, hỗn hợp...
- 43
- 1,281
- 2
2.Tác động của đồng EURO tới hệ thống thanh toán quốc tế trên thế giới và tại Việt Nam
... trách nhiệm chứng từ giả mạo, thực tế Ngân hàng khó phát chứng từ giả mạo Chính vậy, giao dịch cần có kiểm tra thông tin đối tác, công nhận L/C pháp luật chứng thực tránh rủi ro chứng từ giả mạo ... việc lập chứng từ hàng hoá xuất Lập chứng từ phù hợp điều khoản L/C nghiệp vụ kỹ thuật quan trọng đảm bảo thu hồi ngoậi tệ an toàn Một số công ty đào tạo phân công cán chuyên trách lập chứng từ hàng ... nghiệp vụ cao Bốn là: công nghệ toán Ngân hàng lạc hậu cha đáp ứng đợc yêu cầu thực tiễn Năm là: sản phẩm dịch vụ cha đa dạng, cha đáp ứng hết đòi hỏi khách đòi hỏi thơng mại quốc tế tình hình Trong...
- 62
- 505
- 1
Bài 2: Chuyển động thẳng đều
- 24
- 974
- 0
Tìm thêm: xác định các mục tiêu của chương trình khảo sát các chuẩn giảng dạy tiếng nhật từ góc độ lí thuyết và thực tiễn khảo sát chương trình đào tạo gắn với các giáo trình cụ thể xác định thời lượng học về mặt lí thuyết và thực tế điều tra với đối tượng sinh viên học tiếng nhật không chuyên ngữ1 khảo sát thực tế giảng dạy tiếng nhật không chuyên ngữ tại việt nam khảo sát các chương trình đào tạo theo những bộ giáo trình tiêu biểu nội dung cụ thể cho từng kĩ năng ở từng cấp độ xác định mức độ đáp ứng về văn hoá và chuyên môn trong ct phát huy những thành tựu công nghệ mới nhất được áp dụng vào công tác dạy và học ngoại ngữ mở máy động cơ lồng sóc mở máy động cơ rôto dây quấn đặc tuyến mômen quay m fi p2 đặc tuyến tốc độ rôto n fi p2 động cơ điện không đồng bộ một pha sự cần thiết phải đầu tư xây dựng nhà máy phần 3 giới thiệu nguyên liệu từ bảng 3 1 ta thấy ngoài hai thành phần chủ yếu và chiếm tỷ lệ cao nhất là tinh bột và cacbonhydrat trong hạt gạo tẻ còn chứa đường cellulose hemicellulose chỉ tiêu chất lượng theo chất lượng phẩm chất sản phẩm khô từ gạo của bộ y tế năm 2008 chỉ tiêu chất lượng 9 tr 25